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细胞活力测定


试剂:
1.二丙酸酯 荧光素溶液: 取l0mg二丙酸 荧光素于5ml 丙酮中,将此 溶液逐滴加入 5ml PH5-6生 理盐水或0.65 M的甘露醇溶 液中,直到出 现永久性乳白 沉淀为止。 2.0.01%吖 啶橙的生理盐 水溶液
实验方法
利用荧光增白剂 观察植物细胞壁
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实验方法
DNA分布的观察
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实验方法
细胞二丙酸酯荧光素分解酶的活性及细胞 活力的测定
新鲜紫鸭趾 草花粉或蚕 豆表皮
加二丙酸酯 荧光素溶液 一滴5-lO 分钟 荧光显微镜 下观察
悬浮细胞
染色液数 滴直接加 入细胞培 养液
离心收集
用无细胞 和无染料 的培养液 洗二次
收集观察
实验方法
吖啶橙鉴定细胞死活
细胞经吖啶 橙染色
活细胞核呈 黄绿色或亮 绿色荧光
细胞质为淡 红色
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实验方法
吖啶橙鉴定细胞死活
口腔粘 膜上皮 细胞
滴加1-2 滴0.01% 吖啶橙生 Nhomakorabea理盐水溶 液
染色5分 钟后于荧 光显微镜 下观察
谢谢
实验用品
材料: 洋葱 新鲜紫鸭趾 草花粉或蚕 豆原生质体 悬液,人口 腔上皮细胞 用品: 荧光显微镜, 载玻片,镊 子,烧杯 荧光显微镜, 载玻片,盖 玻片,镊子, 烧杯,牙签 试剂:
(1) O.01% 吖 啶橙生理盐水 溶液 (2) O.02% 异 硫氰酯荧光素 生理盐水溶液 (3) O.Ol% 罗 丹明生理盐水 溶液 (4) 荧光增白 剂溶液,将荧 光增白剂溶于 0.4M山梨醇溶 液中,使浓度 达到0.1%。
荧光细胞化学测定及细胞活力的测定
实验目的
• 学习荧光显微镜的使用 • 了解荧光显微技术原理和方法 • 以及荧光技术在细胞化学方面的应用
实验原理
荧光显微技术
利用短波光照射物质,激发其发射荧光在荧光显微镜下可以检 视的方法
自发荧光、次生荧光
1. 指有些生物体受到短 波光照射后,直接发 出的荧光 2. 生物材料受到短波光 照射后并不发光,当 它吸附荧光染料后产 生荧光
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实验方法
蛋白 质 分 布 的 观 察
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实验方法
线 粒 体 观 察
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实验方法
细胞二丙酸酯荧光素分解酶的活性及细胞 活力的测定
二丙酸酯荧 光素是非荧 光性的亲酯 性化合物;
进入细胞活力 较强细胞内,细 胞内活酯酶,将 二丙酸酯荧光 素的荧光素分 解
在荧光显微 镜下发出黄 绿荧光
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