标准曲线的绘制
精密称取标准品10.0毫克(实际称取的量为10.1 mg),用50%甲醇定容于10.0 mL容量瓶中。
所得的标准品溶液约为1.0mg/mL,作为标准品母液。
分别从其中吸取0.8 mL、0.7 mL、0.6 mL、0.45 mL和0.3 mL标准品溶液,再用50%甲醇定容于10.0 mL容量瓶中,即得一系列浓度梯度的标准品溶液。
最大吸收波长的确定:
用中等浓度的标准品溶液(即0.6 mL标准品母液定容于10.0 mL容量瓶中的标准品溶液),从200nm到400nm,进行扫描,得到该标准品溶液的紫外吸收图谱来确定该标准品的最大吸收波长(可得一个大概范围)。
然后在最大吸收波长范围内每隔0.2nm设定一个检测波长,进一步确定最大吸收波长的具体值。
标准品溶液吸收值的测定:
在确定标准品溶液的最大吸收波长后,在该检测波长下测定各标准品溶液的吸收值,绘制标准曲线。
每次测定两个吸收值取其平均值作为结果。
精密度实验:
同时进行精密度实验,用中等浓度的标准品溶液(即0.6 mL标准品母液定容于10.0 mL 容量瓶中的标准品溶液)连续测定6次,每次测定两个吸收值取其平均值作为结果。