溶出度或释放度方法的研究 注意点 上述研究应尽可能有对照制剂数据的支持。 应取12片与原研制剂进行多条溶出曲线对比，每种介质溶出量必须有 一点达到85%以上，且F2均应大于50，计算时间点应不少于3个，且 溶出量在85%以上的时间点不得多于1个。在处方研究时，时间点尽 可能多点，这样对于F2的跟踪评价更加充分和清晰 当出现主成分在某pH介质中极不稳定，溶解后即迅速分解，无法测定 的情况，则该介质溶解度可不测定，其溶出曲线亦可免做。 对于溶出曲线测定第1个时间点的各溶出数据的RSD大于20%，以及 在其后的时间点的溶出数据RSD大于10%，溶出结果就可以被认为具 有高度变异性。溶出结果的高度变异性使得处方、工艺等变化对制剂 质量的影响无法进行测定和评估。应从方法适用性或处方本身考虑予 以解决 对于溶出度考察需在不同pH介质中进行，在方法建立阶段，尚有必要 对溶出前后的pH是否发生变化进行检查。 若溶出度均值超出含量2.0%以上，则说明溶出度测定方法有干扰。
四、处方前研究 原料药理化性质测定 性状 包括原料药的颜色、气味和外观 晶形 多晶型、无定形、水合物等 可影响药物的溶解度，溶出度，颗粒流动性，可压性，稳 定性若非稳定晶型在生产中或领存中可能发生转晶 如有不同晶型存在，共有几种晶型？哪种是最稳定晶型？ 原料药采用哪种晶型？是否存在任何专利侵权问题？ 检测方法：X衍射、红外、DSC、TGA
五、质量标准的建立
如果已有多个药典标准，应采用最严格的标准执行。 制剂的质量标准包括：性状、鉴别、检查、含量
性状 制剂的性状是考察样品的外形和颜色。如片剂应描述是什 么颜色的压制片或包衣片（包薄膜衣和糖衣），除去包衣 后片芯的颜色，以及片子的形状，如异形片（长条形、椭 圆形、三角形等）；片面有无印字或刻痕或有商标记号等 也应描述。硬胶囊剂应描述内容物的颜色、形状等。注射 剂一般为澄明液体（水溶液），但也有混悬液或粘稠性溶 液，需注意对颜色的描述，还应考察贮藏过程中性状是否 有变化。
三、分析方法（HPLC）的摸索
流速、进样体积、柱温 样品溶剂的选择等 （尽可能用流动相来溶解，若流动相不能溶解，可先加有 机溶剂溶解，再用流动相稀释，或选用与流动相极性相近 的稀释剂） 样品溶液制备的振摇或超声时间
三、分析方法（HPLC）的摸索
• 申报SFDA时，若USP、EP、CP等均收载该产品的杂质检测方法， 应先通过3个药典方法的比较，对比检出杂质的个数，含量，确定质 量控制最严格，最全面检测方法，并在此基础上进行进一步的优化。 若申报FDA时，应该严格按照USP要求检测，不得随意更改。 • 杂质分析方法应能检测所有的工艺杂质和降解产物，因此在无药典方 法参考时，制剂分析方法的开发应尽量与本公司API的检测方法保持 一致，并在此基础上进行进一步的优化，使主峰与杂质及杂质与杂质 之间均能达到有效分离。现USP与进口标准中多采用含量与杂质相同 的色谱条件。 • 详细说明该方法的研究进程报告（CTD格式申报中必须要求的内容） • 所开发的方法应具有稳定性指示能力，特别关注质量守衡，可通过进 行强力降解试验来证明，守衡要97%以上。必要时，可结合LC-MS。 • 原料工艺中的杂质（起始物料、中间体等），如果含量不高且不降解， 可以不再控制。 • 分析方法应尽可能在处方研究前确定，以保证处方研发数据的有效性 和连续性。
四、处方前研究
API与辅料相容性研究 实验条件：50℃(敞口)/40℃ RH75%(闭口) 取样时间：2周 4周 考察内容：性状、含量、有关物质、DSC等
前提：1、确定了有效和稳定的分析方法 2、完成了API降解和溶液稳定性，明确了主要杂质 和降解产物
注意实验数据前后的逻辑性，发现实验偏差，及时调查。
（磷酸盐：pH2.1-3.1、pH6.2-8.2；醋酸盐： pH3.8-5.8)
检测器及检测波长的选择
(方法开发初期，应选DAD或PDA检测器来开方法，杂质方法所选波 长应能检测到所有杂质，且杂质与主峰的紫外吸收相当，并且应该有 足够的灵敏度(LOQ浓度≤0.05%)；含量方法所选波长应选择该药物主 峰的最大吸收）
一、相关文献资料的查阅
相关科学书籍、期刊杂志、专业网站、论文专著、专利等
(Merck Index、PDR、日本橙皮书、CDE、FDA公布的溶出曲线数据 库、维普数据库、丁香园、欧洲药品评价局EMEБайду номын сангаас、马丁代尔大药典）
原料药及制剂成品的药典专论
（USP、EP、JP、BP、CP、USP-PF、进口标准）
四、处方前研究 原料药理化性质测定 粒径分布 可影响溶出度，颗粒流动性、与辅料的混合等 检测方法：筛分法，玛尔文激光散射扫描法、显微镜法 熔点 DSC（热分析法） 水中的pH值 酸碱解离常数(pKa) 吸湿性 湿度：30%、40%、50%、60%、70%、80%和90% 时间：0、1、2、3、10、14天 CP中规定在80%RH条件下放置24小时
溶出度或释放度方法的研究
• 溶出介质的选择 1、根据该药物在体内吸收的主要消化道部位的生理pH 2、能在一定程度上反映体内外相关性的pH（适用于创新药） 3、最能体现不同来源制剂间彼此差异的pH 4、最能反映生产工艺变化、偏差的pH 5、溶出最低的pH 6、溶出数据精密度更佳的pH
• 测定法 UV（测定的吸收度范围0.2～0.8）或HPLC；对于复方制剂，应首选 HPLC • 取样时间点(普通制剂） 质量标准中为单点取样，一般为刻钟的整数倍（15、30、45、60、 90、120min)；有些治疗窗窄，防止突释的产品会订多个取样点。 溶出曲线：间隔5、10或15分钟取样；通常规定5、10、15、20、30、 45、60分钟
药物与药品包材相容性的研究
药品包装材料与药物相容性试验是指为考察药品包装材料与药 物之间是否发生迁移或吸附等现象，进而影响药物质量而进行 的一种试验。 药品包材主要包括玻璃、橡胶、金属、塑料等，注射剂应采用 正放、倒放、侧放同时进行考察。 实验条件：按照影响因素、加速、长期稳定性条件进行考察 考察内容：同影响因素、加速、长期稳定性项目 * 参考资料：YBB00142002《药品包装材料与药物相容性试验指 导原则》
五、质量标准的建立
鉴别 通常采用灵敏度高、专属性较强、操作较简便、不受辅料干扰的方法 对制剂进行鉴别。鉴别试验一般至少采用二种以上不同类的方法，如 化学反应法、色谱法（HPLC、GC、TLC）、和光谱法（UV、IR） 化学反应法： 选择官能团专属的化学反应进行鉴别。包括显色反应、沉淀反应等 色谱法： HPLC、GC法采用保留时间对比来鉴别；TLC法采用比移值（Rf）和 显色等进行鉴别。 光谱法： IR是鉴别试验的重要方法，应注意根据产品的性质选择适当的制作方 法。UV应规定在指定溶剂中的最大吸收波长，必要时，规定最小吸 收波长；或规定几个最大吸收波长处的吸光度比值或特定波长处的吸 光度，以提高鉴别的专属性。
原研药的有关信息
（药物说明书，可确定药物日最大剂量，为制订杂质限度提供依据）
公司内原料药部门的相关信息及供应商的技术文档（DMF）
包括原料药的分析方法、验证资料、合成工艺信息等
二、对照制剂、对照品、色谱柱、试剂的购买
购买原研品（FDA橙皮书上的产品）时皆应尽可能获取不 同时间段的多个批号样品（至少3批），如出厂不久和临 近有效期，进行溶出曲线对比，杂质谱对比，稳定性对比 （影响因素试验和长期、加速稳定性）。
溶出度或释放度方法的研究 • 溶出介质的选择
对于难溶于水的药物，可在溶出介质中添加表面活性剂（十二烷基硫 酸钠或吐温-80），但应对添加种类与浓度进行评价。另外由于表面 活性剂的质量可能存在明显差异，应注意不同来源的表面活性剂可能 会对试验结果带来显著性差异的情况，尤其使用十二烷基硫酸钠时。 建议采用分析级或高纯度的来避免上述情况，并在质量标准中注明使 用的品牌，便于其后的试验易于重现。 禁止使用有机溶剂 试验前应首先进行原料药在各pH值溶出介质中的稳定性考察，以确保 试验数据的准确测定 也可采用pH1.2不含酶的人工胃液和pH6.8不含酶的人工肠液。 当硬胶囊使用的囊壳为明胶胶囊时，为避免产生交联现象影响溶出时 可加入胃蛋白酶或胰蛋白酶。
四、处方前研究 原料药理化性质测定 原料药的稳定性 进行影响因素试验，初步考察API的稳定性 条件：根据CP要求进行高温（60℃ 40℃）、高湿 （75%RH 92.5%RH)、强光照射(4500Lux±500Lux)等条 件下的实验，分别于5天、10天取样检测。 原料药强力降解试验 溶液：高温、强酸、强碱、氧化、光照 固体：高温、高湿、光照 重点关注各条件下的降解产物；质量守衡。 应考虑PH对降解的影响。
三、分析方法（HPLC）的摸索
仪器设备（Agilent 、waters、Shimadzu等） 色谱柱的选择（C18、C8、Phenyl、CN、Chiral等） 洗脱模式：等度或梯度
(杂质检测方法尽可能采用梯度洗脱）
流动相组成及比例：乙腈/甲醇：水/缓冲液 甲醇/水、乙腈/水、加缓冲液（可加甲醇、四氢呋喃等优 化分离） 是否用缓冲液或离子对试剂：酸、碱或中性化合物 缓冲剂、缓冲液pH、缓冲能力及离子强度的选择
四、处方前研究 原料药理化性质测定 溶解度
有机溶剂的溶解度（甲醇、乙腈、不同浓度的乙醇（100%、75%、 50%）等（温度：室温） pH-溶解度测定（水、pH1-7.5、pH=pKa、pH=pKa+1、pH=pKa-1)， 考虑到实验偏差，每个pH处的溶解度应至少测定3次，并绘制“pH溶解度”曲线，并且测定样品溶解前后溶液的pH值及在不同pH条件 下的溶液稳定性。（温度：37℃） 不同浓度的SDS或吐温80溶液（适用于水溶性差的原料药，浓度按照 1、2、5序列增加，即0.01%、0.02%、0.05%、0.1%、0.2%、0.5%、 1.0%、2.0%，最高至3.0%），考虑到实验偏差，每个pH处的溶解度 应至少测定3次，研究中应注意不同来源的表面活性剂可能会对试验 结果带来显著性差异的情况。（温度：37℃） 影响溶解度的因素：溶剂、pH、温度 注意事项：降解、晶型转变 目的：为溶出介质选择、含量和有关物质测定时样品溶液制备提供信 息