单纯固定液
甲醛:能固定类脂和脂类,但必须冷冻切。
也可固定高尔基体、线粒。
是糖的保护剂。
体除去甲醛色素的方法:Verocay法,乙醇配氨水;Schride法。
重铬酸钾Zenker,Helly,Maximov,Regaud。
苦味酸:易燃易爆,强酸,糖类;可以软化皮肤,易于切片。
不宜用火棉胶包埋。
70%乙醇中加浓氨水去除固定产生的黄色。
三氯醋酸:SUSa液的主要成分,使蛋白沉淀,良好的脱钙剂。
升汞:针状结晶,组织收缩明显。
不能固定类脂和糖类。
可固定蛋白,固定后需用碘液脱汞
乙醇:固定兼有脱水作用,糖原的固定,纤维蛋白和弹性纤维固定。
浓度80-95%。
醋酸:固定染色体,清楚的显示细胞核,但组织膨胀明显,尤其对于胶原纤维和纤维蛋白。
铬酸避光保存。
不能固定脂肪。
固定后流水冲洗大于24h。
饿酸
延长固定时间,脆性增加,对染色不力。
1%高锰酸钾脱碘,固定后流水冲洗12-24h。
丙酮:酶组织化学。
丙酮对组织块的收缩作用强于乙醇,对糖原无固定作用。
异丙醇:是乙醇良好的替代品,组织收缩小,硬化作用较弱;不能再用于火棉胶的包埋。
叔丁醇:脱水后可不经透明,直接浸蜡。
电镜标本中常用作中间脱水剂。
环氧己烷:不引起组织收缩和硬化,常用于植物标本制作,价格贵。
四氢呋喃:既是脱水剂,又可以作为封片溶媒。
环己酮:代替乙醇作脱水剂和随后的浸蜡和包埋。
混合固定液
B-5固定液:固定淋巴组织,配方无水醋酸钠-升汞-甲醛,染色前脱汞处理;
Muller液:媒染和硬化神经组织,需常更换液体,固定作用缓慢。
Bouin液:结缔组织
比较差。
不适宜长期固定(12-24h)。
固定后组织被染成黄色需用70%-80%乙醇洗涤。
Orth:胚胎,神经,脂肪均可。
需在暗处固定24h。
Carnoy液:胞质和胞核,染色体,糖原保存,尼氏体;不能保存脂类。
Helly固定液:含有氧化剂和还原剂,临时配制,久置失效。
PFG:肽类抗原固定,用于免疫电镜研究。
PLP和PLPD(含有过碘酸钠)
Rossman:
Zenker固定液:形态学研究常用固定液。
不适宜固定含血量较多的标本,脾肾;对免疫球蛋白效果最好,对病毒包涵体固定也较好。
不能用金属容易盛放,也不能用金属镊子夹取组织块。
固定后流水冲洗12H,在70%乙醇脱水时加入碘脱汞。
PATH染色用该液固定。
嗜铬细胞染色;三色染色。
中性缓冲甲醛液:为免疫组化最常用。
24h内为宜
中性甲醛液:为最常用的固定液。
4%多聚甲醛:光镜、电镜免疫组织化学,用于电镜时,戊二醛需新配。
乙醇-甲醛:皮下组织中肥大细胞
乙醚-乙醇:用于细胞涂片固定
甲醛-钙液:脂肪组织和免疫组织化学
Mallory三色染色胶原、网状纤维蓝色,软骨、粘液、淀粉样物质淡蓝色,神经胶质纤维、肌纤维、酸性颗粒红色,髓鞘和红细胞呈橘红色。
Masson三色染色胶原纤维呈蓝(甲苯胺蓝)或绿(亮绿)色,肌纤维呈红色,红细胞橘红色。
显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法胶原纤维呈红色,网状纤维黑色,弹性纤维绿色,肌肉和红细胞呈淡黄色。
Van Gieson苦味酸酸性品红法胶原纤维呈鲜红色,肌纤维和细胞胞质、红细胞呈黄色,胞
核呈蓝褐色。
特点是易褪色和对比度差。
天狼星红(Sirius)苦味酸染色法:胶原纤维红色,细胞核绿色,其他黄色。
Gordon-sweets银氨液染色法/James染色网状纤维黑色,胞核红色(核固红复染),胶原纤维黄棕色,胞质淡红色。
Gomori银染法:网状纤维黑色,胶原纤维红色,背景黄色。
Gomori醛复红染色法甲醛生理盐水固定,深紫色;
维多利亚蓝染色:蓝色,核红色。
维多利亚蓝和丽春红S 弹性纤维蓝绿色,胶原纤维红色,背景淡黄色。
Mallory磷钨酸苏木精染色法【PTAH】胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、肌纤维均呈蓝色,胶原、网状纤维,软骨基质及骨呈黄色或玫瑰红色,粗弹性纤维有时被染成微紫色,有缺血缺氧早期病变的心肌呈紫蓝色或棕黄色。
过碘酸-schiff(PAS)染色法糖原呈红色,细胞核呈蓝色。
Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫(ABPAS)染色法中性粘液物质红色,酸性粘液物质蓝色,混合性粘液物质紫红色。
爱先蓝(PH2.5)法唾液酸及若硫酸化粘液物质及一般粘液呈蓝色,各种强硫酸化粘液物质不着色,胞核红色。
schiff阿尔辛蓝地衣红慢性胃炎肠上皮化生,酸性黏多糖,棕色。
爱先蓝(PH1.0)法含硫酸粘液物质蓝色,非硫酸化酸性粘液物质不着色,复染后核红色。
Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色素及嗜银细胞颗粒呈黑色,胶原纤维红色,背景浅
黄色。
Lillie亚铁染色法黑色素暗绿色,背景浅绿或不着色,肌纤维和背景呈黄色。
Perls blue普鲁士蓝反应显示三价铁蓝色,其他组织浅红色。
避免使用含铬固定液
三氯醋酸法胆色素呈绿色,其他呈复染的红色或者黄色。
高碘酸无色复红法用于显示脂褐素。
Lendrum等MSB法纤维蛋白呈红色,陈旧纤维蛋白呈紫色,核蓝色,红细胞黄色。
Gram甲紫染色法纤维蛋白蓝黑色,背景红色。
刚果红染色法红色,核蓝色,偏光显微镜下呈苹果绿色双折光性。
Jurgens甲紫法淀粉样物质红色或者紫红色,核蓝色。
Grocott六氨银染色法菌丝和孢子黑褐色,核红色,背景淡绿色。
高碘酸复红染色法真菌紫红色,RBC浅黄色。
同时用于染色脂褐素。
Gram碱性复红结晶紫染色法革兰阳性菌紫色,阴性菌红色,核呈红色。
Ziehl-Neelsen抗酸杆菌染色法抗酸杆菌呈红色,背景灰蓝色。
基本染料是碱性复红。
Warthin-starry胃幽门螺杆菌染色黑色或棕黑色,背景淡黄色。
Giemsa染色法8-18h,蓝色到淡紫色,胞质蓝色,红细胞橘黄色。
Ryu碳酸钠碱性复红法红色。
Macchiavello包涵体染色法麻疹和疱疹染色,红色。
Shikata地衣红染色HBSAg棕色,地衣红染色液的PH1.2-1.6。
醛复红改良染色法HBsAg 紫色,结缔组织红色,RBC和基质黄色。
维多利亚蓝染色法12-24h 蓝绿色,核红色。
焦油紫染色(石蜡)尼氏小体紫色,胶质细胞淡紫色,背景无色;硝化纤维切片法,尼氏小体淡紫色;冷冻切片法;
Einarson倍酸青蓝染色法尼氏小体黑蓝-紫色,核蓝色,背景浅灰色。
甲苯胺蓝染色法核淡蓝色,尼氏小体深蓝色,背景无色。
Homes神经纤维染色法神经纤维黑色,背景灰紫色。
Bielschowsky 神经纤维黑色,背景紫色。
Von Brasunmubl神经纤维、扣结、老年斑染色法神经纤维、扣结黑色,老年斑染黑色,背景浅灰色。
Eager退变神经纤维染色法退变神经纤维黑色,背景浅棕色。
Weigert Pal髓鞘染色法髓鞘黑蓝色,背景浅灰色。
Weil髓鞘染色法(石蜡切片)髓鞘黑蓝色,背景浅灰色。
Kuitshitsky 石蜡、冰冻均可使用,硝化纤维均可,髓鞘黑蓝色,背景浅黄色。
Luxol fast blue髓鞘蓝色,核仁紫色,尼氏小体紫色。
变色酸2R-亮色神经髓鞘深红色,轴索和间质绿色,脱髓鞘纤维不着色。
Marchi退变髓鞘染色法退变髓鞘黑色,背景浅棕色。
饿酸-α萘胺染色法变性髓鞘黑色,正常髓鞘红色,红细胞淡红色,结缔组织蓝色。
Cajal星形细胞染色法(冷冻切片法)原浆型和纤维星形细胞紫黑色。
Naoumenko和Feigin 改良的Cajal(石蜡切片法)星形细胞黑紫色,背景粉红色。
Weil和Davenport小胶质细胞和少突胶质细胞染色法黑色,背景黄棕色。
Naoumenko和Feigin小胶质细胞石蜡切片法小胶质细胞黑色,背景灰色。
无需加入还原剂
Lillie-Masson二胺银法亲银颗粒细胞呈黑色,核红色,背景淡灰黄色。
Gomori-Burtner六氨银法亲银细胞呈黑色,背景浅红色。
De grandi改良硝酸银法嗜银细胞颗粒棕黑色,胞核红色。
碱性重氮反应法显示小肠和类癌嗜银细胞颗粒嗜银细胞颗粒橘红色至红色,核蓝色,胞质黄色。
用含铬固定液固定
Giemsa改良染色法嗜铬细胞红色至紫红色,皮质细胞呈蓝色,红细胞粉红色。
Wiesel染色法嗜铬细胞呈黄绿色,核红色,其他蓝色。
甲苯胺蓝改良染色法肥大细胞颗粒红紫色,核蓝色。
异染性细胞。
醛复红法肥大细胞颗粒深紫色,RBC橘黄色,其他组织不同程度的黄色。
酸无解-无色品红法DNA紫红色,胞质及其他成分绿色。
甲基绿-派洛宁法胞质和核仁内的核糖核酸呈红紫色,核内的染色质脱氧核糖核酸呈绿色和蓝绿色。
苏丹III需冰冻切片中性脂肪橘红色,核蓝色。