高中生物颜色反应小结 1 染色 1.1 定义：利用物理或化学方式使被染物质与染色剂结合从而使被染物质显示染色剂颜色的过程。 1.2 应用价值：根据细胞中某结构的成分特点，恰当选择与该成分具有较强亲和力的染色剂对细胞 进行染色从而显示细胞不同结构的形态与位置。 1.3 染色剂的分类 作为染色剂必须具备两个性质： 一要具有颜色；二要与被染组织之间有亲和力。这两个性质 分别是由染色剂中产生颜色的发色基团，和与被染组织之间有亲和力的助色基团来决定的，发色基 团能产 生颜色，但由于它对被染组织没有亲和力，只能使被染组织暂时染色，但经物理作用后又 会被除去，所以发色基团必须与被染组织之间能产生亲和力的助色基团结合 才能成为染料（染色 剂）。助色基团的存在使染料物质离子化，极性增强，促进染料与组织间发生作用，产生染色效 果，而助色基团的性质决定了染料是酸性或碱性 染色剂。一般根据染色剂的官能基团（助色基 团），把染色剂分为酸性染色剂、碱性染色剂和中性染色剂。酸性染色剂是指酸性助色基团，在水 中电离后其本身（含 发色基团）成为带负电荷阴离子的染色剂，这类染色剂一般用于染细胞质， 如伊红、橘黄 G、 甲基蓝等。碱性染色剂是指碱性助色基团，在水中电离后其本身（含发色基团） 成为带正电荷阳离子的染色剂，这类染色剂一般用于染细胞核，如苏木精、龙胆紫、 醋酸洋红、 甲基绿和美蓝等。中性染色剂是酸性染色剂和碱性染色剂的复合物，又可称为复合染料。是由碱性 染料（色碱的盐）和酸性染料（色酸的盐）配制而成。 其中染色剂的分子很大，所以往往水中溶 解度较低，需用酒精做溶剂。血液学中的血液涂片经常使用的瑞氏染色剂及姬姆萨染色剂就是这种 混合染色剂。其中的各种 不同成分可分剔使核、胞浆和颗粒着色。 活体染色是指利用某些无毒或毒 性很小的染色剂来显示出细胞内某些结构，而不影响细胞的 生命活动的染色方法，因此活体染色技术通常可以用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病 理状 态。它包括体内活体染色和体外活体染色，体内活体染色和体外活体染色的主要区别是体内 活体染色是在有机体内部，因此不是在空气中而是在还原的环境中进行 的，体外活体染色则是在 空气中，在氧化的环境中进行的。 活体染色剂是一种能被生物活细 胞的某种构造吸收或吸附，但对于细胞、组织和生物体不发 生有害作用的染料。一般染料不能穿透细胞膜，只有当细胞被固定后，细胞膜被破坏，染料才能进 入细胞 内部，但是有一些染料（即活体染色剂）却能进入活细胞，它们是一些无毒或毒性很小的 染色剂，能使细胞内某些特定结构着色。活体染色剂多为碱性染料，如中性 红、健那绿（詹纳撕 绿）亚甲基蓝、甲苯胺蓝和亮焦油紫等，它们解离后带正电，其中有的染料能与细胞内的某种特定 结构专一性的结合，因此能达到对细胞内的某 种特定结构进行染色的目的，例如，可用中性红染 液泡系，用健那绿染线粒体。 2 颜色反应 2.1 定义：化学物质在一定的条件下和特定的试剂混合后发生的特定颜色变化。 2.2 应用：用于检测生物样品中是否有某种物质或某物质量的多少，有该物质时会发生颜色反应， 该物质含量多时回发生较重的颜色反应。 3 染色和颜色反应的比较 原理 染色 颜色反应 利用染色剂对被 染物质的亲和性 利用化学反应生 成新的物质 研究对象的颜色 和染色剂一致 和显色剂不同 应用价值 显示某结构的形 态和位置 检测样品中某物 质是否存在及含 量多少 实例 龙胆紫、醋酸洋红、甲 基绿对 DNA 的染色等 斐林试剂与还原糖、双 缩脲试剂与蛋白质的反 应等
染 色
颜 色 反 应
双缩脲试剂 探究酵母细胞呼 吸的方式 果酒的制作 制作泡菜并检测 亚硝酸盐含量 DNA 的粗提取与 鉴定 对氨基苯磺酸、 N-1-萘基乙二胺 盐酸盐 二苯胺 重铬酸钾溶液
亚硝酸盐
玫瑰红
DNA
蓝色
4 应用染色或颜色反应的高中生物实验 方法 实验名称 检测生物组织中 的脂肪 观察 DNA 和 RNA 在细胞中分布 试剂 苏丹Ⅲ 苏丹Ⅳ 甲基绿 吡罗红 用高倍镜观察叶 绿体和线粒体 观察根尖分生组 织细胞的有丝分 裂 低温诱导植物染 色体数目的变化 测定饮用水中大 肠杆菌的数目 分解纤维素的微 生物的分离 月季的花药培养 健那绿 醋酸洋红 龙胆紫 改良苯酚品红 伊红—美蓝 刚果红 醋酸洋红 焙花青—铬矾 检测生物组织中 的糖类、蛋白质 碘液 斐林试剂 淀粉 还原糖 蛋白质 酒精 大肠杆菌 纤维素 细胞核 DNA RNA 线粒体 染色体 作用对象 脂肪 颜色 橘黄色 红色 绿色 红色 蓝绿色 红色 紫色 红色 黑色 红色 红色 蓝黑色 蓝色 砖红色 紫色 灰绿色