中国科学院南海海洋研究所
2002年招收攻读硕士学位研究生入学考试试卷
02技本2 杜广梅一、名词解释（每题2分）
cosmid：是一类由人工构建的含有λDNA的cos序列和质粒复制子的特殊类型的质粒载体
糖酵解：在细胞之中各种酶将葡萄糖降解为丙酮酸并伴随着生成ATP的过程
冈崎片断：在DNA的半不连续复制过程中，滞后链的合成是先生成许多不连续片断，这些不连续的片断称为冈崎片断
操纵子:是指细菌基因表达和调控的单位,它包括结构基因,调节基因和调节基因产物所识别的控制序列
Taq酶:是一种在DNA聚合酶链式反应中用来扩增DNA的耐热的DNA聚合酶cDNA文库:是指将RNA病毒基因组以及某些生物的mRNA所携带的遗传信息反转录
成cDNA,再用cDNA建立的文库
转氨基作用:α-氨基酸的α-氨基借助酶的催化作用转移到丙酮酸的酮基上,结果是原来的氨基酸生成相应的酮酸,而原来的酮酸生成相应的氨基酸的作用
超卷曲:即蛋白质的超二级结构,是由若干相邻的二级结构单元组合在一起彼此相互作用,形成有规则,在空间上能辨认的二级结构组合体充当三级结构的构件,成为超二级结构
退火:变性核酸的互补链在适当条件下重新缔和成双螺旋的过程称退火
酶的活性中心:酶分子在三维结构上比较靠近的少数几个氨基酸残基或这些残基的某些基团,有的还包括某些辅酶的一部分,包括一个催化部位和一个结合部位
二、判断题（每题1分）
1、对通过盐析而得到的分子量为20000的蛋白质，可采用截留值为10000的透
析袋进行脱盐。
√
2、细胞膜主要由蛋白质和磷脂分子组成，缩短磷脂脂肪酸尾的链长可增加膜的
流动性。
√
3、对于肥胖或血脂偏高的人群，最好是食用低脂类食物，而且是越低越好。
×
4、动物和植物糖类代谢途径的主要区别是植物可将CO2固定为糖类，其他过程
则大同小异。
×
5、米氏常数通常只适用于单体酶所催化的酶反应。
×
6、蛋白质、脂类、糖类在分解代谢的第一阶段，均被分解为他们的前体成分。
×
7、蛋白质合成中，其氨基酸顺序是由氨基酸与mRNA摸板上的三核苷酸顺序
（密码子）之间的互补作用所决定的。
√
8、调节酶的Km值随着酶的浓度而变化。
×
9、氰化物中毒致死是由于它完全破坏了人体血细胞中血红素的携氧功能。
×
10、呼吸作用不只是在有氧分子存在时才能发生。
原核生物和真核生物细胞
内均存在呼吸链系统。
√
三、简答题
1、请举例简要说明蛋白质次级结构的形成主要由哪些因素决定。
（1）多数疏水基团躲开与溶剂接触驱动多肽链折叠（疏水作用力）
（2）要求折叠状态的多肽主链之间形成氢键以维持系统的能量平衡
（3）氨基酸的组成和排列顺序也对形成次级结构有一定的影响
2、有人认为RNA比DNA起源更古老，为什么？
答：作为生命物质基础的蛋白质是由mRNA翻译而来的，DNA必须先转录生成mRNA才能合成蛋白质，其自身不能合成蛋白质。
所以认为RNA
比DNA更古老。
3、为什么球状蛋白质在溶液中具有如下性质：
a、在低pH时沉淀？
在低pH时，引起蛋白质分子中的次级键被破坏，引起天然构象解体，发生沉淀。
B、当离子强度从零增至高值时，先市溶解度增加，然后降低，最后沉
淀？
离子强度低时，可使蛋白质表面吸附某些离子，导致其颗粒带同性电荷增加而互相排斥加强，并与水分子作用加强，故溶解度增
加。
离子强度升高时可使蛋白质脱水并中和其电荷，从而导致蛋白
质溶解度慢慢降低，最后从溶液中沉淀出来。
C、在一定离子强度下，如等电点时溶解度降低？
蛋白质在等电点时所带正负电荷数目相等，这使蛋白质失去胶体的稳定条件，颗粒之间易互相碰撞成较大颗粒，易发生浑浊或出
现沉淀，所以溶解度低。
4、简述TCA循环在生物代谢中的枢纽作用和意义。
枢纽作用：（1）糖代谢产生的丙酮酸可转化为乙酰CoA进入TCA循环；
（2）脂肪酸的氧化产物乙酰CoA也进入TCA循环；（3）蛋白
质代谢产生的各种氨基酸也能通过各种途径进入TCA循环；
（4）核酸或核苷酸的降解产物戊糖经糖代谢最后也进入TCA
循环；（5）TCA循环的许多中间代谢产物如α-酮戊二酸、琥
珀酸、草酰乙酸等能通过相应的途径生成糖、蛋白质、脂类和
核苷酸类物质。
意义：（1）为机体提供大量能量
（2）TCA是糖代谢、脂代谢、蛋白质代谢的联络的枢纽
5、为什么蛋白质在凝胶过滤中小分子比大分子容易滞留，移动较慢，而SDS-
聚丙酰胺凝胶电泳则是相反？
在凝胶过滤中小分子能不同程度地自由出入凝胶珠的内外，受到阻力大，而大分子不能进入，它在凝珠之间的孔隙向下移动，最先流出，所以小分子比大分子容易滞留，移动较慢。
而在SDS-聚丙酰胺凝胶电泳中，SDS与蛋白质结合，使不同蛋白质的SDS复合物具有相同的荷质比，并且具有相同的构象，所以电泳迁移率主要取决于它的分子量，小分子比大分子受的阻力小，跑的快。
四、实验题
1、凯（克）氏定氮这一经典方法仍然广泛的应用于生物制品食品化工和医药保
健等行业中蛋白质等含氮化合物的分析测试，请简述这一方法的基本原理和基本过程；若有一含氮量已准确知道的样品通过该方法检测，发现所得结果明显高于已知道，则可能是哪些实验环节出现问题？（老师，这道题我查了课本没查到，不会做，请老师帮解答一下）
2、请简述蛋白质氨基酸序列测定的一般过程。
（1）测定蛋白质分子中多肽链的数目（根据分子量和末端残基）
（2）拆开蛋白质分子的多肽链
（3）测定多肽链的氨基酸的组成
（4）分析多肽链的N末端和C末端残基
（5）断裂多肽链内的二硫键
（6）多肽链断裂成肽段
（7）测定各个肽段的氨基酸顺序
（8）确定肽段在多肽链中的次序
（9）确定原多肽链中二硫键的数目
五、综述题
描述DNA的双螺旋结构并分析说明这一结构所包含的重要生物学意义。
（1）两条反向平行的多核苷酸链绕同一中心轴相互缠绕，两条链均为右手螺旋
（2）嘌呤和嘧啶碱基位于双螺旋的内侧，磷酸和核糖通过磷酸二酯键相连接排列在外侧，两条链配对偏向一侧，形成一条大沟和一条小沟。
（3）双螺旋的平均直径为2nm，碱基堆基距离为0.34nm，两核苷酸之间的夹角为36度
（4）两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成氢键相联系而结合在一起且A 与T配对，C与G配对
（5）碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制，但当一条多核苷酸链的序列确定后即可决定另一条互补链的序列
生物学意义：（1）遗传信息由双螺旋结构中碱基的序列所携带
（2）碱基互补配对保证了遗传信息完整的从上一代传给下一代。