选择培养基分离法
2020/12/31
编辑ppt
4
1.平板 划线法
2020/12/31
编辑ppt
5
2020/12/31
编辑ppt
6
2020/12/31
编辑ppt
7
2020/12/31
编辑ppt
8
2020/12/31
编辑ppt
9
2.稀释倒平皿法
2020/12/31
编辑ppt
10
2020/12/31
在不补充营养物质或移去培养物， 保持整个培养液体积不变条件下， 以时间为横坐标，以菌数为纵坐 标，根据不同培养时间时细菌数 量的变化，可以作出一条反映细 菌在整个培养期间菌数变化规律 的曲线。
2020/12/31
编辑ppt
28
2020/12/31
生长曲线可 分：
延滞期 lag phase
对数期 log phase
19
2020/12/31
编辑ppt
20
３．薄膜过滤计数法
常用微孔薄膜过滤法测定空气和水中的 微生物数量。
2020/12/31
编辑ppt
21
此法适用于测定量大、含菌浓度很低的流体
样品，如水、空气等。 2020/12/31
编辑ppt
22
4．比浊法
为测定菌悬液中细胞数的快速方法。原 理是悬液中细胞浓度与混浊度成正比， 与透光度成反比，可用分光光度计测定 光密度，对照标准曲线求出菌液浓度。
编辑ppt
11
3. 单细胞分离法
采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞进行 培养以获得纯培养 。
在显微镜下使用单孢子分离器进行机械操作，挑取单 孢子或单细胞进行培养。也可以采用极细的毛细管在 载玻片的琼脂涂层上选取单孢子并切割下来，然后移 到合适的培养基进行培养。
2020/12/31
编辑ppt
蛋白质总量＝含氮量×6.25
细胞总量＝蛋白质总量÷(50%～80%(或 65%))≈蛋白质总量×1.54
DNA含量
核酸DNA是微生物的重要遗传物质，每 个细菌的DNA含量相当恒定，平均为 8.4×10-5ng.
细菌细胞的干重约为湿重的20~25%。
2020/12/31
编辑ppt
26
6.生理指标测定法
编辑ppt
16
2020/12/31
编辑ppt
17
2020/12/31
编辑ppt
18
２．平板菌落计数法
此法又称活菌计数法，其原理是每个活细菌在 适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生 长形成菌落。
每毫升原菌液活菌数＝ 同一稀释度三个以上重复平皿菌落平均数×稀 释倍数
2020/12/31
编辑ppt
稀释倒平皿法 即可定性，又可定量，用途广泛
单细胞挑取法 局限于高度专业化的科学研究
选择培养基分离法 适用于分离某些生理类型较特殊
2020/12/31
编辑ppt
14
二 微生物的群体生长
（一）微生物群体生长测量方法
直接计数法
平板菌落计数法
薄膜过滤计数法
比浊法
称重 法
生理指标法
2020/12/31
编辑ppt
2020/12/31
编辑ppt
30
在工业发酵和科研中通常采取一定的措施缩短延滞期：
①通过遗传学方法改变种的遗传特性使迟缓期缩短；
②利用对数生长期的细胞作为“种子”（接种菌）；
③尽量使接种前后所使用的培养基组成不要相差太 大；
④适当扩大接种量等方式缩短迟缓期，克服不良的 影响。
2020/12/31
微生物的生理指标，如呼吸强度，耗氧量、酶活性、 生物热等与其群体的规模成正相关。
样品中微生物数量多或生长旺盛，这些指标愈明显， 因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量热 计等设备来测定相应的指标。
常用于对微生物的快速鉴定与检测
2020/12/31
编辑ppt
27
（二）细菌群体生长规律
生长曲线 growth curve
稳定期 stationary phase
衰亡期
编辑ppt
decline p29hase
1.延滞期 lag phase
将少量菌种接入新鲜培养基后，在开始一段时间内菌数 不立即增加，或增加很少，生长速度接近于零。也称延 迟期、适应期、调整期。
延迟期的特点：分裂迟缓、代谢活跃、细 胞体积增长快、细胞质均匀、细胞中蛋白 质和RNA含量高，对不良环境抵抗力降低， 容易产生各种诱导酶等。
群体生长的实质是包含着个体细胞生长与繁殖
交替进行的过程
2020/12/31
编辑ppt
2
本章目录
第一节 微生物纯培养的生长 第二节 理化因素对微生物生长的影响 第三节 微生物生长的控制
2020/12/31
编辑ppt
3
第一节 微生物纯培养的生长
一 纯培养的分离方法
平板划线法
稀释倒平皿法 单细胞挑取法
12
4.选择培养基分离法
各种微生物对不同的化学试剂、染料、抗生素 等具有不同的抵抗能力，利用这些特性可配制 合适某种微生物而限制其它微生物生长的选择 培养基，用它来培养微生物以获得纯培养。
2020/12/31
编辑ppt
13
微生物纯培养分离方法的比较
分离方法
平板划线法
应用范围
方法简便，多用于分离细菌
编辑ppt
31
2.对数期 log phase
以最大的速率生长和分裂，细菌数量呈对数增加，
细菌内各成分按比例有规律地增加，表现为平衡生长。
对数生长期的细菌个体形态、化学组成和生理特性等均 较一致，代谢旺盛、生长迅速、代时稳定，所以是研究 微生物基本代谢的良好材料。它也常在生产上用作种子 ，使微生物发酵的迟缓期缩短，提高经济效益。
第六章 微生物的生长
Chapter 6 microbial growth Yelimin
生长 growth
生物个体由小到大的增长，即表现为 细胞组分与结构在量方面的增加
繁殖reproduction
指生物个体数目的增加
在单细胞微生物中，生长繁殖的速度很快，而 且两者始终交替进行，个体生长与繁殖的界限难以 划清，因此实际上常群体生长作为衡量微生物生长 的指标。
此法适用于菌液浓度在107个/ml以上、无 杂物、颜色较浅的样品。
2020/12/31
编辑ppt
23
2020/12/31
编ppt
24
5.称重法
此法的原理是根据每个细胞有一定的重量而设 计的。
通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算 微生物群体的生物量；
2020/12/31
编辑ppt
25
蛋白质总量
15
1 直接计数法
这类方法是利用特定的细菌计数板或血细胞计数 板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的 数量。
缺点： 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察；
每毫升原液所含细菌数
＝每小格平均细菌数×400×l000×稀释倍数
2020/12/31