药物定量分析与分析方法验证第一节定量分析样品的前处理方法分析样品的前处理：就是根据分析方法的要求，对不符合测定条件的原始样品，选用适当的方法进行处理，使其符合分析方法的要求。

在测定前进行的一切处理，都可以当作样品的前处理。

第二节定量分析方法的特点（一）容量分析法的特点容量分析法（也称滴定法），是将已知浓度的滴定液(标准物质溶液)由滴定管滴加到被测药物的溶液中，直至滴定液与被测药物反应完全(通过适当方法指示)，然后根据滴定液的浓度和被消耗的体积，按化学计量关系计算出被测药物的含量。

容量分析法所用仪器价廉易得，操作简便、快速，方法耐用性高，测定结果准确，通常情况下其相对误差在0.2％以下。

但本法的专属性(选择性)较差，一般适用于含量较高的试样的分析。

所以，容量分析法被广泛应用于化学原料药的含量测定。

（二）容量分析法的有关计算1、滴定度系指每lml规定浓度的滴定液所相当的被测药物的质量。

《中国药典》用毫克(mg)表示。

如，用碘量法测定维生素C 的含量时，《中国药典》规定：每lml 碘滴定液(0.05mol ／L)相当于8.806mg 的维生素C 。

2、滴定度的计算在容量分析中，被测药物(B)与滴定液(A)之间都按一定的摩尔比进行反应的，反应可表示为： aA+bB →cC+Dd 滴定度计算通式如下：C ab M ml mg T ⨯⨯=)/(式中，C ：滴定液的摩尔浓度；b ：被测药物的摩尔数；a ：滴定液的摩尔数；M ：被测药物的毫摩尔质量(分子量)。

备注：滴定度计算推导T M C ml b a ⨯⨯=1如，用碘量法测定维生素C 时【M=176.13】的含量时，碘滴定液的摩尔浓度为0.05mol ／L(以I 2为单元)，化学反应式如下：由反应式可知，维生素C 与碘(I 2)的摩尔比为1:1，滴定度(T)计算如下：)/(806.813.1761105.0)/(m l m g M ba m m l m g T =⨯⨯=⨯⨯= 再如，用溴酸钾法测定异烟肼【M=137.14】的含量时，溴酸钾滴定液的摩尔浓度为0.01667mol ／L(以KBrO 3为单元)，化学反应式如下：3C 6H 7N 3O+2KBrO 3→3C 6H 5NO 2+3N 2↑+2KBr+3H 2O则，滴定度：)/(429.314.1372301667.0)/(m l m g M ba m m l m g T =⨯⨯=⨯⨯= 3、含量的计算用容量分析法测定药物的含量时，滴定方式有两种，即直接滴定法和间接滴定法。

其测定结果的计算方法分述如下。

(1)直接滴定法:此法是用滴定液直接滴定，以求得被测药物的含量。

%100⨯⨯W T V 含量％＝式中，V ：消耗滴定液的体积；W ：供试品取用量；T ：滴定度。

滴定度在药典中是直接给出的，但在实际工作中，所配制的滴定液的摩尔浓度与药典中规定的摩尔浓度不一定恰好符合，此时就不能直接应用药典上所给出的滴定度(T)，但只要乘以滴定液浓度校正因数(F)即可换算成实际的滴定度(T ')，即F T T ⨯='规定摩尔浓度实际摩尔浓度=F于是，被测药物的百分含量可由下式求得：%100%100%⨯⨯⨯=⨯'⨯=WF T V W T V 含量 备注：片剂的含量测定结果与原料药不同，一般片剂的含量计算是以标示量的百分含量来表示的，具体可按下式计算：标示量：就是药品标签上注明，每一单位剂量药品中主药的量。

表示为g/片、mg/ml 等。

由于每片除含主药外，还含有赋型剂，故每片的实际重量超过标示量，且每片重又不可能一致，为了解决这一问题，在分析时，一般取样10片或20片，精密称定其总重量，以平均片重来代替片重进行计算。

%100⨯⨯⨯=取样量浓度校正因子滴定度积供试品消耗滴定液的体供试片片粉％%100⨯⨯⨯=WF T V 供试片片粉％ 片粉％片粉％＝平均片重每片含量⨯⨯=W％标示量每片含量标示量％100⨯= ％标示量％标示量标示量％100100%100⨯⨯⨯⨯⨯=⨯⨯⨯⨯⨯=W W F T V W W F T V例13-3烟酸片的含量测定取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于烟酸0.2g)，加新沸过的冷水50ml，置水浴上加热，并时时振摇，使烟酸溶解后，放冷至室温，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定。

每1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于12.31mg C6H5NO2。

烟酸片的标示量为100mg，即表示该片剂每片中含有烟酸l00mg。

《中国药典》规定本品含烟酸应为标示量的95.0％～105.0％。

含量在这两者之间即认为该片剂的含量符合规定。

如果称取的片粉为0.2486g，10片的总重量为1.1947g，滴定时消耗氢氧化钠滴定液(0.1005mol/L)的体积为16.80ml，则：式中F=0.1005是错误的。

应为F＝0.1005/0.1＝1.005注射剂含量测定结果的计算(13-10)式中，T ：滴定度；V ：消耗的滴定液的体积，ml ；F ：滴定剂的浓度校正因子；Vs ：供试品的体积，ml 。

例13-9维生素C 注射液(标示量5ml:0.5g)的含量测定精密量取本品2ml ，加水15ml 与丙酮2ml ，摇匀，放置5min ，加稀醋酸4ml 与淀粉指示液lml ，用碘滴定液(0.1020mol/L)滴定至溶液显蓝色，并持续30秒蓝色不消褪，消耗滴定液22.11ml 。

试计算本品是否符合药典规定的含量限度。

每lml 碘滴定液(0.1mol/L)相当于8.806mg 的维生素C(C 6H 8O 6)。

《中国药典》规定本品应为标示量的90.0％～110.0％。

计算：%10055.021.01020.011.2210/806.83⨯⨯⨯⨯=-m l gm l m l m l m g 标示量％(2)间接滴定法：间接滴定法包括生成物滴定法和剩余量滴定法。

剩余量滴定法亦称回滴定法，本法是先加入定量过量的滴定液A ，使其与被测药物定量反应，待反应完全后，再用另一滴定液B 来回滴定反应后剩余的滴定液A 。

本法常需进行空白试验校正，其百分含量则可按下式计算：%100%0⨯-=WF V V T 滴定液）（）含量（式中V 0为空白试验消耗滴定液体积(ml)，V 为样品消耗滴定液体积(ml)，W 为样品取量(g)，F 为滴定液浓度校正因数，T 为滴定度（定量加入的液体）。

例如：乙酰水杨酸的含量测定。

ＵＳＡ（ＸＸＩ）方法：取本品约 1.5g ，精密称定，准确加氢氧化钠(0.5mol/L)50.0ml ，水浴上煮沸15分钟，放冷，以酚酞为指示剂，用硫酸(0.25mol/l)滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。

每1ml 的氢氧化钠液(0.5mol/l)相当于45.04mg 的乙酰水杨酸。

乙酰水杨酸+2NaOH →水杨酸钠+醋酸钠+H2O 1mol : 2mol2NaOH+H2SO4→Na2SO4+H2O2mol : 1mol由以上反应可以知道，氢氧化钠2mol 与硫酸1mol 、本品1mol 相当，所以氢氧化钠0.5mol 与硫酸0.25mol 、本品0.25mol 相当。

1ml 氢氧化钠液(0.5mol/L)与1ml 硫酸液(0.25mol/L)、本品45.04mg 相当。

100016.18021000ml 0.5mol 1ml 45.04mg T ⨯⨯⨯⨯==g%100%100%10004504.0%100%100ASA%000⨯-=⨯-=⨯-⨯=⨯⨯=⨯=WF V V T W F V V T WM M V V V T 滴定液）（酸）（酸理酸实）（取样量碱滴定度取样量样品测得量Ｖ碱的计算：(V0-V)为药物替换的酸的体积。

Ｍ碱理已知。

2(V0-V)Ｍ酸实＝Ｖ碱Ｍ碱理碱理酸实）（碱M M V V V -=02 应该注意的问题：１、分子中所乘的数是滴定液与被滴定的标准液反应的摩尔比值。

２、计算所用的F 总是滴定液的F 。

不是定量加入的标准液的F 。

3、为了简化计算，往往在配制标准溶液时规定，不同的标准溶液浓度可以不一样，但是反应消耗的体积应一样。

这样就可以把计算公式简化为：酸理酸实）（酸理酸实）（碱M M V V M M V V V -=-=0022 备注：片剂含量测定结果计算：式中， W：平均片重，g ；例13-4司可巴比妥钠胶囊的含量测定取司可巴比妥钠胶囊(标示量为0.1g)20粒，除去胶囊后测得内容物总重为3.0780g ，称取0.1536g ，按药典规定用溴量法测定。

加入溴液(0.1mol/L)25ml ，剩余的溴液用硫代硫酸钠液(0.1025mol/L)滴定到终点时，用去17.94ml 。

空白试验用去硫代硫酸钠液25.00ml 。

按每lml 溴液(0.1mol/L)相当13.0lmg 的司可巴比妥钠，计算该胶囊中按标示量表示的百分含量。

注射剂应按下式计算。

％每毫升标示量标示量％样初滴定液100)(0⨯⨯⨯⨯⨯-=V V n F T V V式中，T ：滴定度；V ：供试品消耗的滴定剂的体积，ml ；V0：空白溶液消耗的滴定剂的体积，ml ；F ：校正因子；V 样：供试品的体积，ml 。

V 初：供试品初始溶解体积，ml 。

n ：稀释倍数例如：安钠咖注射液中所含咖啡因成分的含量测定方法为： 精密量取本品适量（约相当于咖啡因0.6g ），置50ml 量瓶中，加水至刻度，摇匀， 精密量取上述溶液10ml ，置100ml 量瓶中，加水20ml 与稀硫酸10ml ，再精密加碘滴定液（0.1mol/L ）50ml，用水稀释至刻度，摇匀，在暗处静置5分钟，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液50ml，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。

每1ml碘滴定液（0.1mol/L）相当于4.855mg的C8H10N4O2。

药典规定，本品含无水咖啡因（C8H10N4O2）应为标示量的93.0～107.0%。

现有某次含量测定的原始数据记录如下，标示量：0.24克/2ml，取样量V样：5.00ml，碘滴定液的浓度CI2：0.1065 mol/L，硫代硫酸钠滴定液的浓度CNa2S2O3：0.1024 mol/L，空白实验消耗硫代硫酸钠滴定液体积V0：25.14ml，剩余实验消耗硫代硫酸钠滴定液体积V：12.18ml。

试计算此次含量测定的结果。

%4. 1071001000224.055050101001.01024.0855.4)18.1214.25(1 =⨯⨯⨯⨯⨯⨯⨯-=％标示量％样二、光谱分析法紫外-可见分光光度法特点：1、灵敏度高，可达10-4～10-7g/ml。