[作者简介] 王建华(1968-),男,博士,高级工程师,主要从事食品卫生检验研究。
【化学测定方法】气相色谱-质谱法测定蔬菜中的16种多环芳烃王建华1,2,姜海燕3,王 惠2,王修林2(11青岛出入境检验检疫局,山东青岛 266002;21中国海洋大学,山东青岛 266003;31山东中粮花生制品进出口有限公司,山东青岛 266001)[摘要] 目的:研究蔬菜中多环芳烃(P AH s)残留量的气相色谱-质谱分析方法。
方法:蔬菜经过环己烷提取,硫酸溶液和PS A固相萃取柱净化,用气相色谱-质谱选择离子监测模式(SI M)定性和定量检测多环芳烃。
结果:16种P AH s加标回收率范围在60%～120%之间,相对标准偏差为8%～20%,检测限范围为01009～0106μg/kg。
结论:本方法适合蔬菜中P AH s检测。
[关键词] 固相萃取;多环芳烃;蔬菜;气相色谱-质谱[中图分类号] O657163 [文献标识码] A [文章编号] 1004-8685(2006)02-0197-03 环境中的多环芳烃(polycyclic ar omatic hydr ocarbons, P AH s)主要产生于矿物的不完全燃烧,部分P AH s有致畸、致癌、致突变作用,P AH s的监测已越来越受到人们的重视。
目前,测定大气、水、土壤中P AH s的文献较多[1～3],蔬菜通过吸收水和大气中的粉尘而含有了P AH s,但关于蔬菜中P AH s测定方法的文献较少[3,4]。
本文中,我们首次采用环己烷提取,硫酸溶液和PS A固相萃取柱组合净化,用GC-MS同时定性和定量检测蔬菜中美国EP A优先表中所列的16种P AH s。
1 材料与方法111 仪器与试剂Agilent6890气相色谱-5973N质谱联用仪,配7683自动进样器,分流/不分流进样口(美国Agilent公司);毛细管气相色谱柱为HP-5MS(Phenyl Methyl Sil oxane5%二苯基-95%二甲基硅氧烷,30m×0125mm×0125μm);ULTRAT URRAX 均质器(德国I K A公司);离心机(Eppendorf5810);I K A快速混匀器(德国I K A公司中国广州工厂);移液枪:012、110、10m l (法国Gils on公司);GI L S ON ASPEC XL全自动固相萃取仪(法国Gils on公司);PS A固相萃取柱(500mg,6m l,美国Varian公司)。
P AH s标准品(R iedel-dehaen公司):根据需要将10mg/L储备液用环己烷逐级稀释成工作溶液;水经m illi pore 纯水器纯化;硫酸溶液(9mol/L),取硫酸原液,用水稀释一倍。
112 样品处理提取:称取1010g样品于50m l塑料离心管中,加入环己烷30m l均质2m in,6000r/m in离心5m in,将上清液转入125m l分液漏斗中;将残渣用20m l环己烷重复提取1次,离心后合并上清液于分液漏斗中。
净化:在分液漏斗中加入10m l硫酸溶液进行磺化,充分震荡后静置分层,弃去下层硫酸层(如有必要重复一次);然后加入1g氯化钠粉末,10m l纯水洗涤环己烷层,静置后弃去水层。
将环己烷层转入100m l鸡心瓶中,旋转蒸发至干;精确加入2m l环己烷清洗瓶壁,置于全自动固相萃取仪中,PS A柱先用5m l环己烷活化,取样品液1m l(相当于5g样品)过PS A 柱,加入15m l环己烷洗脱;将洗脱液收集到50m l鸡心瓶中旋转蒸发至干;以1m l环己烷准确定容,充分洗涤瓶壁后转入进样瓶中准备检测。
113 气相色谱-质谱测定11311 气相色谱条件 载气:高纯氦气,恒压模式1917p si (1p si=6894176Pa),柱温程序:初始温度70℃,保持410m in,以25℃/m in的速率,升温到150℃,以3℃/m in的速率,升温到200℃,再以8℃/m in的速率,升温到280℃保持1010m in;进样量:1μl。
11312 质谱条件 离子源温度:150℃,四极杆温度:230℃,色谱-质谱接口温度:280℃;离子化方式:E I;电子能量:70e V;调谐方式:自动调谐;全扫描(S CAN)测定方式的扫描范围50～450m/z。
2 结果与讨论211 P AH s的分离和测定按照所列的色谱/质谱条件,用SC AN方式对16种P AH s 进行扫描,测得其总离子流图(见图1)。
然后根据各待测化合物的保留时间和质谱图,确定选择离子监测(SI M)的采集时间和特征离子,并以3倍信噪比计算检测限,结果见表1。
图1 16种多环芳烃的总离子流图11萘;21苊烯;31苊;41芴;51菲;61蒽;71荧蒽;81芘;91苯并(a)蒽;101屈;111苯并(k)荧蒽;121苯并(b)荧蒽;131苯并(a)芘;141茚并(123-cd);151芘二苯并(a,h)蒽;161苯并(ghi)苝表1 16种PAHs的特征离子和检测限序号中文名称保留时间选择离子检测限(μg/kg)1萘5133128 129 127 102010152苊烯7183152 153 151 150010103苊8135153 152 151 150010094芴9189166 165 167 139010125菲13181178 179 176 152010156蒽14102178 176 179 152010187荧蒽20183202 203 200 101010088芘22120202 203 200 101010079苯并(a)蒽28137228 226 229 22701012 10屈28152278 279 276 13901017 11苯并(k)荧蒽32106253 252 250 12601015 12苯并(b)荧蒽32124252 253 250 12601012 13苯并(a)芘33121252 253 250 12601025 14茚并(123-cd)芘38100276 277 138 24801049 15二苯并(a,h)蒽38125228 226 227 20201060 16苯并(ghi)苝39109276 277 252 13801030212 样品处理条件的优化21211 净化条件的选择 用环己烷作提取剂时,植物中一些亲脂性物质可被提取剂提取出来造成干扰。
故根据文献采用硫酸溶液除去亲脂性共提物。
选用9mol/L的硫酸溶液,并加入氯化钠粉末饱和水层。
加入9mol/L的硫酸溶液后,菠菜样品环己烷层呈黄色,硫酸层呈深绿色;辣椒样品环己烷层呈棕色,硫酸层呈深绿色。
进行旋转蒸发浓缩后,颜色分别为深绿色和深褐色的粘稠物质。
经测定发现仍有较多干扰峰。
PS A固相萃取柱可以吸附脂肪酸等植物基体杂质,广泛用于农残测定。
采取PS A柱固相萃取净化后洗脱液为黄色澄清液体。
经对比其净化效果较好,干扰杂峰明显减少,而且不吸附P AH s。
21212 固相萃取洗脱液用量选择 分别使用10、15、20m l的环己烷洗脱进行对比,用10m l环己烷洗脱时,表1中前13种成分回收率接近100%,但后3种成分的回收率几乎为零。
再加入5m l环己烷继续洗脱,前13种成分回收率为零,后3种成分的回收率接近100%。
分别使用15、20m l环己烷进行洗脱时16种成分的回收率都接近100%,并无明显差别,所以选定15m l正己烷进行洗脱。
213 标准工作曲线的绘制取P AH s标准储备液用环己烷分别稀释成20、40、100、400、2000μg/L的系列标准溶液进行测定,绘制标准曲线见表2。
各组分浓度与峰面积的线性关系和相关系数除苊为01992外,其他均为01999。
表2 待测化合物的线性方程和相关系数序号名称标准曲线相关系数1萘Y=2117e+004X-2126e+00401999 2苊烯Y=2134e+004X-2179e+00401999 3苊Y=1150e+004X-5107e+00401992 4芴Y=1182e+004X-3110e+00401999 5菲Y=2172e+004X-3113e+00401999 6蒽Y=2165e+004X-5171e+00401999 7荧蒽Y=3122e+004X-5107e+00401999 8芘Y=3130e+004X-8162e+00401999 9苯并(a)蒽Y=3107e+004X-4143e+00401999 10屈Y=3100e+004X-3178e+00401999 11苯并(k)荧蒽Y=3185e+004X-6165e+00401999 12苯并(b)荧蒽Y=4142e+004X-6115e+00401999 13苯并(a)芘Y=3162e+004X-8124e+00401999 14茚并(123-cd)芘Y=2104e+004X-5167e+00401999 15二苯并(a,h)蒽Y=2106e+004X-1192e+00401996 16苯并(ghi)苝Y=2178e+004X-8113e+00401999214 方法的回收率及精密度21411 空白实验 分析表明本实验所用环己烷、9mol/L硫酸溶液、氯化钠粉末、纯水中均无干扰峰。
21412 回收率实验 本方法对基质复杂辣椒样品分别添加4、8、20ng/g3个浓度进行6次回收率的测定,回收率范围在60%～120%之间,相对标准偏差在8%～20%。
215 实际样品的分析和讨论实际样品中P AH s含量见表3。
辣椒色谱图见图2。
表3 辣椒和菠菜样品中PAHs含量(μg/kg)序号名称鲜辣椒鲜菠菜1萘12139131872苊烯213801163苊617881734芴9131171955菲33197551846蒽310551977荧蒽11166321618芘8149111559苯并(a)蒽1129315310屈11991318511苯并(k)荧蒽11319012812苯并(b)荧蒽1132411213苯并(a)芘1172113914茚并(123-cd)芘Nd414415二苯并(a,h)蒽ND019816苯并(ghi)苝ND1105[作者简介] 祁广建(1954-),男,副主任检验师,主要从事液相色谱分析工作。
【化学测定方法】梯度洗脱HPLC法测定化妆品中9种防腐剂的含量祁广建1,沈国英2,陈 颖1(11辽宁省大连市疾病预防控制中心,辽宁大连 116021;21辽宁省大连市卫生监督所,辽宁大连 116011)[摘要] 目的:同时测定化妆品中9种防腐剂。
方法:采用AcCN/0105mol/L NaH2P O4(pH=315)作流动相的高压梯度测定。