样品处理：
• 黄连药材经粉碎后过40目筛，分别称取适量黄连药材粉
末两份，各置于250 mI圆底烧瓶中，分别加入8倍量去离子
水或80％乙醇水溶液浸润30min，之后加热回流提取2次，每 次l h，趁热过滤，将滤液浓缩后真空干燥，得到黄连的水提 物与醇提物。
实验步骤： 分别取上述药材、水提取物、醇提物及化学对照品盐酸 小檗碱粉末少量，与KBr混合，研磨均匀后压片，放入光 谱仪中测定。 数据处理：
图1为黄连药材及其水提取物、80％乙醇提取物和主要成分盐酸小檗碱的红外光谱图 表1为盐酸小聚碱的红外谱峰归属情况。
比较图 1 各谱图的吸收峰可知，盐酸小檗碱 1505 cm1 芳环骨架振动峰在整体谱图中表现的 峰越强，峰形越细长，则该混合物中的盐酸小檗 碱的含量越高。除此之外，各谱图中 1365 ， l277 ， 1 l229，l036 cm 的存在也可以帮助判断小檗碱 在混合物中含量的高低；另外，通过判断谱峰之 间的比例也能帮助辨别盐酸小檗碱在混和物中的 比例。
阴性试验： 制备盐酸小檗碱阴性试液，依所给色谱条件 操作，得色谱图，与对照品、供试品色谱 图比较，结果见图2。表明在、盐酸小檗碱 峰处无干扰。
IR和HPLC 的 比较
IR定性分析 能够简单快速 地提供黄连中 主要化学成分 的定性与半定 量信息。
HPLC定量分析 简单可行，重 复性好，可作 为检测盐酸小 檗碱含量的质 量控制。
黄连中小檗碱的研究
黄连，中药材具有清热燥湿，泻火解毒 的功效，可用于湿热内蕴所致黄疸，呕吐， 泻痢，温病高热，目赤，牙痛，心烦不寐， 心火亢盛，心悸不宁，消渴；外治湿疮， 湿疹，耳道流脓，疮疡。姜黄连清胃，止 呕，于寒热互结，湿热中阻，痞满呕吐时 施用；
黄连的有效成分主要为生物碱，其中小 檗碱的含量最高。小檗碱为一种异喹啉生 物碱，又称黄连素，熔点145℃。小檗碱对 溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌、淋球菌 和弗氏、志贺氏痢疾杆菌均有抗菌作用， 并有增强白血球吞噬作用。因此，快速准 确地测定黄连中小檗碱含量，对于中草药 有效成分的分析研究有着重要意义。
黄连中小檗碱的检测
红外光谱研究
高效液相色谱研究
两种分析方法的比较
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原理：黄连所含化学成分不同，其红外光谱的特征 吸收峰的位置、峰形、峰强也就不同。
实验仪器 样品处理
A B 红外光谱研究 （定性）
C 实验步骤
D 数据处理
实验仪器： 采用Spectrum Gx型的傅里叶变换的红外分析光谱，检测器 为DTGS的检测扫描器，红外光谱范围为4000—400 cm1
标准曲线： 精密称取盐酸小檗碱对照品12.30mg，置50ml量瓶中， 加入甲醇，超声15min溶解，并稀释至刻度。对照品贮备 液设进样量为1、2、3、5、7、10μl,依次注入色谱仪，测 定峰面积，以盐酸小檗碱对照品含量（X）为横坐标，以 峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线。进行线性回归， 得回归方程。盐酸小檗碱回归方程及线性系数见图1.盐酸 小檗碱含量在0.246~2.460μg范围内与峰面积积分值呈良 好的线性关系。
原理：乙腈-0.1%磷酸为流动相进行分离以高效液相 色谱仪进行检测，利用峰高进行定量分析。•
A B C 供试品制备 D 数据处理 高效液相色谱 （定量）
实验仪器 色谱条件
实验仪器： Agilent1200高效液相色150mm×4.60mm,5μm） 流动相为乙腈-0.1%磷酸（25∶75） 流速为1ml· min 1 检测波长为340nm 柱温为25℃ 进样量10μl 每1000ml0.1%的磷酸溶液加入50μl的三乙胺（扫尾 剂）进行洗脱
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供试品的制备：
酸性水溶剂煎煮法提取黄连中的盐酸小檗碱，再利用 热蒸馏水溶解，抽滤，重结晶，最后用无水乙醇溶解，抽 滤，重结晶，的盐酸小檗碱精制品。取精制样品适量，研 细，精密称取6.3mg，置容量瓶中，精密加入甲醇50ml， 密塞，称定重量，超声处理30min，放冷，过滤，再称定 重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，即得。