兽医科技2011年1月(上)收稿日期:2009-11-02;修回日期:2010-11-26作者简介:尹卫卫(1981-),女,助教,硕士,y i n w e i w e i 2006@yahoo .通信作者:孙继国(1956-),男,教授,硕士.五种抗球虫药物防治艾美耳球虫的试验尹卫卫1,王飒爽1,武嘉平1,齐雪茹1,孙继国2(1.廊坊职业技术学院动物科学系,河北廊坊065000;2.河北农业大学动物科技学院,河北保定071000)中图分类号:S859.79+5文献标识码:B文章编号:1004-7034(2011)01-0103-02 为了有效预防球虫病,我国的兽医学者研制出了球虫疫苗和各种新型药物,但由于球虫本身抗原的复杂性,球虫的混合感染以及疫苗的稳定性尚待确定等问题,疫苗预防尚未能普及;常用抗球虫药的长期使用导致球虫对多数抗球虫药产生耐药性,球虫耐药性的产生导致防治失败或效果不佳,引起临床或亚临床鸡球虫病。
新型抗球虫药物的研制成为养鸡业防治球虫的主要手段。
为此,试验以河北省廊坊地区分离到的柔嫩艾美耳球虫株为研究对象,对常用抗球虫药和新研制出的球虫药的药效进行评价,以期了解这些药物在廊坊地区的使用价值,指导生产合理用药。
1 材料与方法1.1 试验动物1日龄817肉杂鸡210只,购自廊坊职业技术学院养殖基地,饲养于经严格消毒过的大棚内,网上养殖,鸡自由采食和饮水,饮水中加入环丙沙星(2.5g /L)预防大肠杆菌病和鸡白痢。
饲养至9日龄,取粪便镜检鸡球虫,结果为阴性。
1.2 感染用卵囊从河北省廊坊市某鸡场采集因球虫病死亡的鸡盲肠内容物,采用饱和盐水漂浮法收集球虫卵囊,置于含25g /L 重铬酸钾溶液的平皿中,于28e 温箱通气培养至孢子化[1],经鉴定为柔嫩艾美耳球虫。
在实验室经鸡体传3代,增殖到足够数量后进行试验。
1.3 试验药物百球杀Ò代(有效成分为磺胺氯吡嗪钠等,批号为20021113)、球痢速治(批号为20038976)、海南霉素(有效成分为海南霉素等,批号为20015647)、球虫宝(有效成分为常山、柴胡、青蒿等,批号为20040051)、海南地克珠利(有效成分为地克珠利等,批号为20030302),市购。
1.4 试验设计将试验用鸡于9日龄早晨逐只空腹称重,淘汰弱雏及体重过大者,然后根据初重相同随机分成7组:白对照组(不感染不给药)、红对照组(感染不给药)、百球杀Ò代组、球痢速治组、海南霉素组、球虫宝组、海南地克珠利组[2],每组30只,从10日龄开始饲喂3d 抗球虫药物,13日龄不饲喂药物,14日龄接种法氏囊疫苗,15日龄除白对照组(不感染不给药)外其他各组鸡用钝头注射器经口接种2.0@105个孢子化柔嫩艾美耳球虫卵囊。
试验采用饮水给药,于攻虫后第3天开始给药。
1.5 测定指标1.5.1 临床表现 接种球虫卵囊后每天观察每组鸡只的精神状况、采食和饮水量、死亡情况、粪便色泽和性状,并作好记录。
对病死鸡进行剖检,确定死因。
1.5.2 增重情况 试验鸡于感染后第1天和第10天逐只空腹称重,并计算各组的增重,由此算出平均增重和相对增重率。
相对增重率(%)=用药组或感染不给药组的平均增重/不感染不给药组的平均增重@100%。
1.5.3 盲肠卵囊计数 于感染后第10天每组扑杀10只,将各组盲肠内容物充分混匀,称重,用麦氏虫卵计数法记录每克盲肠内容物卵囊数(OPG ),计算各组鸡盲肠所含卵囊数,再根据表1换算成卵囊值[3]。
表1 卵囊数与卵囊值的转换卵囊数(@106)0~0.10.2~1.01.1~1.92.0~5.96.0~10.9\11卵囊值1102030401.5.4 免疫器官指数 于感染后第6天随机抽取组内体重相近的5只鸡剖杀,摘取脾脏和法氏囊,称重,计算免疫器官指数。
法氏囊指数(B /W )=法氏囊重(m g)/体重(g)@100;脾脏指数(S /W )=脾脏脏重(mg )/体重(g )@100。
1.5.5 病变记分及病变值 按Johnson 等的标准作盲肠病变记分。
感染后第10天,每组扑杀10只鸡,剖检,观察盲肠病变。
按5级记分制进行病变记分:0分,不见病变;1分,盲肠黏膜有少量出血点;2分,肠壁增厚,黏膜有多量出血点;3分,盲肠肿胀,内容物含多量血液或形成硬固肠芯;4分,盲肠极度肿胀,外观呈紫红色,内容物含血凝块,或死于球虫病者。
1035黑龙江畜牧兽医6科技版兽医科技根据公式:病变值=各组鸡的平均病变记分@10换算成病变值。
1.5.6抗球虫指数(AC I)选用美国M erck公司推荐的AC I作为判定药物效力的指标:AC I= (存活率+相对增重率)@100-(病变值+卵囊值)。
AC I>180,判定为高效抗球虫药;160<AC I[180,判定为中效抗球虫药;AC I为120[AC I[160,判定为低效抗球虫药;AC I<120,判定为无效抗球虫药。
1.6数据统计试验结果采用SPSS13.0软件和Exce l进行方差分析和显著性检验。
2结果和分析2.1临床表现试验期间,白对照组鸡的精神、食欲、粪便均正常。
红对照组从感染后第4天开始排血便,持续6d,其中以第2天最严重,死亡2只;感染7d后多数鸡食欲恢复,精神逐渐好转,粪便趋于正常。
百球杀Ò代组、球痢速治组于感染后前3d有血便,后3d不见血便;其他用药各组鸡6d均有鸡只排出血便;其中以海南地克珠利组和红对照组鸡只最为严重,海南地克珠利组在试验期死亡9只。
2.2增重情况红对照组的增重率与其他各组差异极显著(P< 0.01),各用药组间差异不显著(P>0.05),说明各组药物均以抗球虫为主,增重情况不明显。
2.3盲肠病变记分将每组鸡剖杀进行盲肠病变记分,其中盲肠病变最严重的是海南地克珠利组,病变记分为20.0;其次是球虫宝组,盲肠记分为16.7;海南霉素组、球痢速治组和百球杀Ò代组的盲肠病变记分分别为13.3, 6.9,6.7。
2.4免疫器官指数的变化(见表2)表2免疫器官指数项目红对照组白对照组球虫宝组球痢速治组海南霉素组海南地克珠利组百球杀Ò代组脾脏指数0.3104a A?0.84000.2822AB ab?0.60000.2045bAB?0.71000.1968bB?0.50000.1798bB?0.27000.1566AB b?0.76000.1556bB?0.6900法氏囊指数0.1762a?0.83000.0976a?0.55000.2625a?0.57000.1458a?1.20000.2054a?0.14000.124a?0.65000.1354a?0.4600注:同行数据肩标含有相同字母表示差异不显著(P>0.05);小写字母完全不同表示差异显著(P<0.05);大写字母完全不同表示差异极显著(P<0.01)。
由表2可知:红对照组的脾脏指数与白对照组相比差异不显著(P>0.05);红对照组的脾脏指数与百球杀Ò代组、球痢速治组和海南霉素组差异极显著(P<0.01),与球虫宝组和海南地克珠利组差异显著(P<0.05);用药组及白对照组之间的脾脏指数差异不显著(P>0.05)。
红对照组的法氏囊指数与其他各组之间差异不显著(P>0.05);用药组及白对照组之间的法氏囊指数差异不显著(P>0.05)。
2.5抗球虫药效综合判断结果(见表3)表3各试验组抗球虫效果的综合判断结果项目百球杀Ò代组球痢速治组海南霉素组球虫宝组海南地克珠利组红对照组白对照组AC I191.5a A184.6bdA174.9bd165.2bd142.9c94.2eB200注:同行数据肩标含有相同小写字母表示差异不显著(P> 0.05),完全不同表示差异显著(P<0.05);大写字母不同表示差异极显著(P<0.01)。
结果表明:百球杀Ò代的抗球虫指数AC I= 191.5,为高效抗球虫药;球痢速治、海南霉素、球虫宝AC I分别为184.6,174.9,165.2,均为中效抗球虫药;海南地克珠利的AC I为142.9,为低效抗球虫药。
3讨论(1)目前,使用的抗球虫药物种类繁多,这些药物被分为两类:聚醚类和化学合成药物。
由于聚醚类药物使用时间早,使球虫对大量此类药物产生了耐药性。
而各类化学合成药物也因使用时间较长(比如磺胺类某些药物应用已有数十年)也有耐药性,甚至存在交叉耐药性的现象。
磺胺氯吡嗪钠是一种新型磺胺类抗球虫药物,它的抗球虫活性峰期是球虫第2代裂殖体,对第1代裂殖体也有一定作用,是一种强效抗球虫药物。
百球杀Ò代的主要成分为磺胺氯吡嗪钠,它的抗球虫指数为191.5,为高效抗球虫药。
(2)地克珠利是一种新型抗球虫药,该药针对球虫的无性生殖和有性生殖过程都有很强的抑制作用,但也有耐药性出现的报道,且各地区耐药性不同。
在本试验中,地克珠利的AC I为142.9,是低效抗球虫药,说明廊坊地区球虫已对它产生了耐药性。
(3)某些抗球虫药物还可促进鸡的增重率,这是因为现在大多数药物都是中西药合剂,其中许多中药成分有增重的效果,如果在抗球虫的同时还可以增加机体抵抗力,则会减少鸡的病死率,降低经济损失,这是目前抗球虫药物的研究方向之一。
参考文献:[1]林青,于三科,陈秀荔,等.鸡柔嫩艾美耳球虫单卵囊分离技术的构建及致病性研究[J].西北农林科技大学学报:自然科学版,2002,30(3):35-37.[2]聂奎,何大文.畜禽抗球虫药物[J].四川畜牧兽医学院学报,1999,13(3):51-55.[3]角田清.鸡球虫病[M].陈谊,明如镜,译.上海:上海科学技术文献出版社,1996.(009)104H eil ong ji ang A n i m al Scienceand V eter i nary M ed i c i ne l12011。