PEP的理论研究（动物研究） 的理论研究（动物研究） 的理论研究
• 用猴免疫缺陷病毒（SIV）对猴子进行粘膜暴露
– 24小时后，SIV感染暴露区域的树枝状细胞 – 24-48小时后，SIV进入暴露区域的淋巴结 – 5天后，可在外周血检测到 SIV
• 用Tenofovir治疗SIV经静脉暴露的长尾猿
我国使用WB条带的情况 我国使用WB条带的情况
• Genelabs
– 目前是混合型（HIV-2：gp36） 目前是混合型（HIVgp36） – HIV-2条带 HIV-
• Organon Teknika (biomerieux) ：LiaTek
– 最早gp160，gp120, gp41, p18, p24, p55, p31, 最早gp160， p51,p65 – III型 包括HIV 1+2 III型 包括HIV • HIV-1 无gp160；HIV-2: gp105, gp36 HIVgp160；HIV-
– 最近预防接种（流感，HIV） 最近预防接种（流感，HIV） – 高丙种蛋白血症（全身性红斑狼疮） – 一般人群WB不确定率2/100,000，医院EIA阳性标本 一般人群WB不确定率2/100,000，医院EIA阳性标本 中WB确定率10-15%。最多见一条P24。不确定条带 WB确定率10-15%。最多见一条P24。不确定条带 出现与胶原脉管病、恶性肿瘤、非B型的HIV感染，高 出现与胶原脉管病、恶性肿瘤、非B型的HIV感染，高 危人群 – 实验室操作
HIV/AIDS的临床表 HIV/AIDS的临床表 现与诊断
库车县第二人民医院 吴玲
全国累计报告HIV感染者按地理分布
（截止2005年底） ）
传染危险性? 传染危险性
HIV
HIV阳性血液 阳性血液: 单次暴露于HIV阳性血液: 皮肤 0.3% 粘膜0.09% 粘膜0.09%
HCV
单次暴露于HCV抗体阳性血液: 单次暴露于 抗体阳性血液 (平均 平均, 1.8% (平均, 范围 0 to 7%)
Pr 55
Pr 66
Pr 160
HIV-2结构基因 结构基因
Gag基因 P 16 P 26 Pol基因 P 53
Pr 68 Pr 55
P 34 Env基因 gp 105 gp 36
Pr 140
HIV-1调节蛋白 调节蛋白
基因 Tat Rev Vpu Vif Vpr Nef HIV-1 功能
P16/p14 增强病毒复制1000倍 P19 P16 P23 P10-15 P25 与表达结构蛋白核新一代病毒颗粒有关 增强病毒颗粒释放 促进病毒成熟 病毒产率有关(?) 病毒颗粒传染性 (?)
–快速试纸条，明胶颗粒凝集试验
HIV-1/2混合试剂 HIV-1/2混合试剂
• 同源性 • 致病性 • 传染性 • HIV-2的趋势 HIV• 使用混合试剂的时间
40-60% 40-
EIA; LA, Red cell PA, PA
ELISA间接法原抗体
2型不同结构蛋白
HIVHIV-1 Env gp41 gp120 gp160 Gag p17 p24 P55 p31 p51 p66(65) HIV-2 HIVgp136 gp105 gp140 p16 p26 p56 p34 p53 p68
Pol
结果判断
• 阴性 • 阳性 • 可疑或不确定
结果判断
假阴性血清学检测
• 指EIA+WB的假阴性 EIA+WB的假阴性 • 原因
– 急性感染后的抗体迟反应 – 不同HIV毒株型 不同HIV HIV毒株型 – 发病晚期抗体消失 – 窗口期：几周到6个月，与当地HIV流行率有关 窗口期：几周到6个月，与当地HIV流行率有关 – HIV亚型 HIV亚型 – 实验室操作
2. 临床表现 发热、头痛、乏力、咽痛、全身不适等症状 传染性单核细胞增多症 颈、腋及枕部有肿大淋巴结 脑膜脑炎或急性多发性神经炎 皮疹 肝脾肿大
8名职业暴露者中7人出现本 期症状； 出现时间:2~4周为多；少数 可长达10个月。
回顾调查显示
发热 （96%） 96%） 咽炎（70%） 咽炎（70%） 淋巴瘤肿大（74%） 淋巴瘤肿大（74%） 口、生殖器、 食道溃疡（70%） 食道溃疡（70%） 肌痛、关节痛（54%） 腹泻（32%） 肌痛、关节痛（54%） 腹泻（32%） 头痛（32%） 头痛（32%） 恶心、呕吐（27%） 恶心、呕吐（27%）
人IgG 抗体
固相抗人 金标记抗 IgG抗体 人IgG抗体
快速检测（层析法）原理图1 快速检测（层析法）原理图1
加样区 （玻璃纤维素）
反应区、质控区 （硝酸纤维素）
吸水垫
金标记 抗原
固相 抗原
待测 抗体
针对金标 记抗原的 抗体
快速检测（层析法）原理图2 快速检测（层析法）原理图2
阳性 T C 阴性 T C
• HIV感染可分为急性HIV感染、无症状HIV 感染和AIDS三期。其中对感染期的患者统称 为HIV感染者，对AIDS期的患者称为AIDS病 人。
一、急性HIV感染 急性 感染
1. 流行病学史 A不安全性生活史 : 主. 是本病主要传播途经,以同 恋为
B静脉注射:药瘾者共用针头 C输入未经HIV抗体检测的血液和血液制品史:血友病病人 D HIV抗体阳性者所生子女 F其他（如职业暴露或医源性感染史）
HBV
未疫苗接种者): 单次皮肤暴露 (未疫苗接种者):
37 % to 62 %
HIV in Body Fluids
血液 18,000
精液 11,000
阴道 分泌液 7,000
羊水 4,000
唾液 1
每毫升中HIV病毒颗粒平均数 病毒颗粒平均数 每毫升中
Exposure Risks (average, per episode, involving HIV-infected source patient)
二、无症状HIV感染 无症状 感染
1. 流行病学史同“急性HIV感染” 2. 临床表现： 常无任何症状，但也可有全身症状 3. 实验室检查 （1） HIV抗体阳性，经确认试验证实者（2）病人血 浆中HIV-RNA（+）
确诊标准
病人有1 病人有1和2中的现象，并有3（1）或3（2）中 中的现象，并有3 ）或3 任何一项即可确诊
• 特异性高，但也有漏检
– 核对、多种、操作技术
不确定标本的处理
• 原因 • 因素 • 处理 • 保存
特异性和非特异性 标本种类，操作技术，感染时间， 指征把握等 随访（注意一根条带）
HIV感染者系列血清的WB变化 HIV感染者系列血清的WB变化 感染者系列血清的WB
假阳性血清学检测
• 一般人群，在美国发生率0.0006% 一般人群，在美国发生率0.0006% • 原因
– 暴露后24小时内治疗可以完全预防SIV感染 – 暴露后48－72小时内治疗就无法完全预防SIV感染 – 暴露后治疗仅持续3－10天也无法完全预防SIV感染
• 因此，暴露后尽快应用抗逆转录病毒药物(ART) 抑制靶细胞和 局部淋巴结中的病毒复制，就可能防止或抑制全身感染
国家的HIV/AIDS 分期 国家的
• 其它：Cambridge等 其它：Cambridge等
WB使用须知 WB使用须知
• 严格按照说明书操作和阅读
– 摇床：自动和人工 – 注意1种试剂2种不同操作方法，恒温，扫描 注意1种试剂2
• 判断结果典型
– 带型和颜色；强调env带 带型和颜色；强调env带
• 非典型
– 全而淡、一根主要条带、高危人群、不确定， 等等
金标记 抗原
固相 抗原
待测 抗体
针对金标 记抗原的 抗体
颗粒凝集试验（PA）原理图 颗粒凝集试验（PA）原理图
待测 抗体
非待测 抗体
抗原致敏的 明胶颗粒
PA的凝集图像 PA的凝集图像
EIA实际试剂盒进展 EIA实际试剂盒进展
代次 1 2 3 抗原 全病毒 重组或多肽 重组+ 重组+多肽 方法 间接 间接 夹心 检测时间 > 2个月 2个月 3-4 周 4-7 天
• HIV-1阳性 HIV– >2个env gp41+gp160/gp41+gp120 >2个 – 至少有1个env和p24 至少有1 env和
• HIV-2阳性 HIV– >2个env gp41和1条gag带 >2个 gp41和 gag带
WB应用史 WB应用史
• 过去用I型 过去用I • 之后用I型和II型 之后用I型和II型 • 现在先用I+II型，然后用II型 现在先用I+II型，然后用II型
两型HIV毒株比较 毒株比较 两型
HIV-1 分布 传播模式 造成OI 导致AIDS 传染性 母婴传播 发展AIDS 引起临床症状 感染模式 两者交叉 HAART 全球性 相同 一样 一样 +++ +++ 短 +++ 多 40-60% 佳 HIV-2 地区性 相同 一样 一样 + + 较长 + 少，与HIV-1同时感染 稍差，NNRTI差
4
抗原+ 抗原+抗体
夹心
抗原 5pg
HIV抗体确认试剂 HIV抗体确认试剂 免疫印迹法（WB） 免疫印迹法（WB）的应用
标 本 检 测
• 筛查检测 • 重复检测 • 确认检测
严格按说明书 2种，不同原理或不同厂家， 新老标本 全球2种，我国1 全球2种，我国1种
HIV-1结构蛋白 结构蛋白
Gag基因 P17（基质蛋白） P 6（出芽时作用） P24（衣壳结构蛋白） P 9（核衣壳蛋白） Pol基因 P10（PR） P50（RT） P15（RN） P32（IN） Env基因 gp120（膜表面蛋白） gp41（穿膜蛋白）