检测器
数
据
处
毛细管恒温系统
理 系
毛 细
高压电源
统
管
（+） 缓冲液/样品
(－) 缓冲液
毛细管电泳装置示意图
在柱检测器
HPCE 是经典电泳技术与现代微柱分离相结合 的一种快速、高效的液相分离技术。具有以下特点：
1. 高效率：柱子长，故理论塔板数大。 2. 高灵敏度： CE 分离后一般用激光诱导荧光检 测法（ LIF ）或安培电化学检测法（ EC ），可检测 到10-19mol/L ，甚至到单细胞检测。 2. 高速：做一个样只需几十秒到几十分钟。 3. 微量：进样 1? L即可。 4. 低成本： 5. 易于自动化：
青霉素发酵液的高效毛细管电泳图： 1. 青霉素G钠 ；2. 6-APA ；3. 对羟基苯乙酸 ；
4. 邻羟基苯乙酸 ；5. 苯乙酸
2. 中药成分分析 如：黄酮及其甙类分析
黄芩中6种黄酮类成分的胶束电动毛细管色谱分离图： 1.汉黄芩甙；2. 黄芩素；3.黄芩甙；4. 千层子素；5. 汉黄芩素；
6.内标水杨酸；7.白杨素
? 优点：
通常只给出分子离子峰（或准分子离子 峰）。
? 适用化合物：
蛋白质、多肽、寡核苷酸等生物大分子。
5、API（大气压离子化） 软电离技术
（1）ESI（电喷雾离子化） ? 特点：
能够产生多电荷离子。 ? 适用化合物：
对生物大分子及其他分子量大的 化合物的分析较有利。
毛细管 + 4kV
+ －
－ 
二次离子束
+
快原子枪
样品靶
快原子轰击质谱示意图 :
FAB的特点：
? 优点： 样品不须汽化；既给出化合物的分子 量信息，又给出结构信息。 适用范围广，仪 器商品化较早，普及率高。
? 缺点： 重现性差，灵敏度较EI 低。 ? 适用化合物：
极性、高分子量、非挥发性及热不稳定化合物。
4、MALDI（基质辅助激光解吸离子化） 软电离技术
CC DD
EE
FF
pH 梯度
高
分离模式小结：
模式 缓冲液体系
CZE 自由缓冲液
毛细管区带电泳
胶束－缓冲溶
MECC
胶束动电毛细管色谱
液
凝胶－缓冲溶
CGE
毛细管凝胶电泳
液
CIEF 两性电解质
毛细管等电聚焦
分离机理
离子淌度 疏水性/离子性
相互作用 分子大小和 荷电数目
等电点
应用：
1. 监测药物生产过程 如：监测青霉素发酵液中有关 物质的量。
（一）基本原理：
v = veo+ vep = (μeo+μep) ·E
veo:电渗流速度； μeo: 电渗流淌度 vep:电泳流速度；μep: 电泳流淌度 E：电场强度； v: 迁移速度
(－)
－+－++－+－++－+－+－+－+
+
+ +
+ +－++－++－+－+－+－++－+－+－－
(+)
电渗产生示意图：
在分子生物学和蛋白质化学上有着 十分广泛的应用。
4. 毛细管等电聚焦电泳：
（capillary isoelectric focusing, CIEF ）
根据蛋白质的等电点不同而进行分离。
AB ED
B A
C
FD
E
B AE
AC D
B
E D
B
F A
CA
C EB D
AA BB AA BB
低
CC DD
EE
FF
1. 毛细管区带电泳：
（capillary zone eletrophoresis, CZE ）
是最基本、最常用的分离模式。
适用于所有具有不同淌度的荷 电粒子的分离，但不能分离中性 物质及质荷比相同的组分。
2. 胶束电动毛细管色谱：
（micellar eletrokinetic capillary chromatography, MECC ）
? 缺点：
样品须汽化后才可离子化
? 适用化合物：
易挥发、热稳定化合物。
2、CI（化学离子化） 软电离技术
? 优点： 可以得到较强的准分子离子峰，有利 于分子量的测定。
? 缺点： 样品须汽化后才可离子化。
? 适用化合物： 易挥发、热稳定化合物 。
3、FAB（快原子轰击离子化） 软电离技术：
质量分析器 原子束
第二节：质谱法及其应用
真空系统
进样系统
离子源
质量分析器
控制和数据 处理系统
检测器
一、离子源及离子化技术
1、EI （电子轰击离子化）
阴极
试样蒸汽
电子束
离子
x
阳极
y V
z
加速电压
电子轰击质谱示意图：
? 优点：
灵敏度高，有丰富的碎片离子信息和成 熟的离子开裂理论，是结构分析、鉴定的 有力手段；重现性好，有标准图谱，可以 通过谱库检索对未知物进行结构鉴定。
药物分析中的新技术、 新方法
第一节
高效毛细管电泳 （HPCE）
毛细管电泳（ Capillary Electrophoresis,
CE ）也称高效毛细管电泳（ HPCE ）或毛细管 电分离法（ CESM ），是一种以毛细管为分离 通道，以高压直流电场为驱动力的新型液相分 离分析技术。由于CE 可以分离从离子到中性分 子；从小分子到生物大分子的一系列化合物， 尤其是以生物工程为代表的生命科学领域中的 多肽、蛋白质、 DNA的分离。因此， CE 被认 为是当代分析科学中最具活力的前沿研究领域。
－ －－－－－ +
+ +
+ + +
(－)
+
++
++
－
－－
-
-
-
-
--
--
--
(+) - -
-
+ + +
－ －－
++
－－
－
－
－
－
毛细电泳中不同组分的迁移示意图：
10
（二）主要分离模式： 1. 毛细管区带电泳（ CZE ）； 2. 胶束电动毛细管色谱 （MECC ）； 3. 毛细管凝胶电泳（ CGE ）； 4. 毛细管等电聚焦电泳 （CIEF ）；
? 适用化合物： 与ESI 比较，更适于分析极性及分子量 小（＜1000 amu ）的化合物。
用离子胶束溶液代替简单的缓冲溶 液，使中性组分可按其疏水性的不 同及在两相间的分配系数的不同而 分离。采用手性分配相，可用于手 性化合物的分离。
3. 毛细管凝胶电泳：
（capillary gel eletrophoresis, CZE ）
凝胶的网络结构对溶质具有分子筛 的作用，可分离质荷比相同但分子 大小不同的组分。
－
+－ －
+
+ －
含离子的液滴
随液滴蒸发， 电场加强，离 子向表面移动
－+ +－
－+ －
+－ －+
－
－ ＋
+ －
－
+ －+
－＋
离子从表面蒸发
离子蒸发机理：
（2）APCI （大气压化学离子化） 最软的电离方式之一
? 特点： 一般只给出化合物的分子量信息，通过 源内 CID （碰撞诱导分解）可同时获得 结构信息。