to diagnose rheumatic fever.
THANKS!!
S.aureus
After mixing
4.抗 O 试 验
原理：乙型溶血性链球菌产生溶血毒素“O” （SLO ），具有很强的抗原性，可刺激机体产生抗 体，于感染后2～3周至病愈后数月到一年可检出 SLO抗体，风湿热病人血清中SLO抗体显著升高， 一般其效价在1：400以上。因此，测定SLO抗体含 量，可了解近期内有无链球菌感染的病史，作为风 湿病辅助诊断的指标。
shake up 5～8 minute
Patient Serum
Negative control Positive control
.
-
+
Uniformity turbidity
White granule agglutination
ASO test: ASO titer > 1: 400 units, help
抗体或补体 (部分或完全失去胞壁)
葡萄球菌
葡萄球菌L型
3. 耐药性变异
四、细菌的生化反应
1、细菌的分解代谢
根据细菌含有不相同的酶系统，可分解不 同的营养物质，用生化方法来鉴定细菌, 称细菌的生化反应．
（1）糖发酵试验(Fermentation of sugars)
细菌分解糖时，则产酸，使指示剂 变为黄色( “＋”)；有些细菌在分 解糖产酸的同时还产生气体，在管 中有气泡出现("⊕")；如细菌不分解 该糖时，指示剂不变色 ("―")。
SLO胶乳试剂测定抗O试验（反应板法）
血清中ASLO的测定可用于链球菌感染的 诊断，ASLO高滴度的病人血清被适量的 SLO中和后还有多余的ASLO，这些多余的 抗体即与SLO胶乳试剂反应，出现清晰、均 匀的凝集颗粒。SLO胶乳试剂是根据免疫学 原理将羟化聚苯乙烯胶乳与SLO共价交联作 为抗原，用于测定受链球菌感染病人血清中 的ASLO。
乙型溶血性链球菌菌落
3.血浆凝固酶试验
血浆凝固酶能使含有枸橼酸钠或肝素抗 凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质。
凝固酶有两种：一种是分泌至菌体外的 蛋白质称为游离凝固酶；另一种结合于 菌体表面并不释放的凝固酶，称结合凝 固酶或凝聚因子。
游 离 凝Βιβλιοθήκη 协同因 子凝 血 酶样
固
物
凝酶
质
固
酶
结 合
（ 纤 维
1. Patient Serum Negative control Positive control
2. Soluble streptolysin O，shake up 1～3 minute; 3. Soluble streptolysin O combine with latex beads ，
齿垢涂片
二、消毒与灭菌
1.紫外线杀菌试验
2.药敏试验
抑菌圈
抗生素滤纸片
3.化学消毒剂的杀菌试验（自做）
三、细菌的遗传变异
细菌的变异现象 1.H→O变异 2.L型变异
3.耐药性变异
1.H→O变异
变形杆菌迁徙生长现象
2.L型变异
青霉素、溶菌酶
正常形态细菌形──态──结──构→ 变L异型变异
五糖生化反应： 葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖 （指示剂-溴甲酚紫） （对应发酵管颜色：红、黄、蓝、白、黑） 大肠杆菌：⊕ ⊕ ⊕ ⊕ ― 伤寒杆菌：＋ ― ＋ ＋ ―
伤寒杆菌
大肠杆菌
（2）吲哚试验 有些细菌如大肠杆菌等能分解蛋白胨
水中的色氨酸生成吲哚（靛基质），与 试剂中的对二甲基氨基苯甲醛相互作用， 形成玫瑰红色化合物，为吲哚试验阳性。
血 浆
凝蛋
纤
固
白 原
+
酶受
体
）
维 蛋 白 原
纤维蛋白原(液态） 纤维蛋白（固态）
血浆凝固
（试管法）
细菌凝聚
（玻片法）
（1）试管法
取两支灭菌小试管，每管加入1：4稀释 的兔血浆0.5ml，用灭菌接种环沾取金黄色 葡萄球菌培养物，在一小试管内壁研磨使 成均匀的混悬液；另一试管用表皮葡萄球 菌做为对照。将两试管放在37℃水浴箱或 温箱中2～4h 观察结果。观察结果时使试 管倾斜，凡血浆呈现胶胨样凝集者即为阳 性，仍呈液状者为阴性。
→ 沾菌的接种环在此处
管内壁上轻轻研磨
（2）玻片法 在载玻片上各滴兔血浆、盐水一滴，
取金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌平 板培养物加入其中混匀，立即观察结 果。有明显小凝块出现为阳性，无此 现象者时为阴性。此法较简便，但不 如试管法锐敏、准确。
Procedures:
Rabbit plasma
NS
S. epidermidis
五、球 菌
1.球菌形态观察 2.球菌培养物观察 3.血浆凝固酶试验 4.抗O试验
1.球菌形态观察
Staphylococcus(Gram stain)
Streptococcus （Gram stain）
pneumococcus
Meningococcus
淋球菌（gonococcus）
2.球菌培养物观察 金黄色葡萄球菌菌落