指用规定的对照品对色谱系统进行试验， 指用规定的对照品对色谱系统进行试验， 应符合要求。包括理论板数 （ n）、 分 应符合要求 。 包括理论板数（ ） 离度（ ） 重复性和拖尾因子（ ） 离度 （ R） 、 重复性和拖尾因子 （ T） 等四个指标。 等四个指标。
CH CH C O O O O− + Sb Sb 2K 3H2O O− O O O O C CH CH C O
O C O
酒石酸锑钾
Mg(C17H35COO)2
硬脂酸镁
O
C O
C C CH O Fe
O
富马酸亚铁
CH2OH HOCH2 CHOH HOCH CHO OH O OCH CHO Sb O Sb OCH Na3·9H CHO OCH COO OOC
结构特点： 结构特点：C—X
（一）卤原子的活泼性
卤原子与碳原子直接相连，卤原子的活泼 性和它直接相连的烃基的结构有很大关系。 乙烯型卤和芳卤不活泼
CH2 CH X
X
（一）卤原子的活泼性
烯丙型卤和苄卤
CH2 CH CH2 X
活泼
CH2X
卤代烷型
介于两者之间
CH2 CH (CH2)n X
n≥2
（一）卤原子的活泼性
R∝C ∝
对照品比较法
供试品溶液试剂空白的荧光强度
RX − RXb CX = Rr − Rrb Cr RX − RXb CX = Cr × Rr − Rrb
色谱法
利用物质在流动相与固定相两相中分配系数差异 而得以分离， 并在检测中能检出其信号， 而得以分离 ， 并在检测中能检出其信号 ， 从而达到 分离、分析的一类分析方法。 的一类分析方法。 分离、分析的一类分析方法 GC HPLC
第二节 定量分析方法特点
化学分析法
常用的 含量测 定方法
仪器分析法 生物学方法 酶化学方法
经典化学分析 现代仪器分析技术
电 化 学 分 析 法
容 量 分 析 法
重 量 分 析 法
光 谱 分 析 法
色 谱 分 析 法
容量分析法 酸碱滴定法
容量分析法 （滴定分析法） 滴定分析法）
氧化还原滴定法 配位滴定法 沉淀滴定法
一、定量分析样品前处理方法
Pretreatment of sample used in quantitative analysis 1
含卤素有机药物的分析 含金属有机药物的分析
2
1. 含卤素有机药物的分析
含卤素有机药物系指药物分子结构中所含 卤素直接与芳环或脂肪链相连者，而不包 括某些有机药物的卤酸盐或氢卤酸盐。
液相色谱的基本流程图 液相色谱的基本流程图
流动相
色谱柱
A B C进样阀检测器 NhomakorabeaD
E F
G
泵
泵输液
进样
分离
检测
记录
色谱图
← 色谱峰 峰高 峰宽 基线 ↓ 保留时间（ 保留时间（分） 色谱图即色谱柱流出物通过检测器时所产生的响应信号对时间的 色谱图 曲线图，其纵坐标为信号强度，横坐标为保留时间。
色谱系统适用性试验
第四章
药物定量分析与分析方法验证
结构
性质（物理、化学性质） 性质（物理、化学性质）
分析方法 （鉴别、检查、含量测定） 鉴别、检查、含量测定）
R OH
OH
OH
醇 酚 酚羟基
C C
烯醇羟基
R NH2
NH2
胺
芳胺 芳伯氨基
R COOH
COOH
羧酸
芳酸
主要内容
1 2 3
定量分析样品前处理方法 定量分析方法特点 药品质量标准分析方法验证
(Ksp=1.0×10−12 ) × Fe3+ + SCN¯
过量的硝酸银， 为指示剂， 过量的硝酸银，以Fe3+为指示剂，用硫氰 酸铵液回滴定。 酸铵液回滴定。
Fe (SCN) 2+ 淡棕红色） （淡棕红色）
碱性或酸性还原后测定法
本法是将含卤素有机药物在碱性或酸性下， 本法是将含卤素有机药物在碱性或酸性下，加还原 如锌粉）加热回流，药物产生还原裂解反应， 剂（如锌粉）加热回流，药物产生还原裂解反应， 使有机结合的卤素转变为无机的卤素离子， 使有机结合的卤素转变为无机的卤素离子，然后采 用银量法（ 用银量法（Fajans法）测定。 法 测定。 本法适用于测定结构中碘与苯环直接相连， 本法适用于测定结构中碘与苯环直接相连，且一个 苯环上含多个碘原子的含卤素有机药物。 苯环上含多个碘原子的含卤素有机药物。
容量分析法的计算
滴定度
每1ml规定浓度的滴定液所相当的被测药 规定浓度的滴定液所相当的被测药 物的质量。 物的质量。
百分含量的计算 原料药
光谱分析法 紫外—可见分光光度法 紫外 可见分光光度法 UV—Vis 光谱分析法 原子吸收分光光度法 AAS 荧光分析法
紫外— 紫外—可见分光光度法
Lambert -Beer定律 定律 物质对单色光 单色光（ ～ 浓度、 物质对单色光（200～760 nm）吸收强弱与吸光物质浓度、液 ）吸收强弱与吸光物质浓度 层厚度成正比 成正比。 层厚度成正比。
COOH I I
+ 11NaOH + Zn
H 3COCHN I NHCOCH3
泛影酸
COO Na
回流
△
H2 N N H2
+ 3NaI + 2CH3COONa
+ 2Na2ZnO2 + H2O
氧瓶燃烧分解后测定法
本法是将分子中含有卤素或硫等元素的有机 本法是将分子中含有卤素或硫等元素的有机 含有卤素或硫等元素 药物在充满氧气的密闭燃烧瓶中进行燃烧， 氧气的密闭燃烧瓶中进行燃烧 药物在充满氧气的密闭燃烧瓶中进行燃烧， 并将燃烧产物吸收于适当的吸收液中，再采 并将燃烧产物吸收于适当的吸收液中 吸收液 用适宜的分析方法来检查或测定卤素或硫等 元素的含量。 元素的含量。
2O
葡萄糖酸锑钠
O HO As OH
HgOCOCH3
NHCONH2
卡巴胂
醋酸苯汞
O HO As OH
HgOCOCH3
NHCONH2
卡巴胂
醋酸苯汞
含金属有机药物定量分析前的处理方法
不经有机破坏的分析方法 直接测定法;经水解后测定法; 直接测定法;经水解后测定法; 经还原-汞齐化后测定法 经还原经有机破坏的分析方法 湿法破坏(硝酸-高氯酸法;硝酸-硫酸法; 湿法破坏(硝酸-高氯酸法;硝酸-硫酸法; 硫酸-硫酸盐法等);干法破坏 硫酸-硫酸盐法等);干法破坏 );
（三氯叔丁醇） 三氯叔丁醇）
CCl3−C(CH3)2−OH + 4NaOH
回流 (CH3)2−CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2O △
NaCl + AgNO3
AgCl↓ + NaNO3 (Ksp=1.56×10–10 ) ×
AgNO3 + NH4SCN
AgSCN ↓ + NH4NO3
吸光度
A= E
1% 1cm
⋅ L⋅ C
A C（ g/100m ） 1% l = E1cm ⋅ L
液层厚度， 液层厚度， cm，如无 ， 特别注明， 特别注明， L=1cm
A C（ l ） 1% g/m = E1cm ⋅ L×100
百分吸收系数 可在手册或文献中查到
（2）对照法 AX = E CX L ） 1% AR = E1cmCRL
NaOH溶液 溶液 H2O2-NaOH液 液 或NaOH液液 硫酸肼饱和液 NaOH液液 硫酸肼饱和液
含碘有机药物
（三） 含金属有机药物的分析
含金属的有机药物： 含金属的有机药物：金属原子不与碳原子直接相 连，通常为有机酸及酚的金属盐或配位化合物 如酒石酸锑钾、葡萄糖酸锑钠、富马酸亚铁 如酒石酸锑钾、葡萄糖酸锑钠、 有机金属药物： 有机金属药物：金属原子直接与碳原子以共价键 相连， 相连，结合比较牢固 如卡巴胂、醋酸苯汞、 如卡巴胂、醋酸苯汞、汞撒利
1% 1cm
供试品溶液的吸光度
AX E CX L = AR E CRL
1% 1 cm 1% 1 cm
供试品溶液的浓度
AX CX = AR CR
对照品溶液的吸光度
AX CX = CR × AR
对照品溶液的浓度
荧光及荧光分析法
物质受光照射时， 物质受光照射时，在吸收某种波长光的同时又发射出比 原来波长更长的光 激发光停止照射，光线随之消失， 更长的光， 原来波长 更长的光 ， 激发光停止照射 ，光线随之消失， 这 种光称为荧光。荧光为发射光。 种光称为荧光 。 荧光为发射光。 利用荧光的物理特性进行 定性与定量测定的方法称为荧光分析法。 定性与定量测定的方法称为荧光分析法。 当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件一定时， 当激发光强度、 波长、 所用溶剂及温度等条件一定时， 较稀浓度范围内药物的荧光强度与溶液中该物质的浓度 在 较稀浓度范 围内药物的荧光强度与溶液中该物质的浓度 成正比。 成正比。
吸收系数
l A = lg = ECL T
百分吸收系数
E
1% 1cm
当吸光物质溶液浓度为1%（ ），液层厚度为 时的吸光度。 当吸光物质溶液浓度为 （1g/100ml），液层厚度为 ），液层厚度为1cm时的吸光度。 时的吸光度
4. 在含量测定中的应用
（1）吸收系数法（绝对法） ）吸收系数法（绝对法）
点 燃 C − C + O2 H l ↑ l → C
N l → aC
NaOH 液 溶
氧瓶燃烧装置及称样方法
A.燃烧瓶 B.铂丝网 C.D.盛固体样品滤纸及其折叠法 E.F.G.称取液体样品方法 燃烧瓶 铂丝网 盛固体样品滤纸及其折叠法 称取液体样品方法