液相色谱仪原理及使用操作规程原理液相色谱法就是同一时刻进入色谱柱中的各组分，由于在流动相和固定相之间溶解、吸附、渗透或离子交换等作用的不同，随流动相在色谱柱中运行时，在两相间进行反复多次（103～106次）地分配过程，使得原来分配系数具有微小差别的各组分，产生了保留能力明显差异的效果，进而各组分在色谱柱中的移动速度就不同，经过一定长度的色谱柱后，彼此分离开来，最后按顺序流出色谱柱而进入信号检测器，在记录仪上或色谱数据机上显示出各组分的色谱行为和谱峰数值。
测定各组分在色谱图上的保留时间（或保留距离），可直接进行组分的定性；测量各峰的峰面积，即可作为定量测定的参数，采用工作曲线法（即外标法）测定相应组分的含量。
液相色谱仪工作原理图高效液相色谱仪是实现液相色谱分离分析过程的装置，如上图所示。
贮液器中存贮的载液（用作流动相的液体常需除气）经过过滤后由高压泵输送到色谱柱入口（当采用梯度洗脱时，一般需用双泵系统来完成输送）。
样品由进样器注入载液系统，而后送到色谱柱进行分离。
分离后的组分由检测器检测，输出信号供给记录仪或数据处理装置。
如果需收集馏分作进一步分析，则在色谱柱出口将样品馏分收集起来，对于非破坏型检测器，可直接收集通过检测器后的流出液。
其中输液泵，色谱柱及检测器是仪器的关键部件。
仪器使用操作步骤1、打开主机（Waters1525泵）；待泵稳定后（大约需要2~5秒钟，即有两次“嘀”的响声）打开紫外检测器；检测器预热需要6~10min钟的时间，在此时间内你可以执行第2步操作。
2、打开电脑（电脑必须进入英文界面）待检测器稳定后，方可打开Breeze应用程序，应用程序有个自检过程（需要1～2分钟）。
3、建立新方法（打开Breeze程序时，系统默认为上次使用的方法和文件名。
如果需要建立新的文件名和方法，你可以继续下一步操作）：（1）点击“Manage Breeze”按钮→“Make a new project”→“Next”→在“project Name”框内输入新的文件名，也可以在“comment”内输入需要说明的一些注释，也可以不填→“Finish”；（2）建好新的文件夹后，还要转换到该文件夹中，即在“Manage Breeze”界面下点击“change project/user”按钮→在project内选择刚建立的或是需要的文件名→“OK”；（3）此时已经在刚建立的新文件夹下，那么，现在应该再建立一个新的方法，操作步骤是：①、点击“View Method”→选择“LC或GPC”→点OK→点击“pump”在“Isocratic<等度> Flow A/B”内输入A/B流动相的比值（例如：A：B=70：30 且流速为1ml/min，那么，就在A下输入0.7，在B下输入0.3；再如A：B=70：30 且流速为0.8mL/min，那么，就在A下输入0.56，在B下输入0.24；依此类推）；②、点击“UV Det（紫外检测器）”→选择“Channel1”→在“wavelength/nm”框内输入检测波长；（4）保存新方法，点击菜单栏中的“File”选择“save As...”→在“Name”框内输入刚建立的新方法的名称，如“LC method1”，然后点击“save”按钮，即可保存刚刚设立的各项色谱条件。
4、用新建的方法平衡系统：单击左下角的“Equilibrate”→在“method for Equilibrate”内选择新建立的方法（如：LC method 1）→点击“Equilibrate”即开始基线平衡（基线平衡大约需要20min）。
5、待基线平衡后即可进行单次进样：（1）点击单次进样按钮→在“Sample Name”内输入样品名称，或备注（可不填）→注意：在“method”内一定要选定需要的方法（如“LC method 1”）→“vial”内选1，表示这是第1次进样（用于自动进样器）→在“run time”内输入所要运行的时间→单击“inject（进样）”按钮；（2）待进样图示出现后，方可进样（若发现进样时的方法选错了，可以点击图示右下方的“abort inject”来取消这次进样操作，然后重新点击进样按钮，确保进样时method选择的是你所需要的方法）；（3）在进样过程中，要注意的是：a、取样要力保一致；b、在将进样环从“Load”位移到“inject”位时间要停留1.2秒以上，因为在1ml/min的流速下，样品完全脱离定量环所需要的时间0.02min（1.2秒）；c、要保证运行时间的一致性，每次进样后将“Load”位移到“inject”位时间要停留的时间必须一致；6、每次进样后，都要对运行的结果进行数据处理：（1）点击“View Data”→点击“Precessing Parametery Wigard”或点击采集栏右下角的“send data to review”；（2）选择“start new processing porameters”如果是进行同一个样品且在此之前有过数据处理可以选择第二项，点OK；（3）在“start”内输入要处理峰值的开始时间，在“end”内输入结束时间，然后单击下一步；（4）确保“clear peak width and threshold”不被选中，然后多次点击“下一步”直到对话框结束。
7、若要更换洗脱剂，必需要对泵、检测器进行冲洗（点击冲洗灌注按钮按照提示一步一步操作）：（1）将需要更换的洗脱剂，先超声20min后换上；（2）用注射器，抽出两泵内原有洗脱剂大约各10mL，然后打开参考阀进行冲洗灌注；（3）冲洗灌注后，关紧参考阀；（4）用新的方法平衡系统（大约需要20min）。
8、梯度洗脱程序的设置：在第3步（3）项①步骤中点击“pump”栏内选择“Gradent（梯度）”后，将出现一个表格，在“时间”栏内输入要开始梯度洗脱的时间和结束时间，在“A、B“内输入开始洗脱时的“A、B”流动相的比例和结束时的比例。
在最后一栏内输入所需要的洗脱程序的变化曲线。
9、样品组方法的建立及运行：在建立样品组方法前必须先建立好所需要的洗脱程序并命名：（1）点击命令栏内的“sample queue”，将出现样品组工作窗口；（2）点击样品组工作窗口左上角的“wizard”按钮，出现“select location of standards”页面，在此页面中，可选择“No standards”或其他，“start loading vials in tray position”可选择1，然后单击“下一步”；（3）是手动进样，必须确保“Each stardard vial contains a different level standard”被选中（默认选项），然后单击“下一步”；（4）在Number of standard vials in each group 中输入1（默认值）；在Number of injections per vial 内输入一个数（自动进样器用）；在Run time 内输入每一个样品所需要运行的时间；在injection volume 内输入需要进样的的量如10ul；在method 内选择需要的洗脱方法，然后点击“下一步”；（5）可输入所用分析柱的型号和规格，如“KF-C18 7um”也可不填，点击“下一步”；（6）可以什么都不管，各项均采用默认值，点击“下一步”；（7）选择运行模式：如果只运行而不需要报告可以选择“run only”；如果既想运行且需要打印出过程可以选择“run and process”；如果既想运行且需要打印出结果可以选择“run and report”。
（注：“run and report”只是将图打印出来，并不给出峰值。
）（8）单击“Next”后出现“summary”界面，点击此界面中的“options”按钮，在出现的对话框中需要在“Function”栏中选择“Equilibrate”，在“method”中选择需要的方法，在“Run time”内输入平衡系统的时间（一般为20min）；（注：此步可以不做，但在运行样品组前，必需先平衡系统。
）（9）点击“完成”，并保存样品组方法；（10）运行样品组方法[注：如果没有做第（8）步必需先平衡基线，待基线平衡后才可以进行此步操作]:点击采集栏中的“run current sample set method”（在单次进样按钮的下方）按钮，在“Name for this sample set”内输入样品组方法名（默认为刚建立的样品组方法），在run mode内选择运行模式，然后点击“Run”，待出现进样图示后，按第5步（2）、（3）项操作。
参照〈Waters Breeze 入门指南，P53〉。
（附：打开您建立的样品组方法，点击样品组工作栏上方的“Open sample set method”按钮，选择您需要的方法，点击“Open”。
）10、分析结束后，必须充分冲洗色谱柱：先用原A、B两相洗脱液的比例，再逐步增大甲醇比例，直到甲醇占冲洗液的100％，例如：原洗脱液A:B=甲醇:水=50:50,则分别用A:B=：50:50、60:40、70:30、80:20、90:10、100:0，每个梯度均要冲洗至基线稳定（一般要20min左右）方可改换下一个梯度，直到完全冲洗净为止。
再关泵、检测器和主机。
特别注意：1、任何物质测定完后，都不得不冲洗泵而直接关机！2、溶剂多为挥发性有机溶剂，易燃，故室内严禁吸烟！WFX—110A型火焰原子吸收分光光度计操作步骤1.确保气路、电路连接正确，主机与电脑信号连接好。
2.打开电脑，打开主机开关，运行其专用程序（WFXSTOP 图标）。
3.待主机各机构自检完成后，自动进入条件设置页面；4. 设置各项仪器条件：文件→创建→主页面，选择测定元素→波长、光谱带宽（狭缝）、灯号位置→选择火焰法→选择仪器参数，编辑项目信息等内容→输入标准曲线各浓度参数（如：S1:0.0,S2:10.0,S3:20.0……）,选择浓度单位为：mg/L→选择是否做样品空白→输入完后点“确定”。
5.点“Start”按键→设置灯电流等参数：灯类型为HCL，灯电流为x(mA)，（可设置预热灯号）。
参数输好后点击“设置”（这时所选灯点亮），→点击“寻峰”，等待仪器完成。
6.等基线稳定后再点火，可以点开“signal（原始信号图）”对话框，可以点“zero”按钮调零，待信号图框下数字显示在0.000左右即为基线稳定。
7.点火。
点火前仔细检查气路，并确保水封完好（即废液排液管中留一段水柱）打开空气压缩机，将其出口压力调至0.3Mpa，打开乙炔钢瓶总阀门，再慢慢打开减压阀，使减压阀指示输出压力为0.1MPa→按主机上“点火”开关，听到电磁阀响一声后，缓慢逆时针旋转乙炔流量旋钮，并调至乙炔流量1~1.5L/min左右，若管道中有空气，一次点不着火，听到报警声后立即关闭点火开关，待几秒钟后再开（可能需要几次），直到点着火→调节乙炔流量，使其符合测定要求到大小，同时打开仪器上方的排气扇排废气。