还原糖测定方法
一、原理
3，5-二硝基水杨酸（DNS）与还原糖发生氧化还原反应，生成3-氨基-5-硝基水杨酸，该产物在煮沸条件下显棕红色，可在最大吸收波长540nm处进行比色测定还原糖含量。

二、试剂和溶液
除特殊规定外，本标准所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或相应纯度的水。

1、DNS试剂配置：将7.5g 3，5-二硝基水杨酸和14.0gNaOH充分溶解在l000ml 水中，加入216.0g酒石酸钾钠、5.6ml预先在50℃水浴中溶化的苯酚和6.0g偏重亚硫酸钠，充分溶解后盛于棕色瓶中，放置5天后即可使用。

2、NaOH
3、酒石酸钾钠
4、偏重亚硫酸钠
5、葡萄糖
6、苯酚
三、仪器、设备
1、分光光度计：有10mm比色池，可在540nm处测定吸光度
2、分析天平
3、恒温水浴锅
4、振荡器
5、容量瓶：100ml
6、移液枪：1000ul
7、计时器
8、棕色试剂瓶
9、量筒、试管等
四、标准曲线的制作
1、精确配制浓度为0.1g/l、0.2g/1、0.3g/l、0.4g/l、0.5g/l、0.6g/1、0.7g/l、0.8g/l、0.9g/l、1.0g/1的标准葡萄糖溶液一组。

2、在试管中加入l ml标准葡萄糖溶液，3mlDNS试剂，沸水浴10min，冷却至室温后，加水至25ml，摇匀。

以水为空白测540nm处的吸光度A。

3、以浓度对吸光度A作标准曲线。

五、测定步骤
取适当稀释后的样品l ml，加3mlDNS试剂，沸水浴10min，冷却至室温后，加水至25ml，摇匀。

以水为空白测540nm处的吸光度A。

根据标准曲线计算出其浓度，再乘以稀释倍数，就得到样品中的糖浓度。