第三节 紫外-可见分光光度计
三、紫外-可见分光光度计的类型 1.可见分光光度计
722型
第三节 紫外-可见分光光度计
三、紫外-可见分光光度计的类型 2.紫外-可见分光光度计
（1）单波长分光光度计 单光束分光光度计 双光束分光光度计
第三节 紫外-可见分光光度计
A（a+b+c）＝Aa＋Ab＋Ac
第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理
二、吸光系数 摩尔吸光系数：在入射光波长一定时，溶液浓度
为1 mol/L，液层厚度为1cm时所测得的吸光度称 为摩尔吸光系数，常用ε表示 。 光吸收系数 在入射光波长一定时，溶液浓度为 1g/L，液层厚度为1cm时的吸光度，称为光吸收系 数，常用表示，其量纲为L/(g·cm)。
用双硫腙测定Cd2+溶液的吸光度A时，Cd2+
（Cd的原子量为112）的浓度为140μg/L， 在λ＝525nm波长处，用L＝1cm的吸收池，
测得吸光度A＝0.220，试计算摩尔吸光系数
和百分吸收系数。
第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理
课堂互动
某有色溶液的物质的量浓度浓度为c，在一定条件下用 1cm比色杯测得吸光度为A，则摩尔吸光系数应为： A．cA B．cM C．A/C D．C/A
选择性。 2．吸光度与透光率的关系是 :
3．吸收曲线是溶液在一定条件下的吸光度随 入射光波长变化而变化的曲线。
第二节 紫第外二-可节见分紫光外光-度可法见的分基本光原光理度法的基本原理
一、光的吸收定律 当一束平行的单色光通过均匀、无散射的含有吸光性
物质的溶液时，在入射光的波长、强度及溶液的温度 等条件不变的情况下，该溶液的吸光度A与溶液的浓 度c及液层厚度L的乘积成正比，即： A＝K·L ·c 。 称为光的吸收定律（朗伯-比尔定律）。 光的吸收定律是定量分析的理论依据。
第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理
百分吸光系数：在入射光波长一定时，溶液浓度
为1 ﹪（W/V）、层厚度为1cm时所测得的吸光度
称为百分吸光系数，常用
E1% 1cm
表示。
二者的关系：


E1% 1cm
M 10
M,
Eபைடு நூலகம்% 1cm

10
第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理
课堂活动
第三节 紫外-可见分光光度计
二、紫外-可见分光光度计的光学性能
1．测光方式 3．狭缝或光谱带宽 5．波长准确度 7．波长重复性 9．光度重复性
2．波长范围 4．杂散光 6．吸光度范围 8．测光准确度 10．分辨率
第三节 紫外-可见分光光度计
三、紫外-可见分光光度计的类型 1.可见分光光度计 721型
第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理
三、偏离光的吸收定律的主要因素 化学因素:(1)溶液的浓度
(2)物质的化学变化 (3)溶剂的影响 光学因素:(1)非单色光 (2)杂散光 (3)非平行光 (4)反射现象 (5)散射现象
第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理
偏离光的吸收定律示意图
第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理
第一节 概述
课堂活动
3．紫外-可见分光光度法属于 A．原子发射光谱法 B．原子吸收光谱法 C．分子发射光谱法 D．分子吸收光谱法
4．分子吸收可见-紫外光后，可发生哪种类型的 分子能级跃迁 A．转动能级跃迁 B．振动能级跃迁 C．电子能级跃迁 D．以上都能发生
第一节 概述
点滴积累 1．光的本质是电磁波；物质对光的吸收具有
第一节 概述
一、物质对光的选择性吸收
单色光: 单一波长的光束 复合光: 含有多种波长的光束 电磁波谱: 以波长大小顺序排列的电磁波谱图
波长 10pm 300pm 200nm 400nm 800nm 500mm 1cm 1m
光谱 射线 X射线 紫外光 可见光 红外光 微波 无线电波
方法 光谱法
分光光度法 光谱法
绘的曲线，称为吸收光谱曲线，简称吸收光谱。 特点：在相同条件下，同一物质的不同浓度的溶
液，其吸收光谱曲线相似，且λmax相同。这是定 性分析的基础。
第一节 概述 A
max=515
480
520
560nm
吸收光谱曲线示意图
第一节 概述
四、紫外-可见分光光度的特点
特点
灵敏度高 准确度高 精密度好 选择性好 易于普及 应用广泛
仪器简单
操作简便
价格低廉
测定快速
第一节 概述
课堂活动
1．紫外-可见光的波长范围是
A．200~400nm
B．400~760nm
C．200~760nm
D．360~800nm
2．下列叙述错误的是
A．光的能量与其波长成反比
B．有色溶液越浓，对光的吸收也越强烈
C．物质对光的吸收有选择性
D．光的能量与其频率成反比
点滴积累
1．光的吸收定律表明了吸光度与液层厚度 和浓度之间的关系，它是吸收光谱法定量分析 的依据。
2．吸光系数的表示方法有多种，随待测溶 液浓度的不同标度而不同。
3．偏离光的吸收定律的因素主要有化学因 素和光学因素。
第三节紫外-可见分光光度计
一、紫外-可见分光光度计的主要部件： 光源—单色器—吸收池—检测器—讯号处理与显示器
可见光
核磁共振
第一节 概述
红光与绿光互补、紫光与黄光互补，等等。
白光的组成
白光的色散
第一节 概述
二、透光率与吸光度 I0＝Ia + It
第一节 概述
透射光强度It与入射光强度I0的比值称为透光率或透光度T 透光率的负对数为吸光度A
A lgT
第一节 概述
三、吸收光谱曲线 概念：以波长λ为横坐标，吸光度A为纵坐标所描
案例导入
在夏天参加户外活动时，如果天气晴朗，就应该注 意保护皮肤，否则，暴露在火辣辣太阳之下的皮肤， 数小时后就会出现红肿、瘙痒、发热、刺痛症状，数 日后出现蜕皮现象，这表明太阳光中有一种光线能伤 害生物细胞。科学家研究证实，这种光线是紫外线。
根据可见光、紫外光与物质分子的相互作用建立了 紫外-可见分光光度法，
第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理
朗伯-比尔定律不仅适用于可见光，而且也适用于紫 外光和红外光；不仅适用于均匀、无散射的溶液，而 且也适用于均匀、无散射的固体和气体。
实验证明：溶液对光的吸光度具有加和性。如果溶液 中同时存在两种或两种以上的吸光性物质，则测得的 该溶液的吸光度等于溶液中各吸光性物质吸光度的总 和，即：