上海师范大学
实验报告
专业、年级生物科学班级姓名学号
课程名称免疫学实验名称动物免疫与佐剂制备实验日期2011年10月4日
一、实验原理
以抗原免疫动物，机体会产生免疫应答，经多次增强免疫后，动物体内出现明显的应答证据和产物。

在形态方面，免疫注射部位的引流淋巴结可因免疫应答反应而明显肿大。

在解剖动物淋巴结切片中，可观察到初级淋巴结滤泡转化成次级淋巴滤泡，有生发中心形成。

若将淋巴结内细胞涂成涂片，染色后可观察到淋巴母细胞的存在。

在机能方面，可以发现细胞因子水平的变化，并检验出高浓度和高效价的特异性抗体。

免疫应答在有佐剂参与的情况下可大幅度增强。

目前常用的佐剂为福氏佐剂。

一般常用的免疫注射途径有皮内、皮下、腹腔与静脉4种方法。

二、实验用品
（一）器材
1、研钵，显微镜，高压灭菌锅。

2、小烧杯，平皿，卡介苗注射器，载玻片。

3、动物解剖板，眼科镊子，眼科剪刀。

（二）试剂
福氏完全佐剂、人免疫球蛋白、瑞氏染液、含福氏完全佐剂的抗原（1mg/mL）
（三）材料
未免疫的小白鼠
三、实验程序
（一）操作方法
1、免疫动物：取小白鼠固定，将含福氏完全佐剂的抗原（1mg/mL）吸入卡介苗注射器，
鼠背部右下侧注射40~50微升。

2、免疫后动物引流淋巴结观察：
（1）淋巴结标本的采集，取免疫1周后的小白鼠处死，固定在动物解剖板上。

从腹正中剪开小白鼠皮肤，固定于两侧，寻找肿大的腹股沟淋巴结，取出置平皿中。

将髂窝处皮肤剪开，在髂窝软组织中寻找肿大的淋巴结，取出置平皿中，带开腹腔将内脏推向上方，在腹主动脉两侧寻找腹腔淋巴结，取出置平皿中。

（2）可做一组对照，及未免疫小白鼠的淋巴结标本。

（3）淋巴结大小、形态的观察：将淋巴结剪成两半，用小镊子在干净载玻片上作涂片。

待涂片干燥后，用瑞氏染液染色后在显微镜下观察，未免疫的标本做对照。

（二）注意事项
1、免疫小鼠时应注意回抽注射器，以确保未将免疫原注入血管。

2、取出腹主动脉两侧淋巴结时，应注意避免损伤血管，影响手术视野。

实验结果和讨论。