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角膜厚度的共焦显微镜测量分析
徐永根 潘飞 姚玉峰
【摘要】 目的 研究共焦显微镜测量角膜厚度的准确性和稳定性。 方法 非随机性对照临床试验, 用裂隙扫 描共焦显微镜和A 超测厚仪分别测量 20 人的 27 个正常角膜中央厚度。结果 中央角膜厚度测量平均值 (±SD ) 裂 隙扫描共焦显微镜为 (529. 6±33. 9) Λm , A 超测厚仪为 (536. 7±38. 2) Λm , 两者差别有显著意义 ( P < 0. 001, 配对 资料 t 检验) , 两方法差值所在范围 (±SD ) 是 (7. 0±7. 1) Λm ; 各眼测量值间标准差的平均值共焦显微镜为 17. 8Λm , A 超测厚仪为 1. 7Λm , 共焦显微镜的变异度较A 超测厚仪大。结论 裂隙扫描共焦显微镜可以测量角膜厚度, 但其 测量值与A 超测厚仪所测值有差别, 且测量变异度较 A 超测厚仪大, 稳定性相对差。
21 两测量方法间的关系: 正常角膜中央厚度共
焦显微镜和 A 超测厚仪检查结果 (图 2) , 各角膜两
图 1 共焦显微镜的 Z 扫描图, 右边整竖为各连续扫描 仪器测厚平均值: 共焦显微镜为 (529. 6±33. 9) Λm ,
图像 (X 轴) 中央部反光强度 (0～ 255) , 左边竖尺为各扫描图 而 A 超测厚仪为 (536. 7±38. 2) Λm , 两者间有显著
共焦显微镜在逐层扫描提供角膜各亚层冠状位 许合作, 可重复较好, 是目前临床和科研中测量角膜
图像同时, 也能在纵向上记录角膜厚度。共焦显微镜 厚度的最主要测厚方法[8, 9]。本研究用裂隙扫描共焦
角膜厚度的测量是通过贯穿性聚焦扫描 ( th rough2 显微镜和 A 超测厚仪分别测量正常中央角膜厚度
卧位, 两眼向正上方看, 将手持式超声探头垂直轻压 仪、光学相干断层成像、O rb scan 角膜地形图及共焦
中央角膜处, 以对准未散瞳孔中央为准; 直接在显示 显微镜等[7212]。 不少文献提到上述仪器测量方法间
器上读出厚度值并予记录[7, 8]; 各眼检查 3 次, 求平 的比较, 但这些比较都无法回答活体角膜的真实值
【Key words】 Co rnea ; T h ickness; Confoca l m icro scop e; U ltra sound p achym eter
共焦显微镜是一种新型的光学显微镜, 凭其独 离的测量就可获得角膜整个或各层的厚度[225]。
特的共焦特性, 与普通光学显微镜相比, 在清晰度和
镜头表面眼凝胶与中央部角膜前表面接触, 注意镜
头与角膜表面不应直接接触, 中间为眼凝胶; 在计算
机辅助下, 镜头缓慢往返移动, 角膜各层扫描信号即
可通过照相机并由电脑显示器快速显示出图像, 并
予以保存; 在 Z 曲线上测量角膜厚度, 并予记录[124]。
31A 超角膜测厚的方法与步骤: 用 0. 4% 倍诺
图 2 正常角膜中央厚度的共焦显微镜和A 超测厚仪测量值
喜 液 滴 待 检 眼 局 麻, 将 超 声 测 厚 仪 ( 美 国 SONOM ED 公司生产的 4000A P 型) 设置在测厚状
讨 论
态, 所有测量超声速度均为 1636 米 秒; 被检者取仰
目前角膜厚度有多种测量仪器, 如 A 超测厚
值越大该方法测量值变异度越大, 测量稳定性越 差[6 ]。
结 果
11 被检查者: 在 2003 年 6 月至 2003 年 12 月
间, 在浙江大学医学院附属邵逸夫医院共有 20 例
(27 只眼) 角膜被纳入检查。 被检查者男性 8 例, 女
性 12 例, 年龄 45～ 79 岁, 平均 (61. 8±10. 8) 岁。
差异 ( P < 0. 001, 配对资料 t 检验) , 两方法间测量 差值范围是 (±SD ) 为 (7. 0±7. 1) Λm。
各眼多次测量值间的变异度, 即用 27 只眼角膜 每个角膜内各测量值间标准差的平均值表示, 它能 反映测量方法的稳定性, 共焦显微镜为 17. 8Λm , A 超测厚仪为 1. 7Λm , 共焦显微镜要明显大于 A 超测 厚仪的测量值。
均值。
大小, 而对尸体眼角膜的直接测量, 由于细胞不同程
41 统计学处理: 用 SPSS 10. 0 软件统计测量数 度的肿胀或皱缩, 使测量值离真实值相距更远[7]。
据, 包括配对资料 t 检验, P < 0. 05 被认为有统计
尽管 A 超测厚仪也有不足, 其不能对角膜各亚
学意义; 求各眼三测量值间的变异, 算出两测量方法 层分别进行测厚, 也不能同时提供角膜各层放大图
focu s scan) 完成的, 即在计算机的控制下, 共焦显微 (cen tra l co rnea l th ickness, CCT ) , 对测量值进行比
镜物镜聚焦平面在纵向上快速移动, 贯穿整个角膜, 较, 以研究共焦显微镜的准确性和稳定性。
形成一系列二维图像, 根据每幅图像中央部反射光 强度和图像深度, 经专门软件形成 Z 曲线, 而因角
【Abstract】 O bjective To determ ine the accu racy and rep roducib ility of cen tra l co rnea l th ickness (CCT ) m ea su rem en t w ith slit scann ing confoca l m icro scop e. M ethods In a p ro sp ective com p a ra tive clin ica l tria l, 27 no r2 m a l cen tra l co rnea s of 20 sub jects w ere adm itted fo r m ea su rem en t of th ickness w ith Confo scan 2. 0 slit scann ing confoca l m icro scop e (SSCM ) and Sonom ed u ltra sound p achym eter (PA CH ). Result Cen tra l co rnea l th ickness (± SD ) of 27 co rnea s in 20 sub jects m ea su red by SSCM (529. 6±33. 9) Λm and by PA CH (536. 7±38. 2) Λm d iffered ( P < 0. 001, p a ired Studen t’s t 2test ) , and the d ifference betw een bo th m ethod s w a s over the range of CCT (m ean d ifference , 7. 0±7. 1) Λm . T he m ean in trap a tien t SD of SSCM w a s 17. 8Λm show ed m uch g rea ter than 1. 7um of PA CH , w h ich ind ica ted tha t SSCM had poo rer rep roducib ility com p a red w ith PA CH. Conclusion T he SSCM is a poo rer p recise techn ique fo r m ea su ring cen tra l co rnea l th ickness than u ltra sound p achym eter.
(≤21mm H g)。 每个被检查者测量前须经裂隙灯检 查, 并获得知情同意。
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Confo scan 2. 0) 检查托架上; 用 0. 4% 倍诺喜液 (日
本参天制药株式会社生产) 滴被检眼局麻; 开睑器开
睑; 在已消毒水浸式圆锥状物镜 (裂隙孔径 0. 75, 放
大 40 倍, 工作距离 1. 92mm ) 头表面涂一滴维地息
眼凝胶 (美国博士伦公司生产) ; 将镜头轻缓前移, 使
材料与方法
膜各层密度不同, 反光强度不同, 使角膜各层位置一
11 被检查者的纳入条件: 健康志愿者, 即无眼
一对应在曲线各点上 (图 1) , 对曲线上特定两点距 病、屈光手术、佩戴接触镜、局部用眼药史,绍兴市人民医院眼科 (徐永根) ; 浙江 大学医学院附属邵逸夫医院眼科 (潘飞、姚玉峰)
像的相对深度, Z 曲线最高峰代表内皮细胞 (endo thelium ) , 较低峰分别为最前基质层 (an t strom a) 和表浅上皮 (ep i) , 表 浅上皮峰和内皮细胞峰之间的距离即为角膜厚度。
21 共焦显微镜检查方法与步骤: 告知被检者角 膜共焦显微镜的检查过程及相关注意事项, 患者同 意并表示配合检查。被检者坐于检查台前, 下颌及前 额固定在裂隙扫描共焦显微镜 ( slit scann ing confo2 ca l m icro scop e, SSCM , 日 本 N ID EK 公 司 生 产 的
角膜厚度是角膜功能的重要指标, 它能反映角
分辨率方面都有明显的提高, 尤其在现代计算机技 膜内皮功能, 洞悉屈光手术愈合过程, 也能揭示局部