转化大肠杆菌（KCM法）
（1）试剂
TSS 配方：10% PEG8000；5% DMSO；20 mmol/L MgSO4或MgCl2；以上各成分溶于LB培养液中定容至100 mL，过滤除菌。

5×KCM溶液配方（配置数毫升分装成小管，-20 ℃保存，可反复冻融）：
0.5 M KCI，0.15 M CaCl2，0.25 M MgCl2
（2）大肠杆菌DH5 α感受态细胞的制备
A. 挑单菌落接于5 ml LB液体培养液过夜培养，按1%接种量接种于三角瓶中，培养菌至OD600 0.4～0.5；
B. 菌液冰浴1～2 min预冷细胞；
C. 用无菌预冷的离心管，4℃，5000 rpm离心5 min收集细胞；
D. 用20 ml冰浴的TSS重悬细胞；
E. 再次离心（5000 rpm离心5 min）沉淀细胞；
F. 用2.5ml预冷的TSS重悬细胞后分装至无菌Eppendorf管，-70℃保存。

（3）大肠杆菌转化
A. 将盛有感受态细胞的Eppendorf管置于冰上，使其缓慢融化；
B. 取一支Eppendorf管加入20 μl的5×KCM，5 μl 连接产物和75 μl ddH2O （质粒的话1-2μl，加ddH2O至80ul），混匀，放置冰上；
C. 向上述管中加入100 μl感受态细胞，混匀，冰上放置20 min；
D. 热激细胞（37℃5 min或42℃90S），加入1 ml 37℃预热的LB培养液，37℃震荡培养45min-1 h；
E. 取200 μl转化物在含有抗生素的LB培养基上涂板，剩余细胞离心沉淀后重悬，100 μl再次涂板，于37℃倒置培养过夜。