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MTT法检测细胞活力

MTT法是一种常用的检测细胞活力的方法,其原理基于四唑盐(噻唑蓝)的还原反应。活细胞的线粒体中的琥珀脱氢酶具有还原外源性MTT的能力,将其转化为难溶性的蓝紫色结晶物并沉积于细胞中。这种结晶物可通过二甲基亚砜(DMSO)溶解,并利用酶联免疫检测仪在特定波长下测定其光吸收值,从而间接反映出活细胞的数量及细胞的增殖情况。实验过程中,首先需将细胞接种于培养板中,并在适宜条件下培养至细胞单层铺满孔底。随后加入MTT溶液继续培养,使MTT与活细胞反应形成结物。终止培养后,吸去培养液,加入DMSO溶解结晶物,并测量各孔的光吸收值。通过比较实验组与对照组的光吸收值,可计算出细胞的抑制率,进而评估药物或其他因素对细胞活性的影响。此外,实验过程中需注意选择适当的细胞接种浓度、设立空白对照,并确保MTT的配制与保存条件符合要求,以保证实验结果的准确性。
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