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血细胞形态学


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4.电镜检查: 有透射和扫描电镜两种,它的出现和应用对细胞学的进展
是一个重大的突破。透射电镜的分解力可达到2-3埃左右,把 细胞放大到几十万倍,能观察到一般电镜中无法观察到的细胞 内超微结构。
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瑞氏染色法(Wrights Stain): 细胞染色机制:染色是将细胞经染色剂的物理和化学作用,
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(三)瑞氏染液配制:
1.瑞氏染液配制:
瑞氏染料
830mg或1g
甲醇(AR)
500ml或600ml
瑞氏染料放置乳钵内,用乳棒轻轻敲碎染料成粉末,加少许甘油或甲
醇溶解研磨,在加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮,静置片刻,将上层液体
倒入一清洁储存瓶内,再加甲醇研磨,重复数次,直至乳钵内染料及甲醇
(2)甲醇具有强大的脱水力,可将细胞固定在一定形态及 增加细胞结构的表面积,提高细胞对染料的吸收作用,同时由 于甲醇吸附染色液中的水,使染色液升温,加速染色反应。
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3.缓冲液作用:染色对氢离子浓度是十分敏感的,据观察PH的 改变,可使蛋白质与染料形成的化合物重新离解。缓冲液须保 持一定的PH使染色稳定,PBS的PH一般在6.4-6.8,偏碱性染 料可与缓冲液中酸基起中和作用,偏酸性染料可与缓冲液中的 碱基起中和作用,使PH恒定。
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你怎么称呼老师?
如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你 是否会认为老师的教学方法需要改进? 你所经历的课堂,是讲座式还是讨论式? 教师的教鞭
“不怕太阳晒,也不怕那风雨狂,只怕先生骂我 笨,没有学问无颜见爹娘 ……” “太阳当空照,花儿对我笑,小鸟说早早早……”
血细胞形态学基本概念及临床应用: 血细胞形态学:观察血细胞形态和数量及其比例的变化来
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基本概念 1.瑞氏染料是碱性染料美蓝和酸性染料伊红合称伊红美蓝
染料即瑞氏染料。 伊红钠盐的有色部分为阴离子,无色部分为阳离子,其有
色部分为酸色,故称伊红为酸性染料。美蓝的中间产物结晶为 三氯化镁复盐,有色部分为阳离子,无色部分为阴离子,恰与 伊红钠盐相反。
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2.用甲醇作瑞氏染料溶剂,即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染
料良好溶剂,有两种作用 (1)甲醇使瑞氏染料中美蓝(M)与伊红(E)在溶液中
离解,可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着色。 甲醇
ME(瑞氏染料)──→M+ + E在配置的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天
青,美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色,但不能使胞浆 染成蓝色,多余美蓝就可以使胞浆染成蓝色,染色主要是化学 作用,是离子彼此结合的反应。
研究造血器官的结构和功能是血液学的重要组成部分,是很早 就开展的一门学科,是诊断造血系统疾病最基本、最简便实用 的检查方法之一,被临床普遍应用。
正常人的血液及造血器官中,各种血细胞的数量有一定的 正常范围,不同血细胞及细胞发育的不同阶段有一定形态结构 特点。在造血系统疾病中,如果造血功能发生紊乱,就会从血 细胞形态学的量变和质变中反映出来,因此,可将形态学变化 作为血液病的诊断依据。
(1)研究血细胞化学成分及代谢功能; (2)协助血液病的诊断与鉴别诊断,尤其是急性白血病 分型及鉴别诊断; (3)观察血液病的疗效及判断预后; (4)探索血液病的发病机制。
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3.相差镜检查: 用于观察未染色细胞的内部结构及活细胞的活动及形态,
并结合细胞培养,观察细胞的生长、成熟、衰亡过程及对各种 刺激的反应,可采用显微镜摄影术或显微电影将活细胞活动拍 摄和记录下来。
使其清楚显示细胞各个组成成分,有利辨识细胞形态。 染色可分两个步骤: 1.染料受相应物质吸附而附着于物质表面; 2.固着作用,即染色粒子进入细胞内起化学反应(染色透
过细胞膜的学说很多,尚无定论),与相应的物质形成溶解度 很低的盐固着于细胞内而显色。染色剂皆有选择作用,其染色 不是将细胞全部一齐着色,而只是将其中一部分染色,多余的 被冲洗掉。目前多以吸附学说(电力吸附、机械吸附、化学吸 附)来解释。
概述: 血细胞及血细胞形态学是临床血液病诊断与治疗及临床医学
检验学的基础工作。血细胞形态学适用于临床血液病诊断快速 简捷的要求。近年来由于血细胞学及超微结构、免疫学、细胞 遗传学 、融合基因、造血干细胞及其细胞因子、骨髓造血微环
境、基质细胞、树突状细胞、淋巴系细胞发生及其疾病表现, 细胞增殖动力学与细胞凋亡以及骨髓组织病理学应用,推动了 血液的临床与实验室的新知识迅猛发展,因而当前血液病不能 单凭临床与形态学作出诊断,必须以临床和血细胞形态学为基 础,把免疫学、细胞遗传学及分子生物学新知识、新技术应用 到血液学中,构成现代临床血液学与分子生物学诊断技术,弥 补形态学的经验性与主观性带来负面缺陷,才能提高血液病的 诊断与治疗水平。
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几种血细胞形态学的检查方法:
1.光镜(瑞氏-姬姆萨染色)是血细胞形态学最基本和最常用的 检查方法,被看成是血细胞形态学的基本内容,最广泛应用于 临床实验室。
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2.细胞化学染色: 是细胞学和化学两者结合的形态学方法,其目的和特点是
细胞保持完整组织结构。在细胞个体组织的单位上,显示化学 结构成分的定性或半定量匀,密封瓶口,存室温暗处,储存愈久,则染料溶解、分解
愈好,一般储存3个月以上。
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2.缓冲夜配制(PH6.4-6.8,弱酸性):
配方1 (贮存液)
配方2
1%KH2PO4 30ml
M/15 KH2PO4
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进入90年代以来,国内外采用多学科联合技术综合诊断如 AL-MIC分(类)型,FAB-CLL诊断分(类)型方案、MIC对 MDS诊断要求,已被广泛采用或正趋于完善。
近年来,血细胞形态学诊断技术正在进入显微图像、血液 病诊断与鉴别诊断、CL诊断与治疗及教学系统多媒体软件等。 还将显微镜与微机相连,应用存储、分类、检索软件、编辑、 打印诊断报告,并可附多幅细胞图像。从软件水平看,国内几 家此类产品尚属探索性,尚不成熟,各有优缺点,有待软件专 业与应用专业人员密切合作,生产出高质量产品。
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