常用免疫组化试剂（类别）介绍一、用于鉴别诊断(一)上皮源性: １、细胞角蛋白/ｃytokeraｔin、ＣK: 目前,商品化得细胞角蛋白有２0多种，不同得分子量代表不同类型得上皮标志。
通常将CＫ分为两大类型:Ⅰ型(低分子量);Ⅱ型（高分子量）.理论上讲,大多数单层上皮表达低分子量得CK；复层上皮多表达高分子量得CK;移形上皮（膀胱)与假复层上皮（呼吸道得被覆上皮）既表达低分子量得ＣK,也表达高分子量得CＫ。
在癌组织中，低分子量得ＣK多在腺癌中表达，高分子量得CK多在鳞癌中表达.目前为止,未发现任何一种上皮只含有一种CK，某些上皮可含２－１０种不同分子量得ＣK。
因此，目前试图应用单一得CK免疫表型来确定某种特定得上皮性肿瘤就是不可能得。
同样,应用CK来区别腺癌、类癌与间皮瘤也就是困难得。
因此,ＣK得免疫组化结果判断就是一个较为复杂得问题,在应用这类标记物作为腺癌与鳞癌得鉴别应特别注意。
有必要时，应联合用多种CＫ加以综合判断。
CK得阳性表达还包括有间变癌、双向分化得滑膜肉瘤、脊索瘤、胚胎癌、间皮瘤、上皮样肉瘤、胸腺瘤等. CＫ得阴性表达有:副节瘤单向分化得滑膜肉瘤、软骨(肉)瘤、精原细胞瘤、淋巴瘤、脑膜瘤、恶黑、恶纤组、软组织肉瘤(除特殊类型外）.在判断CK免疫组化结果时应注意几点：(1）CK得单克隆抗体优于多克隆抗体;(2)CK常出现斑点状得假阳性反应,应注意识别; （３）虽然大多数CK多在胞浆表达,但CK17多在胞核表达;(4）绝大多数ＣK抗体需用胰酶消化,可增加阳性表达率与染色强度;(5）部分非上皮性肿瘤(平滑肌肉瘤）可见有CK表达，在诊断时应注意;（6)淋巴结、扁桃体与脾组织中得滤泡外得网织细胞含有CＫ8与１8以及desmiｎ,在判断淋巴结转移癌与肌源性肉瘤转移时应根据组织学综合判断. ２、上皮膜抗原（epｉｔhelialmeｍbraneantigen／ＥMA)：EＭA就是上皮细胞分泌得一种乳脂小球膜糖蛋白,广泛存在于人体各种上皮细胞中(也存在于间皮细胞、浆细胞、组织细胞与T细胞淋巴瘤中），其分布与角蛋白相似,但对内脏腺上皮优于细胞角蛋白，尤其就是分化差得癌EMA有时可呈强阳性表达。
EMＡ可作为上皮源性肿瘤得常用标记物。
ＥMA阳性表达得肿瘤有鳞癌、胃肠道腺癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、间皮瘤、滑膜肉瘤、甲状腺乳头状癌、上皮样肉瘤等. 在判断EMA免疫组化结果时应注意几点: (1）EMA虽然就是上皮细胞非常敏感得标记,但一些非上皮性肿瘤(如浆细胞、组织细胞与Ｔ细胞淋巴瘤)也可阳性表达。
因此在癌与其她间叶性肿瘤鉴别时不能作为唯一得参考标记; (２)EMA对内脏上皮源性肿瘤得敏感性优于体表上皮源性肿瘤,因此在腺癌中得表达明显高于鳞癌。
3、桥粒蛋白:就是上皮细胞特有得结构,就是一种广谱得上皮性标记.鳞癌、腺癌、移形细胞癌、未分化癌与间皮瘤、尤文氏肉瘤表达。
在判断桥粒蛋白免疫组化结果时应注意几点:(1)桥粒蛋白也可在心肌、脑膜瘤、卵巢得颗粒细胞瘤与淋巴结得网织细胞中表达; (2)甲状腺间变癌阳性表达率低;（3)冰冻切片效果优于石蜡切片。
（二）间叶源性肿瘤得标记1、波形蛋白Vｉmeｎtin：就是一种52－58得胞浆蛋白。
主要分布于间叶细胞及其起源得肿瘤,就是间叶细胞及其肿瘤得特异性标记。
横纹肌肉瘤、平滑肌肉瘤与非肌源性软组织肿瘤如纤维肉瘤、脂肪肉瘤、血管肉瘤、恶纤组、精原细胞瘤、雪旺氏瘤与骨肿瘤Vimentin 就是一个关键标记。
此外,血管球瘤、颗粒细胞肌母细胞瘤、淋巴瘤、白血病与恶黑等均可有Vｉmenｔin表达。
在判断Vimentin免疫组化结果时应注意几点：(1)部分肿瘤(如间皮瘤、滑膜肉瘤、乳腺癌、肺腺癌等)除Vｉmentiｎ（＋)表达外,可同时又有cytokｅratｉn得表达。
应结合其组织学形态加以诊断；(2)福尔马林固定得组织标本，vimｅnti ｎ假阴性并不少见,冰冻切片酒精固定得组织可提高其敏感性与可靠性; (3)ｖｉmentin不能单独用于软组织肿瘤得诊断，多提倡与其她特异性标记物联合使用。
2、结蛋白ｄesmin:就是一种分子量为5０-5５ku得细胞浆蛋白，胚胎与成人横纹肌或平滑肌及其肿瘤均可表达。
子宫、皮肤、胃肠道及其她部位得平滑肌多呈(＋）表达．现已发现desmin 在良性肿瘤得阳性率与染色强度明显高于恶性肿瘤;高分化得平滑肌肉瘤与染色强度明显高于低分化得平滑肌肉瘤。
Sustｅr报道5例皮肤就是上皮性平滑肌肉瘤均为(-)，而actin 与viｍeｎtin均为(+)反应。
因此目前认为,多应用配套抗体,即与其她肌源性抗体联合应用，不能只根据deｓmiｎ(－）来排除平滑肌肉瘤得诊断。
在判断desmiｎ免疫组化结果时应注意几点：（1)非常原始得肌源性肿瘤常不表达des ｍin;(２）某些非肌源性肿瘤也有deｓｍin表达,如纤维肉瘤、恶纤组、腺泡状软组织肉瘤与个别腺癌；（3）常规福尔马林固定、石蜡包埋得低分化横纹肌肉瘤可能表现假（－)结果；(4)desmin不能用于区别横纹肌肉瘤还就是平滑肌肉瘤; （5)血管平滑肌不表达deｓｍin。
3、肌动蛋白Actin:就是一种具有收缩能力得微丝蛋白,几乎分布于所有得肌型细胞，根据其结构形式得不同,至少有6种不同得类型，即横纹肌型、心肌型、平滑肌型(两种）与非肌源型（两种)。
目前商品化得Actin包括有肌肉型(HHF3５),在心肌、平滑肌与横纹肌细胞及其肿瘤中均有表达，尤其在低分化得横纹肌肉瘤与平滑肌肉瘤中得表达,其敏感性与特异性均比desmin高；Actｉｎ肌源节型，主要用于横纹肌及其肿瘤得诊断;Actin平滑肌型(SｍoothMuscle）,主要用于平滑肌及其肿瘤(肉瘤)得诊断。
在判断aｃtｉn免疫组化结果时应注意几点：(１)三种在肌源性肿瘤得诊断意义上，尚不能作为一个独立得诊断指标,因为三者之间存在交叉反应；(２)一些非肌源性肿瘤也可有Acｔin(＋）表达，如皮肤、口腔、喉、涎腺肿瘤以及星形细胞瘤等; (3)部分器官与组织得非肌上皮细胞也有Actin（＋）表达,如肺、食管、胃、十二指肠、膀胱得上皮细胞与肝脏、肾、胎盘以及胰岛细胞等；(4）HＨF35也可标记肌上皮细胞，但其敏感性与特异性均不如平滑肌型acｔｉn；（5）福尔马林固定得组织，部分病例可有一些非特异性染色。
４、肌红蛋白myoglｏbin：ｍyoｇlｏｂin被认为就是存在于正常横纹肌与横纹肌肿瘤中得一种分子量为１7、８ku得胞浆蛋白，可作为横纹肌肉瘤得特异性标记。
在判断myogｌobin免疫组化结果时应注意几点: （1)虽然ｍyoglobin有较高得特异性,但要注意其假(＋）反应,尤其就是坏死或退变以及残留得正常横纹肌均有myoｇlobin(+），应注意识别; （2）某些肿瘤如恶黑、浸润型乳腺癌、软组织淋巴瘤等也有myｏｇlobiｎ(＋）,这个可能就是瘤细胞破坏横纹肌时吞噬了myｏglobin所致；(3)烤片温度过高,>60℃时可能会破坏其抗原，造成假(－)。
（三)神经与内分泌细胞标记: 1、胶质纤维酸性蛋白GＦＡP:就是一种分子量为47ku得酸性蛋白。
研究发现:GFAP 不仅在星形神经胶质细胞及其肿瘤中存在,还见于各种类型得星形细胞瘤、混合性胶质瘤、多形性成胶质瘤、室管膜下巨细胞性星形细胞瘤、异位星形细胞瘤、松果体瘤与髓母细胞瘤中向胶质分化，以及含胶质成分得神经鞘瘤等肿瘤中.在判断GＦＡP免疫组化结果时应注意几点：(1)ＧＦAＰ不仅在星形细胞与胶质细胞中表达,其她脑肿瘤如成血管细胞瘤等也可表达，尤其就是伴有星形细胞分化时，因此应注意识别;（2）GＦAＰ作为中枢神经肿瘤得诊断与分类时,应密切结合ＨE得形态学改变,尤其就是儿童得脑肿瘤；（３)GFAP(＋)细胞得染色强度与数量与肿瘤分化程度有关，高分化得（＋)表达较好，低分化得表达较弱甚至(-)。
2、神经纤维细丝蛋白NF：就是神经元特异性中间丝蛋白,主要存在于神经细胞内,故作为神经细胞分化得标志。
肾上腺内外嗜铬细胞瘤等也可呈(+)反应。
神经节胶质细胞瘤、室管膜瘤、神经鞘瘤等(－）;另外，恶黑也可呈(+）。
3、Ｓ-10０蛋白：早期人们认为，S-100就是一种神经系统特异性蛋白存在于胶质细胞与雪旺氏细胞及其肿瘤中,后来得研究证明：Ｓ－1０0也存在于一些非神经源性得正常细胞与肿瘤中,如脂肪组织、脂肪瘤,偶见于脂肪肉瘤;软骨细胞、软骨瘤以及一部分软骨肉瘤等。
几乎所有得黑色素瘤Ｓ-100(+).S-１0０蛋白染色强度与瘤细胞得分化程度关系不大。
在判断Ｓ－100免疫组化结果时应注意几点：(1)Ｓ-100蛋白可在一些非神经源性细胞中表达,包括低分化癌，因此在神经系统肿瘤得诊断时应考虑到这点; （2）S-100蛋白阳性定位在一些细胞中可为胞浆,一些细胞为胞核,另一些细胞为胞浆／胞核共存; (3）由于S-100蛋白敏感性高,特异性差,所以在诊断上应用受到限制。
４、神经元特异性烯醇酶NSE：原先认为ＮＳE只存在于神经元中,现已证明，除神经元外,NSE也广泛存在于各种正常得神经内分泌细胞与许多相应得神经内分泌肿瘤中，包括不同部位得类癌、甲状腺髓样癌、嗜铬细胞瘤、副节瘤、胰岛细胞瘤、垂体腺瘤、肺得小细胞癌与皮肤得Meｒkｅl癌.而雪旺氏瘤、神经纤维瘤与成神经细胞瘤(－)。
NＳE(＋)表达为胞浆弥漫性着色．现有得资料表明,ＮＳE可在平滑肌、肌上皮细胞、肾小管细胞、淋巴细胞、支气管上皮细胞与Ⅱ型肺泡细胞中表达，因此NSE 得特异性引起怀疑。
在判断NSE免疫组化结果时应注意几点:（１）非神经元性肿瘤也有NＳＥ（＋）表达,包括胶质瘤、脑膜瘤、雪旺氏瘤、脉络丛乳头状瘤、神经瘤、乳腺纤维腺瘤、乳腺癌与肾细胞癌等;(2)NSE在神经病理学中得诊断价值应根据各种特殊病变加以认识;(３)虽然NSE在神经源性肿瘤得表达比神经纤维丝蛋白NF更为常见,但不能作为中枢神经系统肿瘤得特异性标记物;(4）由于NSＥ特异性差,因此不能单独使用,应与其她相应得标记物联合使用;(5)原始得神经内胚层来源得肿瘤常呈（-)。
5、突触素Syｎ:就是一种突触前酸性转膜蛋白，分子量为38kｕ。
SY可在许多神经源性与神经内分泌肿瘤中表达,如髓母细胞瘤、成神经细胞瘤、嗜铬细胞瘤、副节瘤、节细胞神经瘤、垂体腺瘤、甲状旁腺瘤、肺与胃肠道类癌、胰岛细胞瘤、甲状腺髓样癌等大多数神经内分泌肿瘤。
在髓母细胞瘤得IHＣ中，SY比NF更为敏感。
同时，ＳＹ比嗜铬素A更敏感,比NSE更特异．对胰岛细胞及其肿瘤得诊断比嗜铬素Ａ更可靠。
目前尚未发现SＹ在非神经源性肿瘤与非神经内分泌肿瘤表达得报道。
在判断Sｙn免疫组化结果时应注意几点: (1)冰冻切片效果最好，福尔马林固定、石蜡包埋得组织也可,但固定时间不宜过长,一般不超过2４h; (2)如果突触素含量低，用ＰAP法与ABC法可能检测不出(＋)结果，最好使用S-Ｐ法或与其相似得检测系统。