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实验五线粒体和液泡系的超活染色与观察


四、实验方法
(一) 线粒体的超活染色与观察
• 洋葱鳞茎内表皮细胞线粒体的超活染色与观察 • 1/5000詹纳斯绿B溶液1-2滴,洋葱鳞茎内表皮,载玻片
于37℃恒温水浴染色10-15min,显微镜下观察.
(二) 小麦幼根根尖液泡系的中性红染色观察
• 初生小麦幼苗根尖(1-2cm)纵切面切片,1/3000中 性红溶液1滴染色5-10min,载玻片于37℃恒温水浴,盖 上盖玻片压扁根尖,显微镜下观察.
三、实验用品
1. 器材: 显微镜、恒温水浴锅、、剪刀、镊子、解剖 刀、 载玻片、盖玻片、吸管、牙签、吸水纸
2. 试剂: Ringer液、1/5000詹纳斯绿B、1/3000中性红
3. 材料:洋葱鳞茎内表皮细胞、小麦幼根根尖
称取50mg詹纳斯绿B溶于5mL Ringer溶液中,稍加微热 (30~40℃),使之溶解,用滤纸过滤后,即为1%原液。取1%原 液l mL加入49mL Ringer溶液,即成1/5000工作液装入瓶中备用。 最好现用现配,以保持它的充分氧化能力。
实验五线因为它具有溶解在类脂质 (如卵磷脂、胆固醇等)的特性,易于被细胞吸收。 • 詹纳斯绿 (Janus green B)和中性红 (neutral red)是常用的
碱性染料。 • 詹纳斯绿B可专一性地对对线粒体进行活染,这是由于线
粒体内的细胞色素氧化酶系的作用,使染料始终保持氧化 状态 (即有色状态), 呈蓝绿色。 • 中性红对液泡系的染色具有专一性,将活细胞中的液泡系 染成红色。
五、作业
绘出你所观察到的液泡及线粒体并简要分析
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