LSD
3
1.5
8.1333(*)
.88778
.000
6.3417
9.9249
1
12.4667(*)
.88778
.000
10.6751
14.2583
1.5
3
-8.1333(*)
.88778
.000
-9.9249
-6.3417
1
4.3333(*)
.88778
.000
2.5417
6.1249
1
3
-12.4667(*)
H1：对二苯酚的三中浓度对老鼠细胞为核数影响不显著.
(2)确定显著水平α=0.05,
(3)数据处理
从表中可看出P<<0.01，所以差异极显著；即接受原假设Ho,但是不可以看出那一个的浓度对微核数的影响最大。需要进行多重比较：
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable:微核数
120
523
35.0880
Sig.
1.000
1.000
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a Uses Harmonic Mean Sample Size = 427.667.
b The group sizes are unequal. The harmonic mean of the group sizes is used. Type I error levels areguaranteed
选择细胞完整、分散均匀，着色适当的区域，在油镜下观察。以有核细胞形态完好作为判断制片优劣的标准。
本法系观察嗜多染红细胞的微核。用Giemsa染色法，嗜多染红细胞呈灰蓝色，成熟红细胞呈粉红色。典型的微核多为单个的、圆形、边缘光滑整齐，嗜色性与核质一致，呈紫红色或蓝紫色，直径通常为红细胞的1/20～1/5。每只动物计数1000个嗜多染红细胞，观察含有微核的嗜多染红细胞数，微核率以千分率表示。
Multiple Comparisons
Dependent Variable:微核数
(I)剂量
(J)剂量
Mean Difference (I-J)
Std. Error
Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound
Upper Bound
LSD
3ml
2ml
3.6000(*)
.88778
.000
-14.2583
-10.6751
1.5
-4.3333(*)
.88778
.000
-6.1249
-2.5417
* The mean difference is significant at the .05 level.
Homogeneous Subsets
微核数
剂量
N
Subset for alpha = .05
①用断颈法处死小鼠。用剪刀剪开腿部的皮肤，用镊子夹住小鼠的股骨，剪去股骨周围的肌肉，将小鼠的两股骨取出，擦净股骨上的肌肉。去股骨的髋面，将吸有0.85% Nacl生理等渗液小注射器的针头插入，反复几次吹出骨髓细胞。反复吹打使其混合均匀，制成细胞悬液。②将细胞悬液在1000转/分离心5分钟，弃除上清液。
1
2
3
Duncan(a)
1
15
21.7333
1.5
15
26.0667
3
15
34.2000
Sig.
1.000
1.000
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a Uses Harmonic Mean Sample Size = 15.000.
（2）涂片
在离心管中加入少量的小牛血清（约0.3ml)混匀后，按血常规涂片法涂片，长度约2cm ~3cm (涂片时一次涂成）。在空气中晾干。
（3）固定
将干燥的涂片放入甲醇液中固定5min。即使当日不染色，也应固定后保存。
4）染色
将固定过的涂片放入Giemsa应用液中，染色20min ~30min，然后立即用0.1mol/L磷酸盐缓冲液冲洗。
（4）Giemsa应用液
取2ml Giemsa染液与40ml 0.1mol/L磷酸盐缓冲液混合而成。临用现配。
实验动物：
小鼠是微核试验的常规动物。体重为25g ~35g。也可选用成年大鼠，体取受试物一般至少设3个剂量。每个剂量组5只动物。另外，还应设溶剂对照和阳性物对照组。常用环磷酰胺作为阳性物对照，剂量可为40mg/kg体重。
对二苯酚：
ANOVA
微核数
Sum of Squares
df
Mean Square
F
Sig.
Between Gr
ups
26732.836
2
13366.418
2068.325
.000
Within Groups
8485.179
1313
6.462
Total
35218.015
1315
(1)假设：Ho:对二苯酚的三种浓度对老鼠细胞微核数影响显著。
101.650
.000
Within Groups
248.267
42
5.911
Total
1450.000
44
（1）假设：Ho秋水仙素的三种浓度对老鼠细胞微核数影响显著.
H1秋水仙素的三中浓度对老鼠细胞微核数影响不显著
（2）确定显著水平α=0.05
（3）假设检验
（4）自由度（2,44）0.05。F=3.12。假设检验F=101.650>3.12且P<0.05
.000
-9.2614
-5.5386
2ml
-3.8000(*)
.92238
.000
-5.6614
-1.9386
* The mean difference is significant at the .05 level.
Homogeneous Subsets
数据处理：
利用统计学软件SPSS的单因素方差分析或t检验等方法，进行数据处理，分析实验结果。
5．实验结果处理：
2）利用统计学软件SPSS做单因素方差分析或T检验等方法进行数据处理，并分析实验结果：
2．对实验现象、实验结果的分析及其结论：
由于这次试验涉及到两个变量，只能用方差分析，应用最显著差数（LSD法）和Duncan法分别对三种受试物：（对二苯酚，秋水仙素，氯化汞）的三种不同浓度进行检验。其结果如下：
（5）封片
用滤纸及时擦干染片背面的水滴，再用双层滤纸轻轻按压染片，以吸附染片上残留的水分，再在空气中晃动数次，以促其尽快晾干，然后放入二甲苯中透明5min，取出滴上适量光学树脂胶，盖上盖玻片，写好标签。
观察与计数
先用低倍镜，后用高倍镜粗略检查，选择细胞分布均匀，细胞无损，着色适当的区域，再在油浸镜下计数。虽然不计数含微核的有核细胞，但需用有核细胞形态染色完好做好判断制片优劣的标准。
（3）0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH6.8）
成分：磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）71.64g/L
磷酸二氢钠（NaH2PO4·2H2PO4）31.21g/L
分别加蒸馏水1000mL配成A、B液；取A液51ml,B液49ml混合，再加入100ml蒸馏水混匀，即为pH6.8的0.1mol/L磷酸缓冲液。
试剂及配制：
（1）小牛血清（灭活）
将滤菌的小牛血清置于56℃恒温水浴保温30min灭活。灭活的小牛血清通常保存于冰箱冷冻室里。
（2）姬姆萨（Giemsa）染液
成分：Giemsa染料3.8g、甲醇375mL、
甘油125mL。
配制：将染料和少量甲醇于乳钵里仔细研磨，再加入甲醇至375mL和甘油，混合均匀，放置37℃恒温箱中保温48h。保温期间，振摇数次，促使染料的充分溶解，取出过滤，两周后用。
-5.8363
-5.1238
* The mean difference is significant at the .05 level.
Homogeneous Subsets
微核数
剂量
N
Subset for alpha = .05
1
2
3
Duncan(a,b)
40
354
23.9209
80
439
29.4009
10.8238
11.5103
80
120
-5.6870(*)
.16455
.000
-6.0099
-5.3642
40
5.4800(*)
.18159
.000
5.1238
5.8363
40
120
-11.1671(*)
.17496
.000
-11.5103
-10.8238
80
-5.4800(*)
.18159
.000
(I)剂量
(J)剂量
Mean Difference (I-J)
Std. Error
Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound
Upper Bound
LSD
120
80
5.6870(*)
.16455
.000
5.3642
6.0099
40
11.1671(*)
.17496
.00
实验时间