果蝇的生活周期
• 果蝇属完全变态的昆虫，一个完整生活周 期可分为卵、幼虫、蛹和成虫4个明显的时 期。
果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。 一般来说，30℃以上温度能使果蝇不育或死 亡，低温能使生活周期延长，生活力下降， 饲养果蝇的最适温度为20～25℃。 • 生活周期长短与饲养温度的关系
• 在25℃下，成蝇一般在交配一两天后即开始 产卵。卵长约0.5mm，白色椭圆形，前端背 面有一对触丝使卵能附着在食物或瓶壁上。 受精卵在24小时内就可以孵化成幼虫，幼虫 经两次蜕皮成为三龄幼虫。三龄期幼虫生活 四天左右开始化蛹。化蛹前三龄幼虫停止摄 食，爬到相对干燥的表面上（如培养瓶壁）， 逐渐形成一个菱形的蛹。从蛹壳中羽化出来 的果蝇8～12小时即可交配，交配后精子可 在雌蝇的受精囊中贮存一段时间，然后逐渐 释放到输卵管中。
果蝇是遗传学实验中最常用的动物
• 选用符合上述条件的实验材料，往往可以 将问题化难为简，做到事半功倍。所以在 遗传学研究中，我们通常选择果蝇 （Drosophila）、玉米（Zea）等而不选择 大象、加利福尼亚的巨杉。这个策略实际 上包含了一个逻辑假设：不同的生物中存 在着相同的生命运动规律。正如我们所看 到的，这个假设对大部分生物来说是成立 的。孟德尔在豌豆中发现的定律，在果蝇 中同样可以见到。
果蝇的性别的鉴别
• （1）大小 雌体通常比雄体大些。 • （2）形态 雄体腹部钝圆，而雌体腹部稍尖，向后突出； 雄体腹部相对窄小呈柱状，而雌体腹部较宽厚呈卵圆形。 • （3）条纹 雌体腹部背面有宽窄相近的5条黑色条纹，而 雄体腹部的背面只有三条，上部两条窄，最后一条宽而延 伸至腹部腹面，呈一明显黑斑。 • （4）性梳（sex comb）果蝇胸足的跗节共有5个亚节。 在雄蝇第一对雄足跗节的第一亚节基部有一个黑色鬃毛结 构，形似一个小梳，称为性梳。放大100倍左右可以清晰 地看到这一结构。雌蝇不具这一结构。性梳的有无是鉴别 雌雄蝇的可靠标志之一。
果蝇的培养
• 培养瓶的灭菌 : • 果蝇的培养基要装在经过灭菌处理的培养 瓶中。灭菌可防止真菌污染，也可以杀死 培养瓶中可能的幼虫或蛹，防止混杂。 • 灭菌的方法是：将带塞的培养瓶在160℃恒 温箱中干热灭菌1小时，或在高压灭菌锅中， 在1kg/cm2大气压、121℃条件下灭菌 15~20min。
突变性状的观察
• 已知的果蝇突变性状有400余种，这些突变性一 般明显而稳定。 野生型（wild type）果蝇，表型为： 黑檀体（ebony body,ee） 残翅（vestigial wing,vgvg。 突变体表型为： 小翅（vestigial wing,mm） 白眼（white eye,ww） 焦刚毛（singed bristle,sn3sn3）。 因小翅、白眼、焦刚毛三个突变性状均为隐性，简 称这种突变体为三隐性（smw)。
培养基的配制
果蝇培养基成分 : 水 1L 玉米粉 82g 蔗糖 62g 琼脂 5g 丙酸 5mL 酵母粉 少许
• 量取1L水，将大约一半倒入一干净的锅中， 加入琼脂加热溶解；水开后，加入蔗糖， 搅拌均匀，将玉米粉加入剩余的水中，搅 拌均匀，再沿着锅边慢慢倒入，边倒边搅 拌（这样玉米粉不易结块）。继续煮10多 分钟，锅中的培养基成为一种糊状物时即 可离火。加入丙酸（用以防腐）及酵母粉， 搅拌均匀即可分装。每瓶培养基厚约2cm， 室温下干燥2~3天，待培养基完全凝固，表 面坚硬时再行接种，培养基太软会粘住果 蝇致其死亡。
果蝇作为实验材料有许多优点：
• 1. 饲养容易。在常温下，以玉米粉等作饲料就可 以生长，繁殖。 • 2. 生长迅速。十二天左右就可完成一个世代，每 个受精的雌蝇可产卵400～500个，因此在短时间 400 500 内就可获得大量的子代，便于遗传学分析。 • 3. 染色体数少。只有4对（2n=8） 。 • 4. 唾腺染色体制作容易。横纹清晰，是细胞学观 察的好材料。 • 5. 突变性状多，而且多数是形态突变，便于观察。
果蝇交配
• 将雌雄果蝇放在一起培养，雌蝇的生殖器 中有贮精囊，可保留交配所得的大量精子， 雌蝇一次交配所得的精子，足够它多次排 出的卵受精，因此在做杂交试验时，雌蝇 必须选用处女蝇（没有交配过的雌蝇）。 雌蝇孵出后12小时内不会交配，这个时间 内把果蝇全部倒出，分出雌雄蝇，单独饲 养，这时收集的雌蝇是处女蝇。
• 操作步骤：
1．把载破片置于双筒镜下，选择黑色背景。载玻片上滴加生理 盐水一滴，取三龄幼虫放在其中，操作者左手拿镊子夹住幼虫 后端1/3处，固定幼虫。右手拿一枚解剖针，按住幼虫头部的 黑色斑点（口器）稍后方，用力向两侧拉，把身体拉开，唾腺 随之而出。唾腺是一对透明的棒状腺体，像一对长茄子，上面 附有白色的脂肪条。 2.在载玻片上除去幼虫其他组织部分，还要把唾腺周围的白色脂 肪尽量剥离干净，再把唾腺周围的杂物用吸水纸清理干净。在 唾液腺滴上1mol/L HCL解离2-3min,以松软组织利于细胞破裂， 染色体散开。 3. 解离后的唾液腺用蒸馏水洗3-4次，水洗的方法是把蒸馏水滴 在唾腺上，再用吸水纸条吸走，反复几次。 4.水洗后的唾腺周围要用吸水纸条清理干净，然后在唾腺上滴上 一滴石碳酸品红，染色5min后盖上盖片，用吸水纸吸去盖片 周围溢出的染液，之后在材料部位用力压实。
果蝇麻醉及观察的方法
• 选择亲蝇进行杂交或观察果蝇的性状时。都要先将果蝇麻 醉。使之处于不活动状态。麻醉果蝇的操作步骤如下： • 1、准备好培养瓶、麻醉剂及乙醚。轻拍瓶壁，让果蝇震 落到培养基上。如瓶塞上附着果蝇，则稍稍晃动瓶塞，并 将它们拍落到培养基上。 • 2、拔去麻醉瓶与培养瓶塞，迅速将培养瓶口倒扣在麻醉 瓶口上。轻拍培养瓶让果蝇落入麻醉瓶中。当麻醉瓶中果 蝇的数量足够时，将两瓶迅速分开各自盖好。 • 3、把麻醉瓶中的果蝇拍落瓶底，拔出瓶塞，在塞子上滴 几滴乙醚，重新塞入麻醉瓶。麻醉约半分钟后果蝇便不再 活动，纷纷落入瓶底，麻醉即告完成，此时果蝇的翅膀是 收紧的。长时间麻醉可使果蝇死亡，麻醉而死的果蝇翅膀 外展，与身体垂直。 • 4、将麻醉的果蝇倾倒在一张干净的白纸板上， 用小毛笔 或解剖针轻轻地拨动观察 。如果在观察过程中果蝇苏醒 过来，可用一培养皿罩住果蝇，再在一滤纸条上滴一滴乙 醚伸入培养皿中，形成一个临时麻醉小室再行麻醉。
果蝇
• 属于昆虫纲（Insecta） 双翅目（Diptera） 果蝇科（Drosophilidae） 果蝇属（Drosophila）。
果蝇（fruit ）
• 果蝇属（Drosophila），希腊文中 droso 是 露水的意思，phila 是喜欢的意思，人们一 听便知，果蝇是喜欢潮湿环境的。一般到 山林里采集果蝇时，可在水边较湿润的地 方找到它，而它所吃的食物，也都是些腐 败的蔬菜水果，很显然地，它是一种健康 的全素食昆虫。
理想的遗传学实验材料应具备以下 几个特征：
• •所选物种最好是二倍体，染色体基数甚少。 • •具有较多可观察、测定的变异性状，相对性状之间差异 明显。 • •交配可以控制，可以按实验目的自由选择亲本进行杂交。 这对我们系统研究一种生物的遗传规律是很有利的。 • •世代周期短。这样我们获得实验结果的周期也短。 • •一次交配产生的子代个体多。突变性状产生的频率通常 较低，子代群体大则增加了获得这些突变体的机会。从一 个大群体中获得的结果也更准确、可靠。 • •易于管理。所选的生物应易于饲养、培养或种植，且管 理费用不高。
果蝇单因子杂交
果蝇唾腺染色体的观察
• 双翅目昆虫(摇蚊、果蝇等)幼虫期的唾腺细胞 很大，其中的染色体称为唾腺染色体。这种染色 体比普通染色体大得多，宽约5um，长约400um， 相当于普通染色体的100—150倍，因而又称为巨 大染色体 。唾腺染色体处于体细胞染色体联会配 对状态。并且唾腺染色体经过多次复制而并不分 开，每条染色体大约有1000—4000根染色体丝的 拷贝，所以又称多线染色体。多线染色体经染色 后，出现深浅不同、密疏各别的横纹，这些横纹 的数目和位置往往是恒定的，代表着果蝇等昆虫 的种的特征；如染色体有缺失、重复、倒位．易 位等，很容易在唾腺染色体上识别出来。