30
10 种免疫球蛋白
IgA Kappa
IgD Kappa
IgG Kappa
IgM Kappa
IgA Lambda
IgG Lambda
IgM Lambda
IgE Kappa IgD Lambda
IgE Lambda
31
免疫球蛋白的合成过程
1 骨髓 (颅骨,盆骨, 肋骨, 胸骨)
浆细胞 免疫球蛋白
2
• 造血干细胞分化为3类细胞:
- 红细胞
- 粒细胞
- 巨核细胞
3• B淋巴细胞 转化为浆细胞
4• 浆细胞 合成抗体,即免疫球蛋白.
5• 免疫球蛋白 在免疫系统中被用来识别和消 灭如细菌或病毒等外源物
32
正常浆细胞
免疫球蛋白电泳结果
P1 P2 P3 P4 P5
多克隆免疫球蛋白
正常电泳结果
正常
所有浆淋巴细胞同步合成免疫球蛋白= 多克隆免疫球蛋白
-
阴极
++++++++++++++++++
电渗流作用方向
++++++++++++++++++
+ 阳极
8
在毛细管内部的正电荷粒子
同时到受电渗流和电场力的作用，两种作用力方
向一致→快速向负极端迁移
-
阴极
++++++++++++++++++
电场力Байду номын сангаас用方向
+
电渗流作用方向
++++++++++++++++++
beta 2 区：多克隆Ig A ↑ gamma 区：多克隆IgG ↑
21
Beta Gamma 桥
22
电泳图谱---肾病
23
电泳图谱---肾病
肾小球滤过屏障损伤 → 白蛋白流失
• 低白蛋白 • 高α-2
Alpha-2巨球蛋白
24 贾晓辉, 马彧旻. 齐齐哈尔医学院学报. 2009, 30(16): 2015
白蛋白 α-1 酸性糖蛋白
α-1抗胰蛋白酶 结合珠蛋白
α-2 巨球蛋白
免疫球蛋白 C3补体
转铁蛋白 血红素结合蛋白
16
电泳图谱---急性炎症
急性期反应蛋白
白蛋白 α-1 酸性糖蛋白
α -1抗胰蛋白酶 结合珠蛋白 α -2 巨球蛋白
免疫球蛋白 C3补体
转铁蛋白 血红素结合蛋白
17
电泳图谱---慢性炎症
无论是带正电、带负电或不带电的粒子， 都在
----
-
阴极
电渗流的作用下，向阴极迁移，带正电的，受到
同方向的电场力作用， 迁移最快，不带电的迁 移速度次之，带负电的迁移速度最慢， 因为它 受到与电渗流反方向的电场力作用。
---
+
-+----
阳极
--
+
++++++++++++++++++
正电荷电场力作用方向
3
蛋白电泳技术的变迁
• 滤纸电泳 • 醋酸纤维素薄膜电泳 • 凝胶电泳
– 琼脂糖凝胶电泳—临床 – 聚丙烯酰胺凝胶电泳—科研
• 毛细管电泳
– 电泳技术的革命
4
毛细管电泳工作原理Capillarys Electrophoresis Principle
温控装置
检测器
-
负极
电泳方向 氘光源 200 nm
负电荷电场力作用方向
电渗流作用方向 11
毛细管电泳技术的优势
12
毛细管血清蛋白电泳图谱
白蛋白 Alpha-1 Alpha-2
Beta-1 Beta-2 Gamma
白蛋白 α-1 酸性糖蛋白
α-1抗胰蛋白酶 结合珠蛋白 α-2 巨球蛋白
免疫球蛋白 C3补体
转铁蛋白 血红素结合蛋白
13
血清蛋白电泳的临床应用
33
免疫球蛋白电泳结果
浆细胞恶性增殖
多克隆免疫球蛋白 单克隆免疫球蛋白
骨髓瘤
异常电泳结果
M蛋白
34
200 nm
IgG Lambda
IgG Kappa
IgA Lambda
IgA Kappa
IgM Lambda
IgM Kappa
35
正常
多克隆 Igs 异常
单克隆Ig---“M”蛋白
蛋白电泳的应用与临床实验结果的解读
王连升
法国赛比亚公司上海代表处
1
主要内容
• 血清蛋白电泳 • 免疫分型电泳
2
电泳技术的发展历程
19世纪
21世纪
1809年 发现电泳现象
1937年 建立了界面电泳技术 1948年诺贝尔化学奖
1950年后 区带电泳从发展到成熟
1980年 毛细管电泳技术
2001年 sebia首次推出全自动毛细管电泳仪
27
电泳图谱---高免疫球蛋白
原因: 慢性感染、自身免疫病、慢性肝病、慢性肉芽肿
28
血清蛋白电泳图谱常见类型
29
Gamma globulins (免疫球蛋白区带)
• 免疫球蛋白是机体的正常生理成分 • 多克隆 • 分类
– 重链：IgG、IgA、IgD、IgE、IgM – 轻链：κ、λ – 10种类型
毛细管 (内径25微米）
约1万伏高压
+
样本进入
正极
6
毛细管电泳工作原理
++++++++++++++++++ 当毛细管内部充满缓冲液被活化后，在毛细管 内表面的负电荷层上形成了一正电荷层
++++++++++++++++++
毛细管的内表面是带负电荷
7
内部充满电泳缓冲液的毛细管带电后， 毛细管内的正电荷层整体向阴极移动 ，这种现象称之为电渗流
电泳图谱---肾病综合征
低白蛋白
脂蛋白
α -2巨球蛋白
总蛋白浓度降低(低于 60g/l) Alb a1 a2 b1 b2 g
三高一低：高脂蛋白血脂
25
电泳图谱---肾病综合征
性别：男
年龄：24
科室：肾脏内科
诊断：肾病综合征
26
电泳图谱---低免疫球蛋白
原因: 免疫缺陷病、免疫抑制剂、游离轻链病
+ 阳极
9
在毛细管内部的负电荷粒子
同时到受电渗流和电场力的作用，两种作用力方
向相反；电渗流> > > 电场力→向负极端迁移
-
阴极
++++++++++++++++++
电渗流作用方向
--
电场力作用方向（ 负电荷）
++++++++++++++++++
+ 阳极
10
样品进入到毛细管之中的运动
++++++++++++++++++
临床疾病的识别
炎症 肝病 肾病 ……
“M”蛋白的筛查及定量
对疑似骨髓瘤患者检测单克隆免疫球蛋白 早期检出无症状的骨髓瘤患者
对骨髓瘤疾病进行随访及疗效观察
14
Capillarys Electrophoresis
毛细管血清蛋白电泳
15
正常血清蛋白电泳图谱
白蛋白 Alpha-1 Alpha-2
Beta-1 Beta-2 Gamma
18
电泳图谱---肝脏
肝脏是血清蛋白合成的主要器官
白蛋白 Alpha-1 Alpha-2
Beta-1 Beta-2 Gamma
白蛋白 α-1 酸性糖蛋白
α-1抗胰蛋白酶 结合珠蛋白
α-2 巨球蛋白
免疫球蛋白 C3补体
转铁蛋白
血红素结合蛋白
19
电泳图谱---肝病
20
电泳图谱---肝硬化 Beta-Gamma 桥