紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂—苯甲酸
一、目的要求
1．了解和熟悉紫外可见分光光度计。

2．掌握紫外可见分光光度法测定苯甲酸的方法和原理。

3．学习掌握用标准曲线定量分析的方法。

二、实验原理
为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。

防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。

我国规定了苯甲酸（盐）在碳酸饮料中最大使用量为0.2g/kg。

苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收
由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。

从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。

本实验测定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。

三、仪器与试剂
日立UV-3010紫外-可见光谱仪；1cm石英比色皿；苯甲酸（AR）；市售饮料
四、操作步骤
1.苯甲酸标准储备液配制：
称取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加适量蒸馏水定容，配制成
1mg/mL溶液，吸取此液5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，每毫升溶液相当于苯甲酸100ug。

2.标准曲线绘制：
取苯甲酸标准储备液0.
00、1.
00、2.
00、4.
00、6.00mL，分别置于50mL容量瓶中，用蒸馏水溶液稀释至刻度。

以水为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为
200~350nm），找出λ
个标准溶液的吸光度A。

3.样品处理和测定：
雪碧饮料除二氧化碳后，准确移取2.5mL于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，在λ
五、结果与计算
从曲线上找出相应的苯甲酸浓度C
x，按下列公式计算样品中苯甲酸含量。

w=C
x×V
1/V2V
1样品定容后体积V2所取样品体积
六、提问
1.举例说明日常生活中遇到的哪些食品中有防腐剂？
2.用什么方法从样品中把苯甲酸分离出来？
3.食品中苯甲酸检测还有哪些方法？
4.苯甲酸通过什么排泄？
5.如何利用一元线性回归法绘制标准曲线及计算样品中苯甲酸含量？max处测定吸光度。

然后在λ
max处测定五max，。