Ｌｕｏ Ｄａｎ，Ｙｉｎ
Ｔｅ，Ｚｈａｎｇ
Ｊｉａｎｇｇｕｏ
ｏｆ ｏｆ
ｃｆｉｎｗｄ Ｍｅｄｗｉｎｅ，Ｃｏｌｌｅｇｅ
ｏｆ Ｍｅｄｗｉｎｅ，Ｓｈｉｈｅｚｉ Ｕｎｉｖｅｒｓ鲫，Ｓｈｉｈｅｚｉ ８３２０００，Ｃｈｉｎａ（Ｌｕｏ Ｄ＿）；
Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ
Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ
Ｑｕａｒａｍｉｎｅ
ＸＰ，Ｔｉａｎ
１２．６５％（３２／２５３）ａｔ
Ａｌａｔａｗ ｐｏｒｔ．Ｂｙ
ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ
ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎ ＡＬＳＫｌ７４，ＡＬＳＫｌ９１，ＡＬＳＫ０１９ ｔｈｒｅｅ
ｇｒｏｕｐｓ．Ａｎａｂｒｓｉｓ
Ａｆｒｉｃａ），ｉｔ
ｗａｓ ＷａＳ
ｏｆ Ｂｌａｓｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ＡＬＳＫｌ７４ ｈａｄ
ｈａｄ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｈｏｍｏｌｏｇｙ ｗｉｔｈ Ｂａｂｅｓｉａ ｃａｂｄｌｉ（ＥＵ８８８９０４，Ｓｏｕｔｈ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｈｏｍｏｌｏｇｙ ｗｉｔｈ Ｂａｂｅｓｉａ
Ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ，ｗｅ ｈａｖｅ ｆｉｒｓｔ ｒｅｐｏｒｔｅｄ
ｔｈａｔ ｔｈｅ Ｂａｂｅｓｉｎ ｉｓ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｉｃｋｓ ａｔ Ａｌａｔａｗ ｐｏｒｔ，ｔｈｅ Ｃｈｉｎａ－Ｋａｚａｋｈｓｔａｎ ｂｏｒｄｅｒ．
【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】
ｒｅａｃｔｉｏｎ
Ｂａｂｅｓｉａ；Ｈｙａｌｏｍｍａ ａｓｉａｔｉｃｕｍ ａｓｉａｔｉｃｕｍ；Ｈａｅｍｔｒｐｈｙｓａｌｉｓ ｅｒｉｎａｃｅｉ；Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ
藏巴贝斯虫（ＫＪ０００４８４，土耳其）、隐藏巴贝斯虫
蜱ＤＮＡ提取：按照ＤＮＡ提取试剂盒（德国
Ｑｉａｇｅｎ公司）说明书提取蜱ＤＮＡ，１只蜱虫提取１ 份ＤＮＡ，置于一２０℃保存，备用。
１．３
（ＨＱ３３１４７９，突尼斯）、隐藏巴贝斯虫（ＫＴ３５６５９９，中
国．血红扇头蜱）聚为一支；ＡＬＳＫ０１９与未定型的巴 贝斯虫ＳＡＰ＃１３１（ＡＢ２５１６１２，日本）聚为一支，与奥 氏巴贝斯虫（ＫＣ４６０３２１，加拿大）、奥氏巴贝斯虫 （ＡＹ６６１５１０，美国，麝牛）和狍巴贝斯虫（ＫＦ７７３７３５， 意大利，马鹿）形成姐妹支。见图１。 ３讨论
分析阳性率。率的比较采用ｘ２检验。
２结果 ２．１样本采集结果：共采集２５３只蜱，其中游离蜱 １９２只，寄生蜱（虎鼬）６１只。全部蜱隶属１科３属４ 种，分别为血红扇头蜱（２．７７％，７／２５３）、亚洲璃眼蜱 （７１．５４％，１８１／２５３）、边缘革蜱（１．５８％，４／２５３）、短垫 血蜱（２４．１１％，６１／２５３）。 ２．２巴贝斯虫核酸检测结果：在２５３只蜱中，有３２ 份样本出现４３８ ｂｐ的特异性条带。阳性率为１２．６５％ （３２／２５３）。其中，亚洲璃眼蜱阳性率为１６．５７％（３０／ １８１），短垫血蜱阳性率为３．２８％（２／６１），血红扇头 蜱、边缘革蜱中均未检出特异性条带。蜱种间巴贝 斯虫核酸阳性率比较，差异有统计学意义（ｘ２。２０．７４，
Ｓｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎ，Ａ ｌａｔａｗ Ｅｎｔｒｙ－Ｅｘｉｔ
Ｑｕａｒａｎｔｉｎｅ
Ａ
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Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｈｉｈｅｚｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｉｈｅｚｉ
ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）扩增巴贝斯虫１８ｓ
ｒＲＮＡ基因，ＢＬＡＳＴ分析测序产物，利用Ｍｅｇａ ６．０构建分子遗传进化树。
结果阿拉山１３口岸蜱中巴贝斯虫核酸检测阳性率为１２．６５％（３２／２５３）。经测序，３２条巴贝斯虫序列分为 ＡＬＳＫｌ７４、ＡＫＳＫｌ９１、ＡＬＳＫ０１９三组。Ｂｌａｓｔ分析显示：ＡＬＳＫｌ７４与驽巴贝斯虫（ＥＵ８８８９０４，南非）同源性最高，为 ９９．７２％（３５６／３５７）；ＡＬＳＫｌ９１与隐藏巴贝斯虫（ＫＦ７４５６２６，土耳其）同源性最高，为９９．７２％（３５０／３５１）；ＡＬＳＫ０１９ 与奥氏巴贝斯虫（ＫＣ４６０３２１。加拿大）具有９５．７６％（３３９／３５４）同源性。结论首次在中哈边境地区蜱中检测到 巴贝斯虫核酸。
需要更换宿主，而硬蜱传播梨形虫可通过期间传
播。因此，亚洲璃眼蜱可能是新的新疆驽巴贝斯虫
巴贝斯虫测序分析：将上述３２份阳性样本进
重要的潜在传播媒介。隐藏巴贝斯虫基因型在我国
并未记载，该基因型由亚洲璃眼蜱随交通工具、货 物、人员往来等方式自“亚欧大陆桥”传人我国的风 险增大。在虎鼬寄生蜱短垫血蜱中检测未定型的巴 贝斯虫基因型，与在日本浣熊体内检测到的未定型
圈１
Ｕ贝矧ｆ虫１８ｓ ｌＲＮＡ丛凼彖玩进比分机 Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１３，３４（１２）：１７３—１７８
石河子大学动物科技学院动物医学系（王安东）
通信作者：尹小平，Ｅｍａｉｌ：ｙｘｐｃｉｑ＠１６３．ｃｏｍ
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５＿４２５５．２０１６．０９．００３
【摘要】
目的对中国和哈萨克斯坦（中哈）边境阿拉山口口岸地区蜱虫进行巴贝斯虫核酸检测。方法
采用白布旗法和动物体表法在阿拉山口口岸艾比湖湿地采集蜱虫样本。应用聚合酶链式反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ
生堡丝直痘堂盘查２Ｑ！鱼生２旦垫旦筮３』鲞筮窆塑￡ｈ也』量旦ｄ！迥丛，Ｓ业！！！虫笪垫，２Ｑ！§：ｙ尘：３§，盟Ｑ：２
・６３３・
・论著・
中国和哈萨克斯坦边境阿拉山口口岸蜱中 首次检测到巴贝斯虫核酸
罗丹
尹小平
王安东
田延河ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
梁臻
巴特
张江国
８３２０００石河子，新疆石河子大学医学院临床医学系（罗丹）；８３３４１８阿拉山１２。新疆阿拉山口出 入境检验检疫局卫生检疫监管科（尹小平、田延河、粱臻、巴特、张江国）；８３２０００石河子，新疆
【关键词】
巴贝斯虫；
亚洲璃眼蜱；
短垫血蜱；
聚合酶链式反应
基金项目：国家质检总局科技基金项目（２０１６ＩＩ（２６４）
Ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｂａｂｅｓｉａ ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｆｒｏｍ ｔｉｃｋ ａｔ Ａｌａｔａｗ Ｐａｓｓ，Ｃｈｉｎａ－Ｋａｚａｋｈｓｔａｎ ｂｏｒｄｅｒ Ｘｉａｏｐｉｎｇ，Ｗａｎｇ Ａ ｎｄｏｎｇ，Ｔｉｎｎ Ｙａｎｈｅ，Ｌｉａｎｇ ＺｈｅＲ，Ｂａ Ｄ ｅｐａｒｔｍｅｎｔ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ Ａｌｏｔａｗ
ｇｅｎｅ
ｔＩＩｅ Ｃｈｉｎａ—Ｋａｚａｋｈｓｔａｎ ｔｉｃｋｓ ａｔ Ｅｂｉｎｕｒ Ｌａｋｅ
ｂｏｒｄｅｒ．Ｍｅｔｈｏｄｓ
ｗｅｄａｎｄ，Ａｌａｔａｗ ｐｏｒｔ．１ ８ｓ ｒＲＮＡ
ｏｆ Ｂａｂｅｓｉａ ｗａｓ ｔｅｓｔｅｄ ｂｙ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ
（ＰＣＲ），ｔｈｅ
Ｒｅｓｕｌｔｓ
ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ Ｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｂｌａｓｔ ａｎｄ ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ
ａｎａｌｙｓｉｓ Ｗａｓ
ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｍｅｇａ ６．０． ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ，３２
Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ Ｂａｂｅｓｉａ ｇｅｎｅ
ｉｎ ｔｉｃｋｓ Ｗａｓ
行测序，得到３２条巴贝斯虫序列，序列可分为３ 组，分别为ＡＬＳＫｌ７４、ＡＬＳＫｌ９１、ＡＬＳＫ０１９。Ｂｌａｓｔ分
析显示：ＡＬＳＫｌ７４与驽巴贝斯虫（ＥＵ８８８９０４．南非）
同源性最高，为９９．７２％（３５６／３５７）；ＡＬＳＫｌ９１与隐
万方数据
主生型抠堕彗堕整釜垫丛ｉ生旦旦垫旦筮箜鲞箜２塑￡ｈ鱼』星！ｄ！堡丛：Ｓ！Ｐ！！塑！丛垫：２Ｑ！！：ｙ生：堑，盟！旦
１．２
９４．６５％（３３６／３５５）。分子遗传进化树显示：ＡＬＳＫｌ７４
与驽巴贝斯虫（ＥＵ８８８９０４，南非）、驽巴贝斯虫
（Ｚ１５１０４，南非，马血）、驽巴贝斯虫（ＥＵ６４２５１３，南 非）、驽巴贝斯虫（ＡＢ７３４３９０，蒙古）聚为一支； ＡＬＳＫｌ９１与隐藏巴贝斯虫（ＫＰ７４５６２６，土耳其）、隐
ｏＣ ４８０
８。 ８，
１．４序列分析与系统树构建：选取阳性样本送至北 京鼎国生物科技有限公司进行测序．将测序结果登 录ＧｅｎＢａｎｋ进行ＢＬＡＳＴ分析比对。利用Ｍｅｇａ 斯虫的１８ｓ ｒＲＮＡ基因特征。 １．５数据分析：采用Ｅｘｃｅｌ ２０１５和ＳＰＳＳ ２２．０软件
６．０
自１９５７年Ｓｋｒａｒａｌｏ从南斯拉夫报道第ｌ例人
９９．７２％（３５６／３５７）；ＡＩＳＫｌ９１
ｏｃｃｕｌｔａｎ峪（ＫＦ７４５６２６，Ｔｕｒｋｅｙ），ｉｔ
９９．７２％（３５０／３５ １）；ＡＬＳＫ０１９
ｈａｄ ９５．７６％
（３３９／３５４）ｈｏｍｏｌｏｇｙ
ｗｉｔｈ Ｂａｂｅｓｉａ
ｏｄｏｃｏｉｌｅｉ（ＫＣ４６０３２１，Ｃａｎａｄａ）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
巴贝斯虫核酸检测：参照刘晓明等［３ ２的报道，
扩增巴贝斯虫１８ｓ ｒＲＮＡ基因序列。ＰＣＲ引物为
Ｐｉｒｏ－Ａ：ＡＡＴＡＣＣＣＡＡＴＣＣＴＧＡＣＡＣＡＧＧＧ，Ｐｉｒｏ－Ｂ：ＴＦＡ
ＡＡＴＡＣＧＡＡＴＧＣＣＣＣＣＡＡＣ，产物长度为４３８ ｂｐ。预 变性９４℃３００ Ｓ；变性９４℃３０ Ｓ，退火６０℃４０ 延伸７２℃４０ Ｓ，３５个循环；总延伸７２
Ｆｕｎｄ ｐｒｏｇｒａｍ：Ｇｅｎｅｒａｌ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ
Ｑｕａｌｉｔｙ
Ｓｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ
ａｎｄ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ
Ｐｒｏｊｅｃｔ
（２０１６ＩＫ２６４）
巴贝斯虫病是指由巴贝斯虫引起的一种血液 寄生虫病。主要通过硬蜱在人与动物间传播，侵袭
牛和马（驴、骡）的红细胞，也可感染人‘¨。作者于 ２０１５年对中国与哈萨克斯坦（中哈）边境阿拉山口