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现代食品科技
Modern Food Science and Technology
2009, Vol.25, No.11
2.2 脱蛋白多糖的制备
留时间，可给标准单糖混合样的气相色谱图中各色谱
取多糖粗品，加蒸馏水充分溶解，用 Sevage 法脱 峰定性。其结果见图 1 及表 1。
蛋白[3]，离心，取上清液对流水透析 48 h，再对蒸馏
色谱柱为日本岛津 OV-1701 石英毛细管柱（30 m×
φ0.32 mm）；氮气为载气，流量为 50.0 mL/min，分流
比为 1:50；氢火焰离子化检测器检测，C-R6A 积分仪 记录检测结果；氢气流量为 0.6 kg/cm2，空气流量为
0.5 kg/cm2；检测器和进样口温度均为 250 ℃；柱温采
103-106
的水解。
[3] 李卫旗,何国庆,李志昂.金耳水溶性多糖 JP-2 的分离及化学
（3）前人多采用硅烷化方法进行糖的衍生，由
结构的研究[J].中国食品学报,2003,3(3):13-17.
于顺式和反式构象的存在，硅烷化衍生物在气相色谱
[4] 张惟杰主编.复合多糖生化研究技术[M](第二版).杭州:浙江
水透析 24 h，无水乙醇沉淀，抽率得沉淀，真空冷冻
干燥，即得脱蛋白多糖。
2.3 多糖精品的制备
取适量脱蛋白的多糖，加蒸馏水充分溶解，上
Sephadex G-75 凝胶色谱柱，用蒸馏水洗脱，4.5 mL/
管自动分步收集，苯酚－硫酸法检测，合并主峰收集
管液，60 ℃真空浓缩，冷冻干燥得精制的枸杞多糖。
[J].色谱,1994,12(5): 351-354.
较好的实现枸杞多糖水解产物的衍生，其衍生物制备
1329
(School of Food Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China)
Abstract: Water-soluble polysaccharide was isolated and extracted from Lycium barbarum L.. The components of the water-soluble polysaccharide were identified and quantified by Gas Chromatography (GC). The polysaccharide was extracted by water and deposited by ethanol. Then the extract was deproteinated by Sevage method and further purified by Sephadex G-75 column. The results showed that the Lycium barbarum polysaccharide (LBP) contained rhamnose, arabinose, xylose, mannose, glucose and galactose, and their percentage were 5.59%, 45.57%, 4.07%, 1.85%, 7.83%, and 35.07%, respectively.
1 材料与设备
1.1 材料 枸杞子为宁夏枸杞的干燥成熟果实，购于药店。 体积分数为 95％乙醇、三氟乙酸、盐酸羟胺、无
水吡啶、无水醋酸酐、氯仿等试剂为试剂纯；标准单 糖：葡萄糖、岩藻糖、核糖、木糖、甘露糖、半乳糖、 阿拉伯糖、鼠李糖为色谱纯。
收稿日期:2009-07-27
基金项目：陕西师范大学青年科技项目（编号 200701015）。
表 2 枸杞多糖的单糖含量
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Tab.2 Contents of monosaccharides in LBP
简便、试剂易得，且每种单糖均可得到单一的色谱峰。
单糖 鼠李糖 阿拉伯糖 木糖 甘露糖 葡萄糖 半乳糖
[1] 田庚元.枸杞子糖缀合物的结构与生物活性研究[J].世界科
（2）多糖的水解常用硫酸，其用量不易控制，
学技术－中医药现代化, 2003,5(4): 22-30.
过多会导致多糖样品的炭化，而产生杂质峰，过少又
[2] 王涛,赵谋明.多糖的研究进展[J].现代食品科技,2007,23(1):
会水解不完全。本法采用三氟乙酸可较好的实现多糖
Key words: Lycium barbarum polysaccharide; Gas Chromatography; component
枸杞子（Lycium barbarum L.）始载于《神农本草 经》，是我国的一种传统中药材，有“补肾益精、养肝 明目”的功效，枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharide）近几年来被证实为枸杞子中具有高免疫活性和抗 衰老的有效成分[1-2]。枸杞多糖的提取方法各异，本实 验采取了一种新的提取工艺得到枸杞多糖精品，并首 次采用糖腈乙酰化法对其单糖组成进行了气相色谱分 析。
3.1.3 枸杞多糖中各单糖组分的含量
3 结果与讨论
组成枸杞多糖的各单糖组分的含量依据气相色 谱的面积归一化方法分析[6]，由气相色谱检测结果可
3.1 结果
知，枸杞多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、
3.1.1 标准单糖分析 由各标准单糖的气相色谱图得各标准单糖的保
葡萄糖、半乳糖 6 种单糖组成，其组成含量见表 2。
1 号鼠李糖、4 号阿拉伯糖、5 号木糖、6 号甘露糖、7 号葡萄糖、8 号半乳糖（见图 2）。
水浴反应 30 min，取出，冷却到室温，加入 1 mL 无水
醋酸酐，于 90 ℃水浴酰化反应 30 min，取出冷却后
真空浓缩蒸干，残渣加入 0.5 mL 氯仿溶解，即可直接
进行气相色谱分析。
2.7 气相色谱分析条件
（5）本实验测得的各单糖组成的含量与其它报
含量/％ 5.59 45.57 4.07 1.85 7.83 35.07
道测得的结果均不相同，这与多糖的品种及提取方法
3.2 讨论
差别较大有关。
（1）实验中要尽量减少样品的水分含量，以免 影响衍生化的结果，在衍生化时，适当加大无水醋酸
Байду номын сангаас
参考文献
酐的用量也可减小水分的影响。
作者简介：朱彩平（1979-），湖北鄂州人，博士，讲师，主要从事功能食品
的研究与开发工作
1.2 设备 日本 GC-9A Shimadzu 气相色谱仪，配有氢火焰
离子化检测器，OV-1701 石英毛细管柱，酒精灯， SARTORIOUS 电子分析天平，ALPHAL-2 真空冷冻干 燥机，真空干燥箱，SHZ-3 循环式真空水泵，RE52-3 旋转蒸发器，PHILIPS HR 1375/A 型打浆机，电子恒温 水浴锅，80－1 型离心机，CS101-IC 型干燥箱，BAZ-100 自动分步收集器，DHL-A 电脑恒流泵。
图中通常会出现两个峰，但糖腈乙酸酯衍生物气相色
大学出版社,1999,38-40.
谱法将糖和盐酸羟胺在吡啶中加热反应，生成糖肟，
[5] 何碧烟,戴民汉,曹莉,等.气相色谱法分析海洋沉积物中多糖
加入醋酸酐后加热继续反应生成具有挥发性的糖腈乙
的组成[J].海洋与湖沼,2003,34(3): 233-240.
真空浓缩蒸干，残渣加入 0.5 mL 氯仿溶解，即可直接 3.1.2 样品多糖中各组分的定性分析
进行气相色谱分析。
根据各色谱峰与标准单糖的保留时间对照，可知
2.6 样品单糖的衍生化
枸杞多糖水解物气相色谱图中各峰代表的单糖分别为
将上述备用的枸杞多糖水解产物中，加入 10 mg 盐酸羟胺及 1 mL 无水吡啶，充分振荡溶解，于 90 ℃
2 方法
2.1 枸杞多糖粗品的制备 称取一定量干燥的枸杞子，粉碎后加入约 3 倍体
积的 80%的乙醇，于 80 ℃水浴提取 0.5 h，过滤，重 复 3 次，合并滤渣，加入约 4 倍体积的蒸馏水，于 100℃ 水浴提取 2 h，重复 4 次，合并滤液，于 60 ℃真空浓 缩至一定体积，以体积分数 95%的乙醇沉淀，过滤， 滤渣加 5 倍体积的丙酮－石油醚混合液（体积比 1：1）， 于 50~60 ℃水浴浸提 0.5 h，过滤，得沉淀,60 ℃真空 干燥 1 h，再于 90~105 ℃干燥箱中烘干，即得灰白色 的枸杞多糖粗品。
（编号同图 1）
用程序升温，从 0 min 到 5 min 为 190 ℃，然后以 10 ℃
图 2 枸杞多糖水解物的气相色谱图
/min 的速度由 190 ℃升至 230 ℃，在 230 ℃保持 5
Fig.2 Gas chromatography of LBP hydrolysate
min；进样量 0.5 μL。
酸酯衍生物，这样在气相色谱图中即出现单一的色谱
[6] 张艳萍,张虹.气相色谱法分析奇蒿多糖的单糖组成及其含
峰[7]。
量[J].食品与发酵工业,2005,31(2): 108-110.
（4）本实验首次采用糖腈乙酸酯衍生物气相色
[7] 陶乐平,丁在富,张部昌.气相色谱在多糖结构测定中的应用
谱法进行枸杞多糖的组成分析，结果表明，该方法能
盐酸羟胺及 1 mL 无水吡啶，充分振荡溶解，于 90 ℃ 水浴反应 30 min，取出，冷却到室温，加入 1 mL 无水
单糖
鼠李 岩藻
阿拉
甘露 葡萄 半乳
核糖
木糖
糖糖
伯糖
糖糖糖
醋酸酐，于 90 ℃水浴酰化反应 30 min，取出冷却后 保留时间/min 4.998 5.595 5.873 6.108 6.620 9.032 9.477 9.822