程为:
Y =1388+10531X ,r =0 9994
2 6 精密度考察 分别精密吸取对照品溶液1 L,注入气相色谱仪测定峰面积,结果愈创木酚和薄荷脑的RSD 分别为1 01%、1 20%(n =5)。
2 7 重现性考察 对同一批号的样品,依法平行测定5次,求得愈创木酚和薄荷脑的含量,RSD 分别为0 49%和1 69%。
2 8 空白试验 对由厂方提供的不含木馏油和薄荷脑的空白样品,按正文方法进行测定,结果没有干扰。
2 9 回收率 精密称取已知含量的样品1g,精密加入适量对照品,依法测定,计算加样回收率。
结果5次测定平均回收率愈创木酚为100 4%,RSD 为1 67%;薄荷脑为99 4%,RSD 为1 84%。
2 10 样品测定 吸取供试品溶液和对照品溶液各1 L,注入气相色谱仪,依法测定其峰面积,计算,测得三批样品愈创木酚含量为2 05%、2 02%、2 05%,薄荷脑含量为2 12%、2 10%、2 13%。
3 讨论
3 1 样品处理曾比较了乙醚、石油醚、醋酸乙酯等溶剂,经试验采用醋酸乙酯可以提取完全,且损失少、干扰小。
3 2 试验中对提取时间进行了比较,从10min 至30min 进行了比较试验,结果在20min 可得到良好的结果。
参考文献
1王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究.中国医药科技出版社,1994.188,430
2夏伯庆.痰咳净中的冰片含量测定.中成药,1988,10(7):16
3
叶崇义等.大口径厚液膜毛细管柱气相色谱法用于风油精成分的分析.中成药,1990,12(12):30
福乐片中柠檬酸的含量测定
中国药品生物制品检定所 北京 100050
高天兵 田金改 福乐片
[1]
是由日本西川制药公司生产的制剂,
具有抗疲劳等作用,是由柠檬酸、琥珀酸、苹果酸等多味药组成[2],其主要成分为柠檬酸,本文采用
薄层扫描法测定了福乐片中柠檬酸的含量,方法可靠,重现性好。
1 仪器和试药
日本岛津CS-9000型双波长薄层扫描仪;聚酰胺薄膜(浙江黄岩);柠檬酸对照品由本所提供。
所用试剂均为分析纯。
2 色谱条件
2 1 溶剂系统与显色剂 溶剂系统:乙腈-醋酸乙酯-甲酸(9 1 1)溶液;显色剂:溴甲酚绿试液。
2 2 扫描条件 R =700nm, S =450nm,锯齿扫描,DE LT Y =0 1,线形化因子SX =3。
2 3 对照品溶液的制备 柠檬酸对照品约10mg,精密称定,置5mL 量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀,为对照品溶液。
2 4 供试品溶液制备 取本品20片,研细,精密称取200mg,置50mL 三角瓶中,精密加入甲醇25mL,超声提取30min,取出,放至室温后,补足重量,滤过,弃取初滤液,精密吸取续滤液1m L 于2mL 量瓶中,加甲醇稀释至刻度,为供试品溶液。
3 方法与结果
吸取供试品溶液与对照品溶液各2 L,分别交叉点于同一聚酰胺薄膜上,以乙腈-醋酸乙酯-甲酸(9 1 1)溶液为展开剂,展开,取出,晾干至无酸味,喷以溴甲酚绿试液[2],放置10min,于可见光450nm 下进行扫描。
3 1 工作曲线的绘制 精密吸取柠檬酸对照品溶液1、2、3、
4 L,点于同一聚酰胺薄膜上,依法展开,取出,晾干,显色,依法扫描测定对照品溶液吸收度积分值,点样量在0~8 g 内线性关系良好,求得回归方程为:
Y =-3377 8+59275X r =0 9993
3 2 精密度及稳定性 在同一薄膜上,点5个相同量(2 L)的供试品溶液,依法展开,显色,扫描测定其吸收值。
结果其RSD 为2 79%。
每隔30min 测定其稳定性,结果表明峰面积在2h 内基本不变。
3 3 重现性试验 对同一批号的样品,依法平行测
定5次,求得柠檬酸含量,X =49 9%,RSD =1 36%。
3 4 空白试验 对由厂方提供的空白样品,按正文方法进行测定,可见光下检视在与柠檬酸色谱图相应位置上没有斑点,薄层扫描结果没有干扰。
3 5 回收率 精密称取已知含量的样品100mg,置50mL 三角瓶中,精密加入柠檬酸对照品50mg,依
114 药物分析杂志
2 4 项下测定,计算加样回收率。
结果平均回收率为104 8%,RSD=
3 05%(n=5)。
3 6 样品测定 吸取 2
4 项下供试品溶液和 2 3 项下对照品溶液各2 L,点于同一聚酰胺薄膜上,依法展开,显色,扫描测定其吸收值,计算,测定3批样品,结果含量为49 28~50 24%,RSD为1 05~2 16%。
4 讨论
4 1 由于展开剂中含有甲酸,所以在显色之前须挥发至无酸味,否则会干扰所测成分的显色。
4 2 吸附剂曾选用硅胶、硅藻土等,但分离效果不好,后采用正文吸附剂得到很好分离。
4 3 由于聚酰胺对所测成分在紫外区有干扰,被测成分无法定位,难以测定。
故采用本文所述方法。
参考文献
1卫生部药政局等.部分进口传统天然药物及其制剂注册标准(第二分册).5
2中国医学科学院药物研究所编.薄层层离及其在中草药分析中的应用.365
血中巴比妥类药物的
SPE GC/MS法定性、定量分析中国刑警学院法化系 沈阳 110035
朱 昱 宋庆芳 谭家镒
巴比妥类药物是临床广泛应用的安眠镇静药物,也是司法鉴定中常见引起中毒的药物,血、尿等生物检材中该类药物的薄层色谱、紫外光谱、气相色谱等分析方法已有较多报道[1],但目前应用已经比较普遍,分析结论最为可靠的GC/MS分析法报道尚较少。
Mule等曾报道尿中该类药物经液 液萃取及甲基衍生化的GC/MS分析法[2],Poccl等人曾报道尿中该类药物经用Bond Elute Certify 柱固相萃取(SPE)及非衍生化的GC/MS分析法[3],两种方法的灵敏度等相似,但后者操作简便快速。
我们经研究建立了与后者相似的血中该类药物分析方法,但使用国产大孔树脂为固相萃取材料,不仅材料价格低廉,操作也更为简便快速。
1 材料和方法
1 1 药品与试剂 巴比妥、戊巴比妥、异戊巴比妥、司可巴比妥、苯巴比妥:质量符合中国药典(1995年版)规定的原料药或分析纯化学试剂,用甲醇配制成各药物含量均为100 g/mL及10 g/m L的两种混合标准液使用。
异丙烯丙巴比妥(Aprobarbital,内标):纯品,公安部物证鉴定中心提供,用甲醇配制成10 g/mL的标准溶液使用。
GDX系列大孔树脂:80~100目,天津化学试剂二厂产,用甲醇淋洗去除杂质后晾干使用。
甲醇、二氯甲烷等试剂:分析纯。
实验用水为去离子水。
空白血:取自近期未服药健康人,加柠檬酸钠抗凝剂。
1 2 仪器及条件 PE 8420毛细管气相色谱仪, ITD800质谱仪。
GC条件:BPX50 22mm(i. d.) 25m融熔石英毛细管色谱柱,柱温100 (1min)
20 /min 260 (10min),汽化温度260 ,载气He,流速30cm/s,分流比50 1,进样方式为不分流进样(0 7min)。
ITD条件:电离源EI,发射电流63 A,AGC自动增益控制离子化时间,全扫描方式,扫描范围46 ~250amu,倍增器电压1800V,传输线温度260 。
1 3 样品分析 取GDX301树脂0 3cm3放入5mL试管中,加甲醇少许浸没活化,加水4mL。
另取10mL 具塞试管一只,加入血样1 0mL,加内标标准液10 L (如有药物标准液加入,标准液总体积不得大于20 L),用吸管将盛树脂试管内容物移入,加塞摇动5min,然后滤集树脂于内径0 5cm的小层析柱中,用水10mL淋洗树脂,用洗耳球尽量吹去树脂中残存水分,用二氯甲烷洗脱,收集洗脱液5mL。
洗脱液上层少许水珠用吸管吸去,加入无水硫酸钠1~2g脱水,上清液置微型浓缩器中,于50 水浴中挥干。
加甲醇100 L溶解残留物,进样1 L进行分析。
根据各药物主要特征离子质量及质量色谱峰的保留时间进行定性分析。
根据药物基峰离子质量色谱峰面积与内标基峰离子质量色谱峰面积比进行定量分析。
1 4 标准曲线制备 取1mL空白血6份,分别加入各种药物25、50、100、250、500、1000ng及内标100ng,进行分析。
以各药物基峰离子质量色谱峰面
115
18(增刊),1998
广东公安司法管理干部学院。