他达拉非药学研究资料（CTD）目录3.2.S原料药 (1)3.2.S.4 原料药的质量控制 (1)3.2.S.4.1质量标准 (1)3.2.S.4.2分析方法 (10)3.2.S4.3分析方法的验证 (26)3.2.S.4.4批检验报告 (121)3.2.S.4.5质量标准制定依据 (125)3.2.S原料药3.2.S.4 原料药的质量控制3.2.S.4.1 质量标准第1页第2页第3页他达拉非药学研究资料（CTD） 3.2.S.4原料药的质量控制3.2.S.4.1质量标准临床研究用药品质量标准草案他达拉非TadalafeiTadalafil3C22H19N3O4389.40本品为(6R,12aR)-2,3,6,7,12,12a-六氢-2-甲基-6-[3,4-(亚甲基二氧)苯基]吡嗪并[1',2':1,6]吡啶并[3,4-b]吲哚-1,4-二酮。
按干燥品计算，含C22H19N3O4应为98.0%~102.0%。
【性状】本品为白色至类白色粉末；无臭无味。
在N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜中易溶，略溶于四氢呋喃和乙二醇单甲醚，微溶于甲醇和乙腈，极微溶解于乙醇和异丙醇，在正己烷、正庚烷和水中不溶。
比旋度取本品，精密称定，加二甲亚砜溶解并定容稀释制成每1mL中约含10mg的溶液，依法测定（附录ⅥE），比旋度为+78°~+84°。
【鉴别】（1）取本品，加0.1%三氟乙酸水溶液-乙腈（1:1）制成每1 ml中约含10 μg的溶液，照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ A)测定，在221 nm、284 nm和291nm的波长处有最大吸收。
（2）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
（3）本品的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致。
【检查】有关物质取本品，精密称定，用0.1%三氟乙酸水溶液:乙腈=1:1（v:v）溶解并定容稀释制成每1 ml中约含0.4mg的溶液，作为供试品溶液；取他达拉非对照品，精密称定，用0.1%三氟乙酸水溶液:乙腈=1:1（v:v）配制成每1 ml中约含0.4μg的溶液，作为对照溶液。
照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录ⅤD），以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为0.1%三氟乙酸水溶液，流动相B为乙腈，按下表进行线性梯度洗脱；柱温为40℃；检测波长为285nm。
取6R,12aS-非对映体，精密称定，用0.1%三氟乙酸水溶液:乙腈=1:1（v:v）溶解并定容稀释制成每1 ml中约含20μg的溶液，作为6R,12aS-非对映体储备液；取本品约10mg，精密称定，置于25mL量瓶中，精密加入6R,12aS-非对映体储备液1ml，用0.1%三氟乙酸水溶液:乙腈=1:1（v:v）溶解稀释定容至刻度，摇匀，即得系统适用性试验溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，6R,12aS-非对映体峰和他达拉非峰的分离度应符合要求，6R,12aS-非对映体与他达拉非的相对保留时间应约为1.03。
取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的2%；精密量取供试品溶液和对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。
供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按加校正因子主成分对照法计算，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1倍（0.1%），剔除在相对保留时间约为1.03处杂质峰后，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的3倍（0.3%），供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积0.5倍（0.05%）的峰可忽略不计。
时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）0 85 153 85 1530 5 9533 5 9535 85 1545 85 15有关物质相对保留时间表及校正因子化合物相对保留时间校正因子D-色氨酸甲酯盐酸盐0.58 1.58 氧化杂质2 0.81 2.76中间体1 0.85 1.16他达拉非 1.00 1.00中间体2 1.24 1.13双取代杂质 1.28 1.18对映体和非对映体取本品适量，加正己烷-异丙醇-乙腈（40:40:20）溶解并稀释制成每1mL中含0.5mg的溶液，作为供试品溶液；另取他达拉非对照品适量，加正己烷-异丙醇-乙腈（40:40:20）溶解并稀释制成每1mL中含0.5μg的溶液，作为对照溶液。
照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录ⅤD），以直链淀粉-三（3,5-二甲苯基氨基甲酸酯）涂敷硅胶为固定性（CHIRALPAK AD-H色谱柱，4.6×250mm，5μm，DAICEL CORPORATION）；以正己烷-异丙醇（50:50）为流动相；流速每分钟0.75mL；检测波长222nm；柱温25℃。
取等量的他达拉非对照品和6R,12aS-非对映体各适量，置于同一量瓶中，加正己烷-异丙醇-乙腈（40:40:20）溶解并稀释制成每1mL中各含10μg的溶液，作为系统适用性试验溶液。
取系统适用性试验溶液10μl 注入液相色谱仪，记录色谱图，6R,12aS-非对映体峰和他达拉非峰的分离度应符合要求，6R,12aS-非对映体与他达拉非的相对保留时间应约为0.79。
取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的2%；精密量取供试品溶液和对照溶液各10 μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。
供试品溶液色谱图中如有下表中的对映体和非对映体杂质峰，按主成分对照法计算，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1倍（0.1%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的3倍（0.3%），供试品溶液色谱图中其它杂质峰忽略不计。
对映体和非对映体相对保留时间化合物相对保留时间6R,12aS-非对映体0.79他达拉非 1.006S,12aS-对映体 1.506S,12aR-非对映体 2.16残留溶剂照残留溶剂测定法(中国药典2010版二部附录ⅧP)测定，应符合各溶剂限度要求。
精密称取甲醇、无水乙醇、乙腈、二氯甲烷、2-甲氧基乙醇、正庚烷、正丁醇和N,N-二甲基甲酰胺适量，加二甲亚砜定量稀释制成每1ml中约含甲醇600μg、无水乙醇1000μg、乙腈82μg、二氯甲烷120μg、2-甲氧基乙醇10μg、正庚烷1000μg、正丁醇1000μg、N,N-二甲基甲酰胺176μg 的溶液，作为对照品贮备液。
精密量取对照品贮备液5.0 ml置10ml量瓶中，用二甲亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；另取本品约0.5g，精密称定，置5ml量瓶中，加二甲亚砜稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，照残留溶剂测定法(中国药典2010版二部附录ⅧP)测定，以6%氰丙基苯基-94%二甲基硅氧烷共聚物为固定液(或极性相近)，起始柱温为35℃，维持13.5分钟后，以每分钟25℃的升温速率升温至220℃，维持5分钟，检测器为氢火焰离子化检测器，检测器温度为250℃，进样口温度为200℃。
取对照品溶液1 μl，注入气相色谱仪，记录色谱图，各色谱峰之间的分离度均应不小于1.5。
精密量取供试品溶液和对照品溶液各1 μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图。
供试品溶液如显示甲醇、无水乙醇、乙腈、二氯甲烷、2-甲氧基乙醇、正庚烷、正丁醇和N,N-二甲基甲酰胺峰，按外标法以峰面积计算，含甲醇不得过0.3%，含无水乙醇不得过0.5%，含乙腈不得过0.041%，含二氯甲烷不得过0.06%，含2-甲氧基乙醇不得过0.005%，含正庚烷不得过0.5%，含正丁醇不得过0.5%，含N,N-二甲基甲酰胺不得过0.088%。
干燥失重取本品，照2010年版《中国药典》二部附录ⅧL，105℃真空干燥3小时，干燥失重不超过0.5%。
炽灼残渣取本品，依法检查(中国药典2010版二部附录ⅧN)，残渣不得过0.1%。
重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查(中国药典2010版二部附录ⅧH 第二法)，含重金属不得超过百万分之二十。
【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2010版二部附录ⅤD)测定。
色谱条件与系统适用性试验用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%三氟乙酸水溶液（45:55）为流动相；流速为每分钟1.5ml；检测波长为285nm；柱温为40℃。
取有关物质项下的系统适用性试验溶液20 μl注入液相色谱仪，记录色谱图，他达拉非峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。
测定法取本品，精密称定，用0.1%三氟乙酸水溶液:乙腈=1:1（v:v）溶解并定容稀释制成每1 ml中约含0.1 mg的溶液，精密量取20 μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取他达拉非对照品，同法测定。
按外标法以峰面积计算，即得。
【类别】环磷酸鸟苷特异性磷酸二酯酶选择性可逆抑制剂【贮藏】避光，密封，阴凉干燥处保存【制剂】【有效期】24个月【杂质说明】D-色氨酸甲酯盐酸盐氧化杂质2：(6R,12aR)-2,3,6,7,12,12a-六氢-2-甲基-6-羟基-6-[3,4-(二氧亚甲基)苯基]吡嗪并[1',2':1,6]吡啶并[3,4-b]吲哚-1,4-二酮中间体1：(1R,3R)-2,3,4,9-四氢-1H-[3,4-(二氧亚甲基)苯基]吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸甲酯盐酸盐中间体2：(1R,3R)-2-氯乙酰基-2,3,4,9-四氢-9H-[3,4-(二氧亚甲基)苯基]吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸甲酯盐酸盐6R,12aS-非对映体：(6R,12aS)-2,3,6,7,12,12a-六氢-2-甲基-6-[3,4-(二氧亚甲基)苯基]吡嗪并[1',2':1,6]吡啶并[3,4-b]吲哚-1,4-二酮6S,12aS-对映体：(6S,12aS)-2,3,6,7,12,12a-六氢-2-甲基-6-[3,4-(二氧亚甲基)苯基]吡嗪并[1',2':1,6]吡啶并[3,4-b]吲哚-1,4-二酮6S,12aR-非对映体：(6S,12aR)-2,3,6,7,12,12a-六氢-2-甲基-6-[3,4-(二氧亚甲基)苯基]吡嗪并[1',2':1,6]吡啶并[3,4-b]吲哚-1,4-二酮双取代杂质：N,N-二(2-((1R,3R)-1-(3,4-亚甲二氧苯基)-3-甲氧羰基-2,3,4,9-四氢-1H-吡啶并[3,4-b]吲哚-2-基)-2-氧代乙基)甲胺他达拉非药学研究资料（CTD） 3.2.S.4原料药的质量控制3.2.S.4.2分析方法3.2.S.4.2 分析方法本产品他达拉非在美国药典（USP）、欧洲药典中均已收载，USP标准品可购买获得。
对常规通用检测项目，分析方法采用中国药典（ChP）附录收载的通用方法，对产品特有的具有专属性的检测项目如有关物质、含量测定和残留溶剂检测等，采用USP收载的相应方法。