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果蝇不同性状的观察

一、研究背景
果蝇(Drossphila)是遗传学试验中最常用的多年生物之一。

属昆虫纲,双翅目,果蝇科,果蝇属。

果蝇的染色体数目少(仅四对),具有许多自然的或诱发的可遗传突变性状,世代周期短(25℃下10~12天一代,个体小易于饲养,培养费用低廉,繁殖能力强,后代数目繁多,故被作为遗传学实验的典型模式生物。

后续实验要作果蝇的杂交实验,需要大量的果蝇,本次实验可以学会识别果蝇的各种形状、区分果蝇的性别以及基本的饲养方法,为后续的实验打下基础。

黑腹果蝇(Drosophila melanogaster),果蝇科(Drosophilidae)果蝇属(Drosophila)昆虫。

因其生活史短(在25℃左右温度下十天左右繁殖一代),繁殖力强(雌性可一次产下400个0.5毫米大小的卵),相对性状明显且可遗传,易于培养,培养成本低(酵母和细菌,腐烂水果),符合上述遗传学实验研究要求,同时因其染色体仅4对,基因组仅约165Mb,并且基因组超过60%的片段同人类疾病基因相似。

故已将其作为一种常见的模式生物(model organism)大量使用在遗传学(genetics)和发育生物学(developmental biology)的研究。

二、实验目的
三、1、了解果蝇生活史,观察各发育阶段的形态特征
四、2、掌握麻醉瓶的使用,即果蝇麻醉技术
五、3、学会用肉眼(或解剖镜、显微镜)识别果蝇的性别,以及几种果蝇的特征(大
小、形态、条纹、性梳和外生殖器等);
六、4、了解实验室饲养果蝇的常识方法和所用器械
七、5、熟练观察果蝇几种突变性状,为果蝇杂交系列实验做准备。

八、实验器材
九、解剖镜、蓝色塑料板(10cm*10cm)一张、小毛笔、解剖针、麻醉瓶、培养皿、实
验室饲养的黑腹果蝇野生型及其突变体(在果蝇瓶,即指管内)、镊子、酒精灯
十、实验试剂
十一、乙醚、70%乙醇水溶液(含脱脂棉)
十二、
十三、实验步骤
十四、1、麻醉果蝇
十五、观察果蝇要先把果蝇麻醉,使之处于昏迷状态,便于观察。

具体步骤如下:
十六、
十七、(1)麻醉瓶灭菌
十八、用70%的酒精擦拭麻醉瓶内壁,用镊子夹着在酒精灯上方烤干,注意镊子应与麻醉瓶口大约成45°角,以免酒精高温产生的火舌产生伤害事件。

十九、原因:做果蝇杂交实验时,转移、分拣果蝇需要无菌处理,否则将影响果蝇瓶中酵母的生长,因而本次实验要求对其麻醉时需要灭菌。

二十、
二十一、(2)果蝇麻醉
二十二、将麻醉瓶冷却,用手背轻碰,直至不烫为止。

拿出培养瓶,轻拍使果蝇震落到培养基上。

拔掉培养瓶的塞子,迅速将培养瓶口倒扣在麻醉瓶口上。

向培养瓶瓶
塞中的棉团滴2至3滴乙醚,再次轻拍培养瓶,使果蝇掉入麻醉瓶内,当有足够
数量的果蝇落入麻醉瓶内时,重新盖上塞子。

部分果蝇向上爬,爬得越高摔得越
狠,因为离乙醚最近,便会被麻醉,片刻,果蝇纷纷掉落瓶底。

二十三、原因:果蝇被麻醉了
二十四、
二十五、2、果蝇的观察
二十六、将麻醉的果蝇置于解剖镜下,用小毛笔(最好不用解剖针)轻轻的拨动观察,
使其处于解剖镜下最合适的姿势
二十七、原因:果蝇很脆弱,解剖针会损害其身体结构
二十八、
二十九、(1)雌雄果蝇的辨别
三十、①大小雌果蝇通常比雄果蝇大
三十一、②形态雌体腹部稍尖,较宽厚呈卵圆形;雄体腹部钝圆,相对窄小呈柱状。

三十二、③条纹雌体腹部背面有宽窄相近的5条黑色条纹;雄体腹背只有3条,上部条窄,最后1条宽且延伸至腹部腹面,呈一明显黑斑。

三十三、④性梳果蝇胸足跗节共有5个亚节。

雄体第一对胸足跗节的第一亚节基部有一梳状黑色鬃毛结构,称谓“性梳”。

雌体没有性梳。

三十四、⑤生殖器雄体外生殖器色深,雌体色浅。

三十五、
三十七、附:
三十八、(一)注意事项
三十九、1、配制培养基时要将(玉米粉)及(琼脂和绵白糖)分开煮。

四十、2、转移果蝇时要防止果蝇飞走。

四十一、3、麻醉果蝇时要掌握麻醉尺度,需要用活体时,不可以麻醉过度使果蝇致死。

实验后不用的果蝇要及时处死,不可放飞。

四十二、4、防止事故发生(燃烧、爆炸、摔瓶等)
四十三、
四十四、(二)果蝇培养基的制备
四十五、玉米培养基配方:
四十六、A:糖6.2g,琼脂0.62g,水38ml,煮沸溶解;
四十七、B:玉米粉8.25g,水38ml。

煮沸溶解;
四十八、将A、B混合调制成糊状,加0.5ml丙酸,即可分装到灭菌的培养瓶中。

冷却
凝固后在表面撒少量酵母粉。

四十九、
五十、思考题
五十一、1.果蝇的生活史分几个阶段?
五十二、答:分为6个阶段。

五十三、以25℃为例,从卵开始约4至5天,变为一龄幼虫,再一天变为二龄幼虫,再一天变为三龄幼虫,紧接着一天变成蛹,经历3到4天成为成虫。

五十四、卵:卵白色,长椭圆形,长约0.5mm,在背面的前端伸出一对触丝,它能使卵附着在柔软的食物上,不至于深陷到食物中去。

五十五、幼虫:幼虫从卵中孵化出来后,经过两次蜕皮到第三龄期,体长可达4~5mm。

在解剖镜下观察可见一端稍尖为头部,并且有一黑点即口器;稍后有一对半透明的唾腺,每条唾腺前有一条唾腺管向前延伸,然后会合成一条导管通向消化道。

神经节位于消化道前端的上方。

五十六、蛹:幼虫生活四天左右即化蛹,化蛹前从培养基中爬出附在瓶壁上,渐次形成一个棱形的蛹。

起初颜色淡黄、柔软,以后逐渐硬化,变为深褐色,这就显示即将羽化了。

五十七、成虫:成虫的前8个小时内没有繁殖能力,因而找处女蝇应在这个时期。

之后成虫交配,又将经历新的一轮周期。

五十八、
五十九、2.你如何准确鉴定果蝇的雌雄个体?要领是什么?
六十、①大小雌果蝇通常比雄果蝇大
六十一、②形态雌体腹部稍尖,较宽厚呈卵圆形;雄体腹部钝圆,相对窄小呈柱状。

六十二、③条纹雌体腹部背面有宽窄相近的5条黑色条纹;雄体腹背只有3条,上部条窄,最后1条宽且延伸至腹部腹面,呈一明显黑斑。

六十三、④性梳果蝇胸足跗节共有5个亚节。

雄体第一对胸足跗节的第一亚节基部有一梳状黑色鬃毛结构,称谓“性梳”。

雌体没有性梳。

六十四、⑤生殖器雄体外生殖器色深,雌体色浅。

六十五、
六十六、3.将野生型和几种突变型性状观察的结果填表。

六十七、答:见上页表格
六十八、
六十九、4.为什么说果蝇是遗传学研究的好材料(或模式生物)?
七十、答:因为果蝇生活史短(在25℃左右温度下十天左右繁殖一代),繁殖力强(雌性可一次产下400个0.5毫米大小的卵),相对性状明显且可遗传,易于培养,培养成本低(酵母和细菌,腐烂水果),同时因其染色体仅4对,基因组仅约165Mb,并且基因组超过60%的片段同人类疾病基因相似。

七十一、果蝇自发或诱变的数量巨大。

基因及染色体的改变引起表型性状的改变。

我们主要观察果蝇的颜色,形状,翅的形状,翅脉的形态,刚毛的颜色、形态,平衡棒的大小、形态等方面的形状。

辨明各种形状,有利于我们正确选择亲本,准确地识别杂交后代中的不同子蝇的表型。

七十二、
七十三、讨论
七十四、在遗传学实验中总是可以看到许多意想不到的现象。

比如每种果蝇对麻醉剂的反应不同,所用乙醚剂量也不尽相同,这点以后在进行麻醉时应再查些资料,因材施加麻醉剂。

另外,在初次麻醉果蝇的时候时间过长,导致小半的果蝇都死亡了,这一点在以后的实验中需要注意。

七十五、
七十六、For personal use only in study and research; not for commercial use
七十七、。

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