摘要: 目的 研究银杏酸的荧光特征, 探讨光、热对银杏酸稳 定性的影响。方 法 通 过荧光扫描 研究溶剂、pH 值 对银杏 酸
荧光特性的影响, 建立检测银杏酸的荧光分光光度法。结果 银杏酸 在 pH 4. 0甲醇 溶液中 荧光强 度较强, 激发 波长 279 nm, 发射波长 404 nm 时, 银杏酸在 0. 221~ 20. 31 Lg /m l浓 度范围 内与荧 光强度 呈现良 好的线 性关 系, 相 关系 数为 R = 0. 997 5; 检测限 0. 023 5 Lg /m l。结论 银杏 酸溶 液对光 不稳 定, 随光 照时 间延 长浓 度降 低; 银杏 酸溶 液在 5e 时 稳定, 25e 时稳定性有所下降, 并随温度升高或加热时间延长降解率增大。该方法可用于测定光照、加热对银杏酸的影响。
K ey w ord s: G inkgo lic acids; F luorescence spectropho tom etry; Sun ligh t stab ility; H ea t stab ility
银杏酸 ( G inkgo lic acids, GA ) 属于 6- 烷 基或者 6- 烯基水 分析天 平 (北京赛多利斯仪器系统 有限公司 )。银杏酸 标准品 由
江苏大学高级人才启动基金 ( N o. 05 JDG 024 ) ; 江苏镇江市社会发展基金 ( N o. SH 2006071 ) 作者简介: 杨小明 ( 1963-) , 女 (汉族 ) , 江 苏镇江人, 现 任江苏大 学化学化 工学院副教授, 博士学位, 主要从事天然产物活性成分研究工作.
1: 甲醇; 2: 乙醇; 3: 乙腈; 4: 甲醇 /水 ( 7 /3 ) 图 1 银杏酸在不同溶剂中的激发光谱 (A ) 和发射光谱 ( B)
高; 紫外分光光度法简便但灵 敏度较 低; 而荧光 分光光度 法在操 m in- 1。银 杏酸标准品在不同溶剂中的激发光谱和发射光谱分 别
作简便的同时具有较 高的灵敏度。田 亚平 [ 6] 以 白果酸为 标准品 见图 1。
采用荧光分光光度法测 定银杏 外种皮 中银杏 酸的含 量。笔者采
在 丙酮溶液中银杏酸荧 光特性消 失; 在 DM F 溶液中 银杏 酸
L ISH IZH EN M ED IC INE A ND M ATER IA M ED ICA RESEA RCH 2009 VOL . 20 N O. 10
时珍国医国药 2009年第 20卷第 10期
ห้องสมุดไป่ตู้
银杏酸的荧光特征和光热稳定性研究
杨小明, 何 军, 柳艳君, 刘 方
( 江苏大学化学化工学院, 江苏 镇江 212013)
杨酸的衍生物, 其苯 环 6位 碳链 长度 13- 17, 双键 数 0 - 2, 为 5 本实验 室自制, 经 HPLC测 定纯 度 > 98% (与 H. Jaggy 博 士赠 送
种同系物所组成的混合物, 存在于银杏的叶、果和外种皮中, 以外 的分析 纯度 99% 以上的银 杏酸 对照品 比较 )。银 杏酸标 准品 用
2. 3 高效液相 - 荧光法分析干扰物的影响 色谱条件: 大连 E lite S ino Chrom ODS- AP 色谱柱 ( 250 mm @ 4. 6 mm, 5 Lm ); 荧光检 测器, 激 发 波长 279 nm, 发 射 波 长 404 nm; 流动 相: 甲 醇 - 3% HA C水溶液 ( 92B 8, V /V ); 流速 1. 0 m l/m in, 柱温 40e 。银杏酸 标准品的高效液相 - 荧 光色 谱图见 图 2。由 图 2可 见银 杏酸标 准品的高效液相荧光 图上未见荧光杂质, 故可直接采用荧光分光 光度计直接进行测定 。
用从银杏外种皮中分 离的银杏酸为标准品研究其荧光特征时, 发 发生荧 光淬灭; 在正丁醇溶液中银杏酸的发射强度很微弱。在 其
现与田亚平报道有所 差异, 因此对银杏酸的荧光特征进行详细研 它 4种溶液中, 银杏酸都出现位于 229 nm 和 279 nm 处的两个 荧
究, 建立了荧光法测定银杏酸 的方法, 研 究了银 杏酸在不 同温度 光激发峰, 和位于 404 nm 和 552 nm 附近的两个荧光发射峰 。比
溶剂, 配制 100 L g /m l银杏酸 标准液, 分别在不同 pH 条件下测定 阴天将 比色皿保存于 冰箱 ) ; 一份表 面皿 用 铝箔 遮盖, 并 放置 在
其荧光强度。在 pH 值 2~ 8 之间 , 使用 磷酸 盐缓 冲体 系; 在 pH 阴暗处 对比。每 间隔 24 h定时取样, 测定银 杏酸的含量, 求出 分
T he effects on fluorescence charac teristics of g inkgo lic ac ids w ith different so lvent, d ifferent pH m edia w ere stud ied by fluo rescence scan. A fluorescence spectropho tom etry for dete rm ina tion o f g inkgo lic ac ids w as estab lished. Resu lts It w as found that in
HPLC- M S联用 法 [ 4]、紫外分光光度 法 [ 5] 和荧 光分光 光度法 [6] 。 成 100 L g /m l进行荧光扫描; 实验温度为 ( 25 ? 0. 5) e , 激发和 发
HPLC法测定精密度高, 但对仪器要求 高, 分 析操作 复杂, 成本较 射狭缝 为 5 nm, 激 发 和发 射单 色 器的 扫描 速 度均 为 500 nm #
表 1 采用荧光光度法与高效液相色谱法测定银杏酸结果的比较
样品
荧光光度法 C /m g# m l- 1
高效液相色谱法 C /mg# m l- 1
相对误差 (% )
1
13. 55
2
13. 55
3
13. 62
4
13. 62
14. 36 14. 41 14. 19 14. 13
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LISH IZHEN M ED IC IN E AND MA TER IA M ED ICA R ESEARCH 2009 VO L. 20 N O. 10
2. 2 pH 条件对银 杏酸荧 光强 度的影 响 以甲 醇 - 水 ( 7B 3)为 皿中, 封口后将石英比色皿放置在 阳光下照射 (每天 8 h, 夜间 或
YANG X iao- m ing* , HE Jun, L IU Y an- jun , L IU F ang (S chool of Chem istry and Chem ical Engineering , Zhenjiang 212013, China) Abs tract: O bjective T o study the fluorescence character istics and the heat and sunlight stab ility o f g inkgolic ac id. M ethod s
着 pH 值的增 加, 银杏酸的荧光强度略有上升, 当 pH > 4时 , 荧光 个平行 。
性超过仪器检测最高值, 这 与文献 [ 6] 报 道一致。 因此选 择在 pH
银杏酸置于 5, 25, 40, 70e 恒温水浴锅中分别 恒温 1, 2, 3, 4,
4. 0条件下进行荧光测定。
5, 6 d后, 银杏酸的浓度变化见图 3~ 4。
值 9. 00~ 10. 00 之 间, 使 用碳 酸 盐 缓 冲体 系, 荧光 测 定 条 件同 解率。光照实验 在距离地面 15 m 的楼顶 平台进行 , 光 照时候 保
/ 2. 10项。
持 石英 比 色 试 管与 太 阳 光 线成 30。 角, 测 定 光 强 为 35 000 ~
测定了不同 pH 条件下银杏酸的相对 荧光强度, 结果 发现随 65 000 Lx, 黑暗对 照以铝 箔包裹 同样条 件下光 照, 每 处理设 置 3
义。而到目前为止, 国内外尚未见相关报道。
2. 1 溶剂对 银杏 酸 荧 光强 度 的影 响 取 银 杏酸 标 准 品分 别 以
目前已报道 的 银杏 酸 分析 方 法主 要 有 H PLC - UV 法 [ 3] 和 DM F、甲醇、丙酮、乙醇、正丁醇、甲醇 - 水 ( 7B 3), 乙腈 为溶剂 配
the pH 4. 0 m ethano l the fluorescence s igna l of g inkgo lic acids w as strong. W hen the exc itation and em ission w ave leng th G inkgo lic ac id we re a t 279 and 404 nm respectively, the linear range w as 0. 221~ 20. 31 L g /m ,l correlative coeffic ient was 0. 997 5, and the detection lim it was 0. 0235 L g /m .l Conc lu sion G inkgo lic ac ids is unstable to sun linght. G inkgo lic ac ids is stab le when be ing expo sed to 5e cond ition, bu t its stability depressed when be ing exposed over 25e conditions. The m ethod can be used to ana ly ze the heat stab ility and sun light stab ility o f g inlgo lic acids.