新辅助化疗对三阴性乳腺癌Ki67的影响
张蓉曹茵张爱玲黄河清钟慕仪王西跃
(东莞市人民医院乳腺科广东东莞523018)
【摘要】目的：探讨新辅助化疗对三阴性乳腺癌Ki67的影响。

方法：对87例实施TAC方案新辅助化疗的三阴性乳腺癌病例进行回顾性分析，应用免疫组化法检测化疗前后Ki67表达，分析Ki67表达与疗效关系。

结果：Ki67高表达组新辅助化疗后临床部分缓解率更高，且新辅助化疗前后Ki67表达变化有统计学意义。

结论：新辅助化疗降低了三阴性乳腺癌Ki67增殖指数,Ki67高表达可以作为化疗敏感性指标。

关键词：三阴性乳腺癌,Ki67,新辅助化疗.
三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer，TNBC)是指雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及人类表皮生长因子受体2(HER-2)均为阴性的乳腺癌，其预后差、复发转移率高，是近几年研究和关注的焦点。

新辅助化疗在提高保乳及可手术率、评价化疗方案敏感性、抑制全身微转移灶等方面显示出明显的优势。

本研究探讨新辅助化疗对三阴性乳腺癌Ki67表达的影响。

1.资料与方法
1.1 一般资料：选取东莞市人民医院2008年7月至2013年7月期间经新辅助化疗并行改良根治术或乳腺癌保乳术的三阴性乳腺癌87例进行回顾性分析。

患者均为女性，年龄31-68岁，中位年龄48岁。

绝经前52例，绝经后35例。

浸润性导管癌85例，浸润性小叶癌2例。

均为单侧、初治乳腺癌。

根据AJCC临床分期：Ⅱ期57例，Ⅲ期30例。

所有病例化疗前均经过16G巴德活检枪穿刺活检或麦默通乳腺微创旋切活检，活检病理均证实为乳腺癌，并经免疫组化法检测ER、RP、HER-2、Ki67的表达情况。

术后大体标本再次免疫组化法检测ER、RP、HER-2、Ki67的表达情况。

KPS评分90-100分。

1.2治疗方法：所有患者术前接受TAC方案（多西他赛75mg/m2，吡柔比星45mg/m2，环磷酰胺600mg/m2）2到4个疗程化疗。

两个疗程化疗后，根据疗效评估，肿瘤大小无变化的，予改良根治术治疗，术后更改化疗方案。

两疗程化疗后，肿瘤缩小，则继续原方案化疗，四个疗程后予以改良根治性术或乳腺癌保乳术。

新辅助化疗后13例行乳腺癌保乳手术，74例行改良根治术。

手术治疗后继续化疗，总疗程6个疗程。

根据患者病情必要时给予术后辅助放疗。

1.3疗效评价方法：每一疗程化疗前均通过常规体检和乳腺彩色B超来明确乳腺内肿块的大小。

新辅助化疗的疗效采用RECIST1.1标准评估疗效。

完全缓解（CR）：所有靶病灶消失，全部病理淋巴结短直径减少至＜10mm；部分缓解（PR）：靶病灶直径之和减少≥30%；疾病进展（PD）：靶病灶直径之和增加≥20%或出现新病灶；疾病稳定（SD）：靶病灶长径之和缩小但未达PR或增加但未达PD。

根据术后病理评价病理缓解的情况。

病理完全缓解（PCR）的定义：乳腺原发灶中找不到恶性肿瘤的组织学证据，或仅存原位癌成分。

1.4免疫组化测定方法：采用SP法检测ER、PR、HER-2和Ki67在乳腺癌组织中的表达水平。

ER、PR的判断标准：阳性细胞核＜10%为阴性、≥10%为阳性。

HER-2的判断标准：细胞膜或胞质出现棕黄色颗粒为阳性反应，阳性细胞＜10%为阴性、10%-20%为（+）、21-50%为（++）、＞50%为（+++）。

Ki67的判断标准：细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性反应，高倍镜下共计数1000个细胞，其中阳性细胞数所
占比例≥10%为(+)，<10%为(-)。

1.5统计学方法：采用SPSS13.0统计软件进行统计分析，组间比较采用配对t检验及χ2检验，P＜0.05具有统计学差异。

2.结果
2.1新辅助化疗的临床疗效：87例Ⅱ/Ⅲ期乳腺癌病例经TAC方案化疗2-4个疗程后，43例达到临床部分缓解，总有效率为49．2％(43/87)，均无完全临床缓解。

无进展病例。

其中Ki67高表达组（≥30％）58例，其中37例达临床部分缓解，有效率达6
3.7%（37/58）。

Ki67低表达组（<30％）29例，其中6例达临床部分缓解，有效率20.6%，差异有统计学意义。

2.2 新辅助化疗前后乳腺癌组织Ki67的变化：在临床上，当免疫组化指标Ki67 ≥30％时表示为高表达，而<30％时表示为低表达，此情况对于乳腺癌临床治疗方案具有指导意义。

Ki67在87例患者中有49例在化疗前后有变化，有48例由化疗前的高表达变为化疗后的低表达，有1例患者从化疗低表达变为高表达(P<0．01)。

Ki67化疗前标记指数最高为80％，最低为10％，化疗后标记指数最高为50％，最低为5％，化疗前后Ki-67指数的变化有统计学意义。

所以我们认为新辅助化疗影响Ki-67的表达。

3.讨论
新辅助化疗越来越多地应用于临床，其目的是使肿块缩小，提高手术切除率和有利于保乳手术以改善生活质量，同时还可能减少转移灶的发生，但是否可提高病人的长期生存率仍有待进一步研究及长期随访。

本研究采用TAC方案化疗2-4个疗程，部分缓解率为49.2%，提示其有一定的作用。

本组病例新辅助化疗的疗程为2-4次，且化疗结束后即行手术治疗，这可能是造成了病例中无完全缓解病例资料。

Gerdes在1991年首先将Ki67作为非组蛋白的核蛋白质从细胞中鉴定出来[1]。

Ki67是一种与细胞有丝分裂密切相关，能反映细胞增殖状态的核抗原，与肿瘤的发生、浸润、种植与转移过程相关。

它存在于细胞周期G1后期、S、G2和M期, 而在G0期细胞不表达。

Ki67阳性表达率高, 反映肿瘤细胞增殖活性强, 恶性程度高, 患者预后差。

文献报道经新辅助化疗后Ki67的表达下降与瘤体缩小及周期中癌细胞的数量减少有关，其在残留癌细胞中的表达下降情况对无病生存率是一个较好的预见指标[2]。

本研究显示, 三阴性乳腺癌新辅助化疗后Ki67增殖指数显著降低,提示新辅助化疗已经降低了肿瘤细胞的增殖状况，这与叶国麟[3]等的研究一致。

且Ki67高表达者新辅助化疗后临床部分缓解率高于低表达者，差异有统计学意义，提示Ki67高表达可以作为化疗敏感性指标。

这与张红蕾[4]等的研究一致。

当然，影响NAC前后这些生物学标志物改变的因素有很多，比如样本的选择，穿刺病理的取材，肿瘤组织不同部位的生物学差异，免疫组化的技术，实验者的主观因素等等。

且本研究为回顾性分析，样本量相对较小，肿瘤的异源性等因素，本研究的结论可能还存在一定的片面性，有待进一步的研究。

【参考文献】
[1] Geldes J，Li L，Schlueter C，et al.Immunobiochemical and molecular biologic characterization of the cell proliferation associated nuclear antigen that is defined by monoclonal antibody Ki67[J].Am Pathol,1991,138(4):867-873.
[2] BOTTINI A，BERRUTI A，BERSIGA A，et a1．Relationship between tumour shrinkage and reduction in Ki67 expression after primary chemotherapy in human breast
cancer[J]．Br J Cancer ，200l，85(8)：llO6一lll2．
[3] 叶国麟，杨劼，古卫权，等。

Ki67表达对“三阴性”乳腺癌新辅助化疗疗效影响[J]．河北医学，2013，19(6)：832-834.
[4] 张红蕾，章来长，刘冲，等。

乳腺癌新辅助化疗对雌激素受体孕激素受体人表皮生长因子受体和Ki67抗原标记指数表达的影响及意义[J]．中国临床肿瘤与康复，2013，20(2)：110-112.。