SephadexG-100 柱色谱精制，得两种均一性多糖。党 参总多糖加水溶解，Ba(OH)2 沉淀，沉淀物除尽 Ba2+， 再将沉淀物上 DEAE-纤维素(碱型)色谱柱，依次用水、
会引起某些多糖的降解。 以上方法均不适合糖肽，因糖肽也会象蛋白质那
不同浓度的 NaHCO3 溶液及 0.05mol/L 的 NaOH 溶液 洗脱，得四种单一多糖。
144
好，因其具有产物降解少且产量高等优点，如鹿茸中 酸性多糖的提取，采用木瓜酶消化方法[2]。将鹿茸渣 加木瓜酶及酶活化剂，在 60℃水浴中连续消化 24h， 取上清液进一步处理，加醇可得多糖。 1.2 植物多糖的提取
多糖可存在于植物的根、茎、叶、花、果及种子 中。大部分植物多糖不溶于冷水，在热水中呈粘液状， 遇乙醇能沉淀。这样从植物中分离、提取较为单一的 植物多糖并鉴定其纯度则极为困难。故提取时需注意 对一些含脂较高的根、茎、叶、花、果及种子类，在 用水提取前，应先脱脂，而对含色素较高的根，茎， 叶，果实类，需进行脱色处理。
3.2 凝胶柱色谱法
一般常用的有以下几种方法：
选葡聚糖凝胶(Sepharase)作吸附剂，以不同浓度
Sevage 法[4]：根据蛋白质在氯仿等有机溶剂中变
的盐溶液和缓冲液作洗脱剂，使各种多糖得以分离纯
性的特点，用氯仿：戊醇(或正丁醇)5：1 或 4：1，混 化。日本学者用 Sepharose6B、Sephacryls-200 和 S-500、
合物剧烈振摇 20 到 30 分钟，蛋白质与氯仿-戊醇(或 DEAE-Tayopearl650M 等色谱柱对人参粗多糖进行反
正丁醇)生成凝胶物而分离，离心，分去水层和溶剂层 复分离纯化，并经透析和 Sephadex-G10 处理，最后分
交界处的变性蛋白质。此种方法在避免降解上有较好 出 21 种均一性多糖。但此方法不适宜粘多糖的分离。
氨水(或 NaOH 溶液)调至 pH8.0 左右，50℃以下滴加
2 张红岩, 吕琳. 鹿茸酸性多糖的含量测定研究[J]. 中成
H2O2 至浅黄色，保温 2 小时；发酵来源的多糖颜色一 般较浅；对于动物，微生物等提取到的多糖也可根据
药,1988.10:34 3 徐梓辉,周世文.植物多糖及其降血糖作用的研究进展.华
通过逆向流水透析除去低聚糖等小分子杂质，这
5 张翼伸.多糖的结构测定.生物化学与生物物理进
样得到的就是多糖的半精品。
展,1983(5):18～23
3 多糖的纯化
6 方积年.多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定.药学 通报,1984,19(10):46～49
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Abstract: The extraction methods of polysaccharide from animals, plants and fungus were introduced in this paper. According to the impurities of every kind of polysaccharide, different ways of removal of those impurities adopted to gain purified polysaccharide were discussed.
各类真菌中所含多糖类化合物，其提取分离方法
《广州食品工业科技》
Guangzhou Food Science and Technology
Vol.20 No.3(总 81)
亦利用水提醇沉，除去小分子杂质和蛋白质(Sevage
纯化是将多糖混合物分离为单一的多糖的过程，
法、三氟三氯乙烷法等)，即得多糖。如灵芝多糖、槐 纯化的方法主要有以下几种。
效果，但效率不高，如能配合加入一些蛋白质水解酶， 3.3 纤维素阴离子交换剂柱色谱法
再用 Sevage 法效果更佳。
最常见的交换剂为 DEAE-纤维素(硼酸型或碱型)
三氟三氯乙烷法[5]：多糖溶液与三氟三氯乙烷等
洗脱剂可用不同浓度的碱溶液、硼砂溶液、盐溶液等。
体积混合，低温下搅拌 10min 左右，离心得上层水层， 此法目前最为常用，它一方面可纯化多糖，另一方面
不同情况按上述方法处理。一般情况下， 尽量避免用
西药学杂志,2001,16(5):365~366
活性炭处理，因活性炭会吸附多糖，造成多糖损失。
4 Franz G. Polysaccharides in Pharmacy: Current Applications
2.3 低聚糖等小分子杂质的去除
and Future Concepts[J]. Plant Medical, 1989, 55: 493-497
科学家曾采用经水或甲醇等有机溶剂的水溶液 浸泡，低温减压浓缩，流水透析，凝胶柱层析，冷冻 干燥等途径得到较单一的多糖成分，再经高效液相色 谱或凝胶层析测定其纯度、分子量，酸水解气-液相层 析或纸层析测定其单糖组成。如人参多糖(panaxans)， 苍术多糖(atractans)，乌头多糖(aconitans)，栝萎根多 糖(trichosans)，紫草多糖(lithospermans)等的提取[3]。 1.3 菌类多糖的提取
水层继续用上述方法处理几次，即得无蛋白质的多糖 还适于分离各种酸性多糖、中性多糖和粘多糖。太子
溶液，此法效率高，但溶剂沸点较低，易挥发，不宜 参粗多糖加水溶解，透析，然后进行 DEAE-纤维素柱
NaCl 水溶液梯度洗脱，再以
三氯醋酸法：在多糖水溶液中滴加 5%-30%三氯 醋酸，直至溶液不再继续混浊为止，在 5～10℃放置 过夜，离心除去沉淀即得无蛋白质的多糖溶液。此法
1 多糖的提取
1.1 动物多糖的提取 尽管多糖的种类繁多，但其提取分离的方法基本
相同。动物中所含多糖多是酸性多糖，主要存在于动 物的结缔组织中，常与蛋白质牢固地结合在一起，因 此目前常用如下三种方法提取分离，即碱溶液提取法、 中性盐溶液提取法和蛋白酶水解法。其中以酶解法较
收稿日期:2004-4-26
耳多糖、安络小皮伞多糖等。
3.1 沉淀法[6]
2 多糖的分离
包括分部沉淀法、盐析法、金属络合物法和季铵 盐沉淀法。如安络小皮伞粗多糖的纯化方式，将小皮
粗多糖中往往混杂着蛋白质、色素、低聚糖等杂 伞粗多糖水溶液加斐林试剂，同时使溶液达到不同的
质，必须分别除去。
乙醇浓度，可得多个多糖。
2.1 蛋白质的去除
Key words: polysaccharide; extraction; separation; purification
多糖(polysaccharides,PS)又称多聚糖。其存在于动 物、高等植物、微生物(细菌和真菌)及海藻等机体中。 多糖具有复杂、多方面的生物活性和功能,可作为广谱 免疫促进剂，具有免疫调节功能，如多糖能治疗风湿 病、慢性病毒性肝炎、癌症等免疫系统疾病，甚至能 抗 AIDS 病毒[1]；还具有抗感染、抗放射、抗凝血、 降血糖、降血脂作用；促进核酸与蛋白质的生物合成 作用；能控制细胞分裂和分化，调节细胞的生长与衰 老，而且多糖作为药物其毒性极小，因而多糖的研究 已引起人们的极大兴趣。尽管我国对多糖的研究起步 较晚，但近十几年来的工作取得了较大的进展，愈来 愈多的多糖被发现，并证实它们具有广泛的生物活性。
摘 要：介绍了动物，植物和菌类多糖的提取方法，并针对粗多糖中所含的杂质不同，采用不同的方法加以去除，以达到多糖与 杂质的分离。
关键词：多糖；提取；分离；纯化
Extraction and Separation of Polysaccharide
Ye Kaizhen, Li Bina, Wang Kuilan, Tan Zhiwei (Faculty of Chemical Engineering and Light Industry GDUT., Guangzhou 510090)
《广州食品工业科技》
Guangzhou Food Science and Technology
中图分类号：TS23；文献标识码：A；文章篇号:1007-2764(2004)03-00144-055
多糖的提取、分离与纯化
Vol.20 No.3(总 81)
叶凯贞 黎碧娜 王奎兰 谭志伟 (广东工业大学轻工化工学院，广州 510090)
深，这类色素大多呈负性离子，不能用活性炭吸收剂 脱色，可用弱碱性树脂 DEAE 纤维素或 Duolite A-7
参考文献
来吸附色素；若糖与色素结合，易被 DEAE 纤维素吸
1 陈家童等.红藻多糖抗 AIDS 病毒作用的体外实验研究.南
附，不能被水洗脱，这类色素可进行氧化脱色：以浓
开大学学报(自然科学),1998.31(4):21～24
样沉淀出来。对于对碱稳定的糖蛋白，在硼氢化钾存
纯化除采用上述方法外，还有超过滤法、制备性
在下，用稀碱温和处理，可以把这种结合蛋白质分开。 区域电泳、活性碳柱色谱等等。另据报道，国外多采
2.2 色素的去除
用 LKB 柱色谱系统，用比旋度、示差折射及紫外检
植物来源的多糖，可能含有酚型化合物而颜色较 测多糖，各组分的峰位自动记录，分离效果高且方便。