水体DNA提取实验方法
1．取200ml 样品经0.22μm 的微孔滤膜过滤，将滤膜及过滤物在无菌条件下剪成1-2mm 的碎屑，放入Eppendorf 管中，加STET 缓冲液至满管，离心5分钟；
2．小心去上清，向沉淀中加入1mL STET 缓冲液洗涤，10000rpm 离心2min收集沉淀；
3．用200μL STET 缓冲液重悬沉淀，将4μL 50mg/mL 的溶菌酶加到悬液中，室温放置（37℃）5min，然后置94℃水浴保温2min；
5. 加入SDS 至终浓度为0.5%（10μL）和蛋白酶K 至终浓度为100μg/mL（1μL、20mg/ml），混合后置37℃水浴保温1h；
6. 加入NaCl 溶液（20μL、5mol/L）至终浓度为0.5mol/L，充分混匀，再加入25μL 5% CTAB（十六烷基三乙基溴化铵），混合并置65℃水浴保温10min；
7. 加入等体积（260μL，具体视情况而定）的饱和酚，混匀，12000rpm 离心5min，将上清液转入另一洁净的 1.5mL Eppendorf 管中；
8. 加入等体积酚/氯仿（V/V），混匀，12000rpm 离心5min，将上清液转入另一洁净的1.5mL Eppendorf 管中；
9. 加入0.6倍异丙醇混匀，在4℃或者-20℃（老师建议4℃）放置（沉淀）1h 或过夜；
10. 12000rpm 离心20min，小心吸出或者倒出异丙醇；
11. 用500μL 70%冷乙醇洗涤沉淀，12000rpm 离心5min 收集沉淀；
12. 小心吸出或者倒出乙醇，然后在吸水纸上倒置使残余乙醇流尽，空气干燥10－15 min，以便表面乙醇挥发，注意不要使沉淀完全干燥；
13. 加入30μL无菌双蒸水（ddH2O），用微量移液器吹吸，混合至DNA 充分溶解；
14. 将DNA 溶液存放于-20℃，不可使用自动除霜冰箱，以避免DNA 反复冻融；
药品准备
1. STET 缓冲液：8%蔗糖，50mM Tris（pH 8.0），50mM EDTA，0.1% Tween-20；
2. 50mg/mL 溶菌酶；蛋白酶K
3. 10% SDS；5mol/L NaCl；5% CTAB（十六烷基三乙基溴化铵）；。