当前位置:文档之家› 仪器分析化学第十一章高效毛细管电泳分析法全套课件(新)

仪器分析化学第十一章高效毛细管电泳分析法全套课件(新)


电场力:FE = qE
阻 力:F = fν 故: qE = fν
q—离子所带的有效电荷; E —电场强度; ν—离子在电场中的迁移速度;
f —平动摩擦系数 ( 对于球形离子: f =6πηγ;γ —离子的表观液态动力 学半径;η —介质的粘度; )
2014-10-20
所以,迁移速度:
qE q E f 6π
第十一章 高效毛细管电泳 分析法
一、PHCE基本原理
basic principles of PHCE
二、电渗现象与电渗流
electroosmosis and electroosmotic flow
第二节 高效毛细管电泳理论 基础
basic theory of HPCE
mobility
五、PHCE中的参数与关系 式
2014-10-20
高效毛细管电泳的特点
1.仪器简单、易自动化
电源、毛细管、检测器、溶液瓶
2.分析速度快、分离效率高
在3.1min内分离36种无机及有机阴离子,4.1min内分 离了24种阳离子;分离柱效:105~107/m理论塔板数;
3.操作方便、消耗少
进样量极少,水介质中进行;
4.应用范围极广
2014-10-20
(动画)
二、经典电泳分析
traditional electrophoresis
利用电泳现象对某些化学或生物物质进行分离分析的方 法和技术叫电泳法或电泳技术。 按形状分类:U型管电泳、柱状电泳、板电泳; 按载体分类:滤纸电泳、琼脂电泳、聚丙烯酰胺电泳、 自由电泳; 传统电泳分析:操作烦琐,分离效率低,定量困难,无 法与其他分析相比。
(球形离子)
物质离子在电场中差速迁移是电泳分离的基础。 淌度μ :单位电场强度下的平均电泳速度。
q E 6π

2014-10-20
二、电渗现象与电渗流
electroosmosis and electroosmotic flow
1.电渗流现象
当固体与液体接触时,固体表面由于某种原因带一种电 荷,则因静电引力使其周围液体带有相反电荷,在液-固界 面形成双电层,二者之间存在电位差。 当液体两端施加电压时, 就会发生液体相对于固体表面 的移动,这种液体相对于固体 表面的移动的现象叫电渗现象。
2014-10-20
一、概述
generalization
在电解质溶液中,位于电场中的带电离子在电场力的作 用下,以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现 象,称之为电泳。由于不同离子所带电荷及性质的不同,迁 移速率不同,可实现分离。 1937年,Tiselius(瑞典)将蛋白质混合液放在两段缓冲 溶液之间,两端施以电压进行自由溶液电泳,第一次将人血 清提取的蛋白质混合液分离出白蛋白和α 、β 、γ 球蛋白; 发现样品的迁移速度和方向由其电荷和淌度决定; 第一次的自由溶液电泳;第一台电泳仪; 1948年,获诺贝尔化学奖;
有机物、无机物、生物、中性分子;生物大分子等;
分子生物学、医学、药学、化学、环境保护、材料等;
2014-10-20
内容选择
第一节
第二节
概述
高效毛细管电泳的理论基础
generalization basic theory of HPCE
第三节 高效毛细管电泳仪器
high performance capillary electrophoresis apparatus
高效毛细管电泳在技术上采取了两项重要改进: 一是采用了0.05mm内径的毛细管,;
二是采用了高达数千伏的电压。
• 毛细管的采用使产生的热量能够较快散发,大大减 小了温度效应,使电场电压可以很高。
• 电压升高,电场推动力大,又可进一步使柱径变小,
柱长增加, • 高效毛细管电泳的柱效远高于高效液相色谱,理论塔
第十一章 高效毛细管电泳 分析
High performance capillary electrophoresis,HPCE
第一节 概述
generalization
一、概述 generalization 二、经典电泳分析法 traditional electrophoresis 三、高效毛细管电泳分析 法 high performance capillary electrophoresis
板数高达几十万块/米,特殊柱子可以达到数百万。
2014-10-20
分离过程
电场作用下,毛细
管柱中出现:电泳现 象和电渗流现象。

带电粒子的迁移速度=电泳+电渗流;两种速度的矢量和。 正离子:两种效应的运动方向一致,在负极最先流出; 中性粒子无电泳现象,受电渗流影响,在阳离子后流出; 阴离子:两种效应的运动方向相反。ν 电渗流 >ν 电泳时,阴 离子在负极最后流出,在这种情况下,不但可以按类分离,除中 性粒子外,同种类离子由于受到的电场力大小不一样也同时被 相互分离。 (动画)
第四节 高效毛细管电泳的分离模式
separate types of HPCE
第五节
应用与进展
结束
application and 4-10-20
三、影响电渗流的因素 high performance capillary factors influenced electroosmosis electrophoresis,HPCE 四、淌度
parameters and relation in HPCE
六、影响分离效率的因素
factors influenced separation efficiency
2014-10-20
一、高效毛细管电泳(HPCE)基本原理
basic principles of PHCE
电泳是指带电离子在电场中的定向移动,不同离子具有 不同的迁移速度,迁移速度与哪些因素有关? 当带电离子以速度ν 在电场中移动时,受到大小相等、 方向相反的电场推动力和平动摩擦阻力的作用。
1981年,Jorgenson和Luckas,用75m内径石英毛细管进 行电泳分析,柱效高达40万/m,促进电泳技术发生了根本变 革,迅速发展成为可与GC、HPLC相媲美的崭新的分离分析技 术——高效毛细管电泳。
2014-10-20
三、高效毛细管电泳分析
high performance capillary electrophoresis
相关主题