１ ０ ｍ ｌｍＬ Ｉ Ｔ 诱 导 ６ ｈ时 条件 下 蛋 白 表 达 量 最 高 。Ｓ Ｓ Ｐ ＧＥ电 泳 检 测 的 纯 化 目的 蛋 白约 为 ９ Ｄ ， 预 ． ｍｏ／ Ｇ Ｐ Ｄ －Ａ ０ｋ ａ与 计 大小 一致 。ＶＰ ２基 因融 合 蛋 白 的优 化 表 达 和 纯 化 为 研 究 犬 细 小 病 毒 亚 单 位 疫 苗 奠 定 了基 础 。 关 键 词 ： 犬 细 小 病 毒 ； ２基 因 ； 合蛋 白 ； 化 与 纯 化 ＶＰ 融 优
犬 细 小病 毒 ＶＰ ２基 因 原核 表 达 条 件优 化 与 蛋 白纯化
陈 胜 男 ， 素 贞 ，翟 少 伦 ， 子 健 马 简
（ 疆 农 业 大 学 动 物 医学 学 院 ， 鲁 木 齐 新 乌 ８０ ５ ） ３ ０ ２
摘
要 ： 为 了 提 高 犬 细 小 病 毒 ＶＰ ２基 因 在 大 肠 杆 菌 Ｅ．ｃ ｌ ＢＬ １（ ｏｉ ２ ＤＥ３ 中 的表 达 量 ， 过 改 变 诱 导温 度 、 导 时 ） 通 诱
ｐａ ｍｉ ｃ ｅ ｉｈ ａｃ ｌ ， Ｌ２ ＤＥ３ ｌｓ ｄＥｓｈ ｒｃ ｉ ｏ ｉ Ｂ １（ ）ｗａ ｈ ｐ ｉ ａ ｅ ． ｍｍｏ ／ ＰＴＧ ｒ ｎ ｕ ｅ ｏ ｔ ｓｔ ｅｏ ｔ １ｗｈ ｎ １ ０ ｍ ｌｍＬ Ｉ ｗｅｅ ｉｄ ｃ ｄ ｆ ｒ６ ｈ ａ
３ ℃． ５ Ｆｕｓｏ ｏ ｅｎ ｐｕ ｉｉｄ ｂｙ Ｇｌ ｔ ｔ ｏ ｐ ｒ ｓ Ｂ ｆｉ ｉｙ ｃ ｌ ｍ ｎ ｗａ ｂｏｕ Ｄａ ｗｈ ｃ ｒ ｉ ｎ ｐｒ ｔ ｉ ｒｆｅ ｕ ａ ｈｉ ｎｅ Ｓｅ ｈａ ｏ ｅ ４ ａ ｆｎ ｔ ｏ ｕ ｓａ ｔ９０ ｋ ｉ ｈ ｗｅ ｅ
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间 及诱 导剂 浓 度 等 条 件 对 表 达 量 产 生 影 响 ， Ｓ ＳＰ Ｅ 电 泳 分 析 证 明 ＶＰ 以 Ｄ － ＡＧ ２基 因 蛋 白表 达 的 最 佳 条 件 ， 通 过 并
Ｇｌｔｔ ｉｎ ｅ ｈ ｒ ｓ Ｂ亲 和 层 析 柱 法 纯 化 目 的 蛋 白 。结 果 表 明 ， 组 质 粒 Ｅ．ｃ ｌ ＢＩ２ ＤＥ３ ｕａｈｏ ｅＳ ｐ ａｏ ｅ４ 重 ｏ ｉ １（ ）在 ３ ℃ ， ５
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｉ ｒ ｒｔ ｍ ｐ ｏｖ ｈｅ ｅ ｒ ｓ ｉ ｎ ｌ ｖ ｌｏ ｎｉ ｓ ｒ ｃ ： ｎ ｏ ｄｅ Ｏ ｉ ｒ ｅ ｔ ｘｐ ｅ ｓｏ ｅ ｅ ｆＣａ ｎｅｐａｒ ｏ ｉ ｕｓ （ ｖ ｖｒ ＣＰＶ ）ＶＰ２ ｇｅ ｅ ｉ ｃ ｅ ｉ ｈ ａ ｎ ｎ Ｅｓ ｈ ｒ ｃ ｉ ｃ ｌ ， ｐｔｍａ ｏ ｏ ｉ ｏ ｉ ｌｃ ｎｄｉｉ ｎｓｆ ｘ ｅ ｓｏ ｅ ｅ ｔｏ ｏｒｅ ｐｒ ｓ ｉ ｎ ｌ ｖ Ｉ ＧＳＴ— ｏｆ ＶＰ２ ｆ ｉ ｎ ｐｒ ｔ ｉ ｒ ｎ ｌ ｚ ｄ ｂ ｕｓｏ ｏ ｅ ｎ ｗｅ ｅａ ａ ｙ ｅ ｙ ＳＤＳ— ＰＡＧＥ ｔｄ ｆ ａ ｉ— ｆ ｒ ｎｔ ｃ ｎｃ ｎ ｒ ｔｏ ｔ ｍｐｅ ａ ｕｒ ｎｄ ｔｍｅ ｏ ｍｐｌ ｙ ｄ ｉ ｕｃ ｒ（ ＰＴＧ） Ｔｈ ｒ ｔ ｉ ｓｐｕ ｉｉｄ ｂｙ ｇ ｕ ａ ｅ ｅ ｏ ｅ ｔ ａ ｉ ｎ．ｅ ｒ ｔ ｅａ ｉ ｆｅ ｏ ｅ ｎｄ ｅ Ｉ ． ｅ ｐ ｏ ｅ ｎ ｗａ ｒｆｅ ｌ ｔ —
中 图分 类号 ：￥ ５ ． ５ ． ８１６９２ 文献标识码 ： Ａ
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新 疆 农 业 大 学 学 报
２ １ ， ４ １ ： ９ ６ ０ １３ （ ）５～ １
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文章 编 号 ：１ ０ — ６ ４ ２ １ ） ｌ０ ５ — ３ ０ ７８ １ （ ０ １ Ｏ 一 ０ ９０
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