饱和硝酸钠漂浮法测土壤中蛔虫卵
一、原理
先用碱性溶液与土壤样品充分混合以分离蛔虫卵和土壤颗粒，再加入比重较大的溶液使得比重较轻的蛔虫卵飘浮在液体表面，收集后镜检计数。

二、方法
1.土壤样品处理：剔除菜叶、树皮等大杂物，压碎土壤中的大颗
粒；然后用孔径3mm的铜筛过筛，收集过筛后的土壤。

2.分离虫卵：取50mL大离心管，放入过筛后的土壤10g，加5%
氢氧化钠溶液至40或45mＬ刻度线。

用橡皮塞塞紧管口，在
振荡器上振荡15分钟，可反复3~4次，待充分混合后，以
2000rpm离心4min。

3.漂浮：弃去上部的氢氧化钠，加入饱和硝酸钠溶液充分搅拌，
2000rpm离心4min，再加饱和硝酸钠溶液满至管口，覆上18m m
×18mm盖玻片。

4.计数：静置15min后，将盖玻片迅速翻转取下，置于载玻片上
镜检，同时再覆上第二块盖玻片，如此反复，共计数3~4张盖
玻片。

三、注意事项
1.漂浮液的比重：漂浮液的比重是影响蛔虫卵检出率的重要因
素，用比重大的溶液做为漂浮液效果较为理想，与饱和硫酸锌、硫酸镁、氯化钠等盐溶液相比，饱和硝酸钠的比重最高，用作
漂浮液，蛔虫卵的检出率最高。

2.土壤性质：土壤性质决定了蛔虫卵和土壤颗粒的粘合程度，蛔
虫卵检出率沙土最高，壤土次之，粘土最低。

3.离心的时间与次数：延长离心时间、提高离心速度或增加离心
次数均可以提高蛔虫卵与土壤颗粒的分离效果从而提高检出率。

美蓝、伊红、硼砂染色法
一、原理
美蓝、伊红、硼砂（简称Ｍ.Ｅ.Ｂ）溶于水呈碱性。

活虫卵可以还原碱性染料，降低着色力，不易被染色。

死虫卵不能还原碱性染料，容易着色。

蛔虫卵外层膜蛋白容易被染色，染色前需脱去膜蛋白。

二、配制
将0.2g美蓝加入100mL蒸馏水中煮沸10min，加入硼砂0.5g，再煮沸10min，冷却后加入伊红0.1g，待完全溶解后过滤备用，ＰＨ值为10~11，在室温中可放置1.5年。

三、步骤
1.脱膜蛋白：将收集的蛔虫卵加入30%次氯酸钠，作用数分
钟，并经常振荡，再用蒸馏水洗2次，即可脱掉蛋白膜。

2.染色镜检：吸取虫卵沉淀物一滴置于载玻片上，加Ｍ.Ｅ.Ｂ
染色液一滴，上覆盖玻片，静置3~5min后镜检。

或者，吸
取虫卵沉淀物一滴放入小试管内，加入染色液染30min再
用蒸馏水洗2~3次，吸取沉淀物镜检。

3.注意：Ｍ.Ｅ.Ｂ的ＰＨ值应在10左右，不宜太高：脱蛋白
膜后，应洗净次氯酸钠，否则影响碱性染料的着色效果。

4.鉴别死活：活卵内含物不着色，死虫卵内含物染成蓝色。

培养法
在直径10~12cm的玻璃平皿底部平铺一层厚约0.5cm的脱脂棉；脱脂棉上铺一张与平皿等大的普通滤纸；在滤纸上，再放一张直径2cm的小滤纸，将虫卵滴在小滤纸上。

加入２%福尔马林，以湿透滤纸和脱脂棉。

放入28~30℃温箱中培养一个月观察虫卵死活，培养一个月后自皿中取出小滤纸片，将虫卵置于载玻片上，滴加50%甘油溶液，使其透明后，根据其形态，鉴定卵的死活。

凡含有幼虫的，都认为是活卵；其它阶段的或单细胞的，都判为是死卵。