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。在文献 ［&， ’］ 提出的化学衍生化方法
的基础上， 本文 建 立 了 柱 前 衍 生 化 !"#$ 法 以 测 定 复方制剂4; 实验部分
! ! !" 仪器与试剂 ! ! 紫外分光光度仪 （ &’%%() ， 美 国 ()*+,-. 公 司） ； /! 值测 定 仪 （ /!%,)0)1 2%"* ， 日 本 !3145- 公 司） 。盐酸 乙 胺 丁 醇 对 照 品、 乙胺吡嗪利福异烟片 （ 批 号 "))"**)* ， "))"**)" ， "))"**)# ） 、 利 福 平、 异 烟肼和吡嗪酰胺原料药及相关辅料均由沈阳红旗制 药有限公司 提 供； 苯乙基异氰酸酯 （ 美 国 647,- 公 司） ； 甲醇、 乙腈、 三乙 胺 均 为 色 谱 纯， 购自天津市康 科德科技有限公司。 ! ! #" "#$% 条件 ! ! #$%*) 高效液相色谱系统 （ 日 本 684,-9:; ） ； 色 谱柱为 &4-,3.<4= $ *’ 柱 （ ")) ,, + , > % ,, 4- 9- ， ( 北京迪马仪器有限公司 ） ； 流 动 相 为 甲 醇%水%冰 !,， ， 流 速 *- ) ,# ? ,4. ； 检 醋酸 （ 体积 比 为 &) . #) . )- " ） 测温度为室温。 ! ! 盐酸乙胺丁醇 无 紫 外 吸 收， 与苯乙基异氰酸酯 衍生化后生成的衍生物 在 "*( ., 波 长 处 有 最 大 吸 选 收， 在 "(& ., 处有 吸收。 为了提 高 检测 灵 敏 度， 用检测波长为 "*( ., 。 ! ! $" 分析方法的建立 ! ! $ ! !" 方法的专属性 ! ! 进行盐酸乙胺丁醇的空白衍生化试验即按处方 比例混合利福平、 异 烟 肼、 吡 嗪 酰 胺 及 辅 料， 考察在 盐酸乙胺丁醇衍生物出峰处是否有杂峰存在。 ! ! $ ! #" 柱前衍生化条件的优化 ! ! 以苯乙基异氰 酸 酯 为 化 学 衍 生 剂， 在室温下与 盐酸乙胺丁醇反应迅速， 衍生化产物稳定， 但遇水可 终止反应。本研究对反应溶剂、 反应时间、 盐酸乙胺 丁醇与衍生剂的物质的量比及衍生物稳定性等进行 考察， 优化了柱前衍生化反应条件。 ! ! $ ! $" 标准曲线的制备 ! ! 精密称取盐酸乙胺丁醇对照 品 约 *)) ,7 ， 置于 *)) ,# 量瓶中， 加入 # @（ 体积分数 ） 三 乙胺 乙 腈 溶 液溶解并稀释至 刻 度， 作 为 贮 备 液 "。 精 密 量 取 贮 备液 "*) ,# 置于 *)) ,# 量 瓶 中， 加 乙 腈 至 刻 度， 作为 贮 备 液 # 。 精 密 量 取 贮 备 液 # )- * ， )- " ， )- # ， )- , ， )- % ， )- ’ ， *- ) ,# ， 分别加入适量的乙腈使体积 达到 * ,# ， 再加入 " 7 ? # 苯乙基 异氰 酸 酯乙 腈 溶 液
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柱前衍生化高效液相色谱法测定固定剂量复方抗结核 制剂中盐酸乙胺丁醇的含量和溶出度
孙 + 进& ， + 宋洪涛 ! ， + 张天虹 & ， + 王 + 卓$ ， + 何仲贵 &
， 其中最常用的 为 利 福 平、 异 烟 肼、 吡嗪酰胺
收稿日期： !"") +"$ +!* 第一作者： 孙 + 进， 男， 博士， 副教授 ) 通讯联系人： 何仲贵， 男， 教授， 博士生导师， ,-( . /"0 ： （ "!% ） !$,*#$!" ， 1+2"3( ： %-4%563 - 2"3() 78) (9) $9)
（ & ) 沈阳药科大学药学院生物药剂学研究室，辽宁 沈阳 &&""&# ；! ) 南京军区福州总医院药剂室， 福建 福州 $)""!) ；$ ) 沈阳红旗制药有限公司，辽宁 沈阳 &&""!% ） 摘要： 建立了快速、 灵敏和准确的柱前衍生化高效液相 色 谱 测 定 固 定 剂 量 复 方 抗 结 核 制 剂 中 盐 酸 乙 胺 丁 醇 的 含 量 和溶出度的方法。在无水环境下， 盐酸乙胺丁醇与苯乙基异氰酸酯发生柱前衍生 化 反 应 的 最 佳 反 应 的 物 质 的 量 比 检测波长为 !&) 92 。该法成功地用于由 % 种药物组成的复方抗结核制剂中盐酸乙 胺 丁 醇 的 含 量 和 溶 出 度 为 &. # ， 的测定。 关键词： 柱前衍生化； 高效液相色谱法； 盐酸乙胺丁醇； 固定剂量复方制剂 中图分类号： :#)*+ + 文献标识码： ; + + 文章编号： &""" +*(&$ （ !""# ） "! +"&#% +"%+ + 栏目类别： 研究论文
!"#"$%&’(#&)’ )* +)’#"’#, (’- !&,,)./#&)’ )* 0#1(%2/#). 34-$)51.)$&-" &’ 6&7"- !)," +)%2&’(#&)’, *)$ 8’#&9 :/2"$5/.),&, !$/;, 24 3&;1 <"$*)$%(’5" =&>/&+1$)%(#);$(?14 @&#1 <$"9+)./%’ !"$&A(#&B(#&)’
82,#$(5# ：; #-D-#7-E+F%"7- %35% F-#G’#2"9$- (3H63E $%#’2"A’5#"F%3$ 2-A%’E（ IJ+@JKL ）M3A% F#-+$’(629 E-#3D"A34"A3’9 "9E 6(A#"D3’(-A（ =& ） E-A-$A3’9 M"7 -7A"N(37%-E A’ E-A-#239- -A%"2+ N6A’( %8E#’$%(’#3E- 39 G30-E E’7- $’2N39"A3’97（ /OL7 ） G’# "9A3+A6N-#$6(’737 E#657) ,%- E-#3+ D"A34"A3’9 M"7 $"##3-E ’6A 39 " 9’9+"H6-’67 -9D3#’92-9A ，M%-#- -A%"2N6A’( %8E#’$%(’#3E- M"7 E-#3D"A34-E M3A% F%-98(-A%8(37’$8"9"A- "A "9 ’FA32"( 2’("# #"A3’ ’G &. # ) ,%- -0A#"$A3’9 #-$’D-#8 M"7 ,*/ ( P M3A% A%- 2-"9 #-("A3D- 7A"9E"#E E-D3"A3’9 ’G "/ (" P ) ,%- "$$6#"$8 "9E F#-$373’9 ’G A%- 2-A%’E M-#- "(( H6"(3G3-E) ,%- (39-"# #-5#-773’9 ’G A%- 7A"9E"#E $"(3N#"A3’9 $6#D- M"7 E-A-#+ 239-E "9E A%- (39-"#3A8 M"7 5’’E（ & 0 " ) ,,, $ ） ) ,%- 2-A%’E 37 7-973A3D- ，7F-$3G3$ ，#"F3E ，"9E $"9 N- 76$$-77G6((8 "FF(3-E A’ A%- H6"9A3A"A3’9 "9E E377’(6A3’9 ’G -A%"2N6A’( %8E#’$%(’#3E- 39 /OL7) C"4 @)$-, ： F#-+$’(629 E-#3D"A34"A3’9 ； %35% F-#G’#2"9$- (3H63E $%#’2"A’5#"F%8 （ @JKL ） ； -A%"2N6A’( %8E#’$%(’#3E- ；G30-E E’7- $’2N39"A3’97（ /OL7 ） + + 近年来， 许多地区结核病的发病率又逐年增加。 由于结核杆菌产生的耐药性， 特别是多重耐药性， 使 结核病的治疗成为一项更加重要和具有挑战性的课 题。由于抗结核病 药 单 用 易 产 生 耐 药 性， 所以世界 抗结核病 和 肺 病 联 合 会 主 张 用 固 定 剂 量 复 合 制 剂 （ /OL7 ） 代替单种药 物 给 药 作 为 治 疗 结 核 病 的 基 本 方法