紫外分光光度法测定Vc含量
1. 实验原理
维C在紫外光区(200-400nm)显示特征的吸收谱带,最大光吸收(λmax)为245nm。
因此可以用标准曲线法在245nm测样品吸光度,测得维C含量。
2. 实验试剂
(I)1%的HAc溶液
(2)100ug/ml的Vc标准贮备液:准确称取0.010g的Vc,用1%的HAc定容至100mL。
(3)Vc标准使用液:吸取贮备液5.00mL,用1%HAc稀释至250mL(现用现配)。
(4)比色皿清洗剂
3. 实验步骤
3.1 Vc的提取
称取剪碎混匀的新鲜样品0.5 ~1.0 g 加酸研磨,多次过滤至50ml容量瓶中定容。
吸取10ml待测液溶液于试管。
3.2 标准曲线的绘制
分别吸取0.00、1.00、2.00、4.00、8.00、10.00ml维生素C标准溶液于10ml 比色管中用酸定容,用水稀释成一系列浓度分别为0.0、10、20、40、80、100μg/mL 维生素C标准溶液,分别测出其吸光度。
然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。
该曲线是经过原点的一条直线,可求出该曲线的斜率。
3.3 Vc的测定
波长245nm处测定。