土壤铵态氮的测定2 mol·L-1KCl浸提—蒸馏法1方法原理用2mol·L-1KCl浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。

取一份浸出液在半微量定氮蒸馏器中加MgO（MgO是弱碱，有防止浸出液中酰铵有机氮水解的可能）蒸馏。

蒸出的氨以H3BO3吸收，用标准酸溶液滴定，计算土壤中的NH4+—N含量。

2主要仪器振荡器、半微量定氮蒸馏器、半微量滴定管（5mL）。

3试剂（1）20g·L-1硼酸—指示剂。

20gH3BO3（化学纯）溶于1L水中，每升H3BO3溶液中加入甲基红—溴甲酚绿混合指示剂5mL并用稀酸或稀碱调节至微紫红色，此时该溶液的pH为。

指示剂用前与硼酸混合，此试剂宜现配，不宜放。

（2）mol·L-11/2H2SO4标准液。

量取H2SO4（化学纯），加蒸馏水稀释至5000mL，然后用标准碱或硼酸标定之，此为mol·L-1(1/2H2SO4)标准溶液，再将此标准液准确地稀释4倍，即得·L-11/2H2SO4标准液（注1）。

（3）2 mol·L-1KCl溶液称KCl（化学纯）14901g溶解于1L水中。

（4）120g·L–1MgO悬浊液MgO12g经500～600℃灼烧2h，冷却，放入100mL水中摇匀。

4操作步骤取新鲜土样（注2），放入100mL三角瓶中，加入2mol·L-1KCl 溶液。

用橡皮塞塞紧，振荡30min，立即过滤于50mL三角瓶中（如果土壤NH4+—N含量低，可将液土比改为:1）。

吸取滤液（含NH4+—N25µg以上）放入半微量定氮蒸馏器中，用少量水冲洗，先把盛有20g·L–1硼酸溶液5mL的三角瓶放在冷凝管下，然后再加120g·L–1MgO悬浊液10mL于蒸馏室蒸馏，待蒸出液达30～40mL时（约10min）停止蒸馏，用少量水冲洗冷凝管，取下三角瓶，用·L-11/2H2SO4标准液滴至紫红色为终点，同时做空白试验。

5结果计算土壤中铵态氮NH4+—（N）含量（mg·kg-1）=式中：c——·L-11/2H2SO4标准溶液浓度；V——样品滴定硫酸标准溶液体积(mL)；V——空白滴定硫酸标准溶液体积(mL)；——氮的原子摩尔质量（g·mol-1）；ts——分取倍数；103——“换算系数”（包括mL换算为L，10-3；g换算为mg，103；换算为kg，103）；m——烘干样品质量（g）。

2mol·L-1KCl浸提—靛酚蓝比色法1方法原理2mol·L-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性 NH4+浸提出来。

土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。

在含氮～·L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。

.2试剂（1）2mol·L-1KCl溶液称取氯化钾（KCl，化学纯）溶于水中，稀释至1L。

（2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH，化学纯）10g和硝基铁氰化钠[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀释至1L。

此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O, 化学纯）、磷酸钠（Na3PO4·12H2O, 化学纯）和·L-1次氯酸钠(NaOCl，化学纯，即含5%有效氯的漂白粉溶液)10mL溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（4）掩蔽剂将400g·L-1的酒石酸钾钠（KNaC4H4O6·4H2O, 化学纯）与100g·L-1的EDTA二钠盐溶液等体积混合。

每100mL混合液中加入10 mol·L-1氢氧化钠。

（5）µg·mL–1铵态氮（NH4+—N）标准溶液称取干燥的硫酸铵[(NH4)2SO4，分析纯]溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制备成含铵态氮（N）100µg·mL–1的贮存溶液；使用前将其加水稀释40倍，即配制成含铵态氮（N）µg·mL–1的标准溶液备用。

3仪器与设备往复式振荡机、分光光度计。

4分析步骤（1）浸提称取相当于干土的新鲜土样（若是风干土，过10号筛）准确到，置于200mL三角瓶中，加入氯化钾溶液100mL，塞紧塞子，在振荡机上振荡1h。

取出静置，待土壤—氯化钾悬浊液澄清后，吸取一定量上层清液进行分析。

如果不能在24h内进行，用滤纸过滤悬浊液，将滤液储存在冰箱中备用。

（2）比色吸取土壤浸出液2mL～10mL(含NH4+—N2µg～25µg)放入50mL 容量瓶中，用氯化钾溶液补充至10mL，然后加入苯酚溶液5mL和次氯酸钠碱性溶液5mL，摇匀。

在20℃左右的室温下放置1h后（注1），加掩蔽剂1mL以溶解可能产生的沉淀物，然后用水定容至刻度。

用1cm比色槽在625nm波长处（或红色滤光片）进行比色，读取吸光度。

（3）工作曲线分别吸取、、、、、NH4+—N标准液于50mL容量瓶中，各加10mL氯化钠溶液，同（2）步骤进行比色测定。

5结果计算土壤中NH4+—（N）含量（mg·kg-1）=式中：ρ——显色液铵态氮的质量浓度(µg·mL–1)；V——显色液的体积(mL)；mts——分取倍数；m——样品质量（g）。

注1. 显色后在20℃左右放置1h,再加入掩蔽剂.过早加入会使显色反应很慢,蓝色偏弱;加入过晚,则生成的氢氧化物沉淀可能老化而不易溶解.土壤硝态氮的测定酚二磺酸比色法1方法原理 土壤浸提液中的NO 3－—N 在蒸干无水怕条件下能与酚二磺酸试剂作用，生成硝基酚二磺酸。

C 6H 3OH(HSO 3)2+HNO 3→C 6H 2OH(HSO 3)2 NO 2+H 2O2，4-酚二磺酸 6-硝基酚-2，4-二磺酸此反应必须在无水条件下才能迅速完成，反应产物在酸性介质中无色，碱化后则为稳定的黄色溶液，黄色的深浅与NO 3－—N 含量在一定范围内成正相关，可在400～425nm 处（或用蓝色滤光片）比色测定。

酚二磺酸法的灵敏度很高，可测出溶液中·L -1 NO 3－—N ，测定范围为～2mol·L -1。

2主要仪器 分光光度计、水浴锅、瓷蒸发皿。

3试剂 CaSO 4·2H 2O （分析纯、粉状）、CaCO 3（分析纯、粉状）、Ca(OH)2（分析纯、粉状）、MgCO 3（分析纯、粉状）、Ag 2SO 4（分析纯、粉状）、1:1 NH 4OH 、活性碳（不含NO 3－）。

溶液配制（1）酚二磺酸试剂：称取白色苯酚（C 6H 5OH ，分析纯）置于500mL 三角瓶中，以150mL 纯浓H 2SO 4溶解，再加入发烟H 2SO 475mL 并置于沸水中加热2h ，可得酚二磺酸溶液，储于棕色瓶中保存。

使用时须注意其强烈的腐蚀性。

如无发烟H 2SO 4，可用酚，加浓H 2SO 4225mL ，沸水加热6h 配面。

试剂冷后可能析出结晶，用时须重新加热溶解，但不可加水，试剂必须贮于密闭的玻塞棕色瓶中，严防吸湿。

（2）10µg·mL -1 NO 3－—N 标准溶液：准确称取KNO 3（二级）溶于水，定容1L ，此为100µg·mL -1 NO 3－—N 溶液，将此液准确稀释10倍，即为10µg·mL -1 NO 3－—N 标准溶液。

.4操作步骤（1）浸提 称取新鲜土样（注1）50g 放在500mL 三角瓶中，加入CaSO 4·（注2）和250mL 水，盖塞后，用振荡机振荡10min 。

放置5 min 后，将悬液的上部清液用干滤纸过滤，澄清的滤液收集地干燥洁净的三角瓶中。

如果滤液因有机质而呈现颜色，可加活性碳除之（注3、4）。

（2）测定 吸取清液 25～50mL （含NO 3－—N20～150µg）于瓷蒸发皿中，加CaCO 3约（注5），在水浴上蒸干（注6），到达干燥时不应继续加热。

冷却，迅速加入酚二磺酸试剂2 mL ，将皿旋转，使试剂接触到所有的蒸干物。

静止10min 使其充分作用后，加水20 mL ，用玻璃棒搅拌直到蒸干物完全溶解。

冷却后缓缓加入1：1 NH 4OH （注7）并不断搅混匀，至溶液呈微碱性（溶液显黄色）再多加2mL ，以保证NH 4OH 试剂过量。

然后奖溶液全部转入100mL 容量瓶中，加水定容（注8）。

在分光光度计上用光径1cm 比色杯在波长420nm 处比色，以空白溶液作参比，调节仪器零点。

（3）NO3－—N工作曲线绘制：分别取10µg·mL-1NO3－—N标准液0、1、2、5、10、15、20mL于蒸发皿中，在水浴上蒸干，与待测液相同操作，进行显色和比色，绘制成标准曲线，或用计算器求出回归方程。

5结果计算土壤中NO3－—N含量（mg·kg-1）=：ρ(NO3－—N)——从标准曲线上查得（或回归所求）的显色液NO3－—N质量浓度（µg·mL-1）；V——显色液的体积（mL）；ts——分取倍数；m——烘干样品质量，g。

注释注1．硝酸根为阴离子，不为土壤胶体吸附，且易溶于水，很易在土壤内部移动，在土壤剖面上下层移动频繁，因此测定硝态氮时注采样深度。

即不仅要采集表层土壤，而且要采集心土和底土，采样深度可达40cm、60 cm以至120 cm。

试验证明，旱地土壤上分析全剖面的硝态氮含量能更好地反映土壤人供氮水平。

和表层土壤比较，则全剖面的硝态氮含量与生物反应之间有更好的相关性，土壤经风或烘干易引起NO3－—N变化，故一般都用新鲜土样测定。

注2．用酚二磺酸法测定硝态氮，首先要求浸提液清彻，不能混浊，但是一般中性或碱性土壤滤液不易澄清，且带有机质的颜色，为此在浸提液中应加入凝聚剂。

凝聚剂的种类很多，有CaO、Ca(OH)2、CaCO3、MgCO3、KAl(SO4)2、CuSO4、CaSO4等，其中CuSO4有防止生物转化的作用，但在过滤前必须以氢氧化钙或碳酸镁除去多余的铜，因此以CaSO4法提取较为方便。

注3．如果土壤浸提液由于有机质而有较深的颜色，则可用活性炭除去，但不宜用H2O2，以防最后显色时反常。

注4．土壤中的亚硝酸根和氯离子是本法的主要干扰离子。

亚硝酸和酚二磺酸产生同样的黄色化合物，但一般土壤中亚硝酸含量极少，可忽略不计。

必要时可加少量尿素、硫尿和氨基磺酸（20g·L-1NH2SO3H）以除去之。