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第五章细胞因子


根据抗原的性质、出现结果的现象、
参与反应的成分不同,可将抗原抗体反应
分为下列几类:
(一)凝集反应(agglutination) P381
细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应 抗体结合后,在适宜电解质下形成肉眼可 见凝集物的反应。
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1. 直接凝集:玻片和试管凝集

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免疫荧光标记技术

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1 免疫荧光法
可对标本中的抗原进行鉴定和定位。常 用的荧光素有异硫氰酸荧光素(FITC)和藻 红蛋白(PE),前者发黄绿色荧光,后者发 红色荧光。
用途:可用于检查细菌、病毒、螺旋体等的 抗原或抗体,帮助诊断传染病;也可用于鉴 定免疫细胞的CD分子,检测AID的抗核抗体 等。
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4 免疫电泳 (immunoelectrophoresis)
也是将电泳技术与双向免疫扩散结合的 一种技术,先电泳后双向免疫扩散(见图) 。
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5 免疫比浊 (immunoephelometry) 在一定量抗体中分别加入递增量
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(1)直接法:缺点是每检查一种抗原必须制 备相应的荧光抗体。
(2)间接法:敏感性比直接法高,制备一种 荧光二抗可用于多种抗原的检查,但非特 异性增多。
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3 抗血清: 4 一抗: 5 二抗:
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(二)抗原抗体反应的可见性:
抗原、抗体比例适合时,在适宜的盐浓度下 可形成肉眼可见的反应物(凝集物或沉淀物)。
(三)抗原抗体反应的可逆性:
抗原抗体之间的结合主要是分子表面的非共 价键结合,稳定,但在适当条件(如低pH、高浓 度盐、冻融等)下可解离开,各自的生物学特性 不发生改变。根据此特点,可利用亲合层析法纯 化抗原或抗体。

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3 酸碱度:最适pH6~8,否则可出现假阴 或假阳性结果
4 抗原和抗体性质:抗体的特异性和亲和力 是关键,初次应答抗体亲和力低,单克隆 抗体亲和力低;抗原理化性质、抗原表位 多寡等。
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二 抗原或抗体的检测方法

(3)操作:铺板 打孔 放湿盒 看结果 。
加样
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3 对流免疫电泳试验 (补充介绍) 其实质是将双扩与电泳相结合。
(1)特点:定性试验
(2)用途:主要用于病原微生物抗原的 定性检测。
(3)操作:铺板 打孔 电泳 看结果 。
加样
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(五)影响抗原抗体反应的因素:P379
1 温度:适当的温度可增加抗原与抗体分 子碰撞的机会, 加快二者结合速度。不 宜过高过低。
2 电解质:可使IC复合物失去电荷而凝聚, 出现可见反应。常用生理盐水稀释抗原或 抗体。
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第二十四章 免疫学诊断

免疫学诊断即用免疫学方法确定疾病相关
因子、监测疾病过程、判断疗效及预后,涉及
对疾病相关因子的诊断和辅助诊断,以及检测
机体免疫功能状态。
第一节 抗原或抗体的检测
抗原抗体反应原理:抗原的抗原决定基与 抗体的结合部位之间的结构应具有互补性,二 者相互结合后,在适宜条件下,可出现可见反 应。
血清蛋白质、细菌裂解液或组织浸液等可溶性抗
原与相应抗体结合后,在有电解质存在时,出现肉眼可 见的沉淀物的反应。
1 单向免疫扩散 (single immunodiffusion) (1)特点:定性定量试验 (2)用途:可用于测定血清IgG,IgM,IgA和C3等的含量 (3)原理:沉淀环的直径与抗原含量呈正相关。
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第二十五章

教 学 要 求:
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1 掌握凝集反应、沉淀反应的定义及其基 本类型。
2 掌握间接免疫荧光法和ELISA的双抗夹 心法及间接法的基本操作步骤。
3 熟悉检测体液免疫和细胞免疫的常用试 验方法。
4 了解免疫学检测方法的应用。
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• 一、抗原抗体反应的特点
(一)抗原抗体反应的特异性
指一种抗原只能与由它刺激所产生的抗体 结合的专一性。它是免疫学诊断的重要基础。
1 亲和力(affinity):抗体分子上一个抗原结合部 位与相应的抗原决定基之间的结合强度。
2 亲合力(avidity):一个抗体分子与整个抗原之间 的结合强度。
(4)操作:铺板 打孔 加样 放湿盒 看结果。
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2 双向免疫扩散(double immunodiffusion)
(1)特点:定性半定量
(2)用途:用于抗原或抗体的定性检测、 组成和多抗原相 关性分析。
的抗原,经一定时间形成IC,液体浑浊, 用浊度计测反应体系的浊度,据标准曲 线推算样品中抗原含量。
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(四)免疫标记技术 P381 用荧光素、酶、放射性核素等标记抗
原或抗体后进行抗原抗体反应。提高检测灵 敏度、快速、可定性、定量,定位等。
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2 间接凝集: 正相间接凝集和反向间接 凝集。
补充介绍:
3. 协同凝集:以SPA为载体的反向间接 凝集。在微生物检测中常用。
4. 间接凝集抑制试验:
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抗原或抗体的检测方法

• (二)沉淀反应(precipitation): p380
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