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猪细菌、病毒病检疫


官方允许使用于欧盟成员国,用来区分E2亚单位疫苗(Erns抗体阴性) 接种猪于猪瘟病毒感染猪(Erns抗体阳性)
竞争ELISA(针对E2蛋白) 阻断ELISA 双抗体夹心ELISA 阻断ELISA 竞争ELISA
二、非洲猪瘟




非洲猪瘟(african swine fever,ASF)是猪的一种DNA病毒病,是 非洲猪瘟病毒科非洲猪瘟病毒属中的唯一成员。其特征是死亡率高, 皮肤有变红的区域和内脏器官严重出血。其病型可分为最急性型、急 性型、亚急性型、慢性型和隐性型。临诊症状和古典型猪瘟十分相似。 1.国际标准 OIE《陆生动物诊断试验和疫苗手册》(2008)第2.1.12章《非洲猪瘟 》规定了国际贸易中推荐使用的检测技术,包括病毒分离与鉴定、 PCR、ELISA等。 2.国内标准 国家标准:非洲猪瘟诊断技术GB/T 18648-2002 行业标准:非洲猪瘟检疫技术规范SN/T 1559-2010 3.部分商品化试剂盒 现阶段主要有西班牙的非洲猪瘟ELISA抗体检测试剂盒。
细菌/病毒性猪病鉴定
主要猪病检测项目



猪瘟 非洲猪瘟 口蹄疫 高致病性蓝耳病 伪狂犬 传染性胃肠炎 传染性胸膜肺炎 流行性腹泻
一、猪瘟



猪瘟(Swine Fever SF)是猪的一种高度接触性传染病,在欧洲称为 古典猪瘟(Classical Swine Fever ,CSF)。猪瘟病毒(Classical swine fever virus ,CSFV)是黄病毒科(Flaviviridae)的瘟病毒 属(Pestivirus)的一个成员。瘟病毒是具有囊膜的正链小RNA病毒。 这个属的成员还有在抗原性和结构密切相关的牛病毒性腹泻病毒 (Bovine viral diarrhea virus,BVDV)和羊边界病毒(Border disease virus,BDV)。CSFV与BVDV之间的基因组具有高度同源性, 抗原关系密切,有血清学交叉反应。 主要检测方法:病毒分离与鉴定、免疫过氧化物酶结合试验(IPMA)、 间接免疫荧光试验(IFA)、间接酶联免疫吸附试验(ELISA)、血清 中和试验(SN)、荧光定量RT-PCR检测(SYBR-Green I) 国际标准:OIE《陆生动物诊断试验和疫苗手册》 国内标准GB/T16551-2008《猪瘟诊断技术》、GB/T27540-2011《猪瘟 病毒实时荧光RT-PCR检测方法》、SN/T1379-2010《古典猪瘟检疫规 程》


检测技术概述

20世纪40年代以来,口蹄疫诊断技术有了较大的发展,从最早的病毒 分离和补体结合试验到包括病毒中和试验在内的其它血清学方法,以 及现在推广应用的ELISA和PCR技术,逐渐向更敏感、特异、方便、快 速的方向发展,可以用非结构蛋白抗体鉴别感染和免疫动物的检测方 法研究。尽管如此,经典的病毒分离、补体结合试验和病毒中和试验 依然是最可靠准确的方法。
1.国际标准 OIE《陆生动物诊断试验和疫苗手册》(2012)第2.1.5章《口蹄疫》规 定了国际贸易中推荐使用的检测技术,包括补体结合试验、病毒中和试 验、固相竞争ELISA、液相阻断ELISA等。 2.国内标准 国家标准,《口蹄疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法》(GB/T 275282011)、《口蹄疫诊断技术》(GB/T 18935-2003 ),《口蹄疫检疫技 术规范》(SN/T 1181-2010),规定了荧光RT-PCR、微量补体结合试验、 食道探杯查毒试验、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、病毒中和试验、 液相阻断ELISA、病毒感染相关抗原(VIA)琼脂凝胶免疫扩散试验 (AGID)七种诊断技术为我国出入境和国内动物口蹄疫的诊断方法,以 及固相竞争酶联免疫吸附试验。
部分商品化PRRS抗体检测ELISA试剂盒
试剂盒名称 HerdChekPRRS HerdChek PRRSX3 LSIVET SUIS PRRS A/S LSIVET SUIS PRRS E/S INGEZIM PRRS UNIVERSAL BioChek PRRS GreenSpring TM PRRS Antibody Elisa Test Kit ELISA形式 间接ELISA(N蛋白) 间接ELISA 间接ELISA(GP蛋白) 间接ELISA(GP蛋白) 间接ELISA(N蛋白) 间接ELISA(N蛋白) 间接ELISA(N蛋白) 检测范围 通用型抗体 通用型抗体 美洲型抗体 欧洲型抗体 通用型抗体 通用型抗体 通用型抗体 国家及其公司 美国IDEXX公司 美国IDEXX公司 法国LSI公司 法国LSI公司 西班牙Ingensa公司 荷兰BioChek公司 马来西亚GreenSpring公司
部分商品化CSFV检测ELISA试剂盒
试剂盒名称 HerdChek CSFV抗体检测试 剂盒 HerdChek CSFV抗原检测试 剂盒 国家及其公司 美国IDEXX公司 美国IDEXX公司 美国IDEXX公司 阻断ELISA,检测猪血清及血浆中的CSFV抗体 抗原捕获ELISA,用来检测猪外周血白细胞、全血、细胞培养物、和组 织培养物中的特异性CSFV抗原
CHEKIT 猪瘟病毒血清抗体检 测试剂盒
CHEKIT 猪瘟病毒抗原检测试 剂盒
间接ELISA,针对E2糖蛋白,适用于区分猪瘟病毒感染与牛病毒性腹泻 病毒和边界病病毒猪群。
抗原捕获ELISA,该试剂盒与抗体检测试剂盒联合使用可在感染后前两 周检测到病毒。
美国IDEXX公司
CHEKIT 猪瘟病毒标记检测试 剂盒
检测技术概述




非洲猪瘟与猪瘟的其他出血性疾病的症状和病变都很相似,他们的亚 急性型和慢性型在生产现场实际上是不能区别的,因而必须用实验室 方法才能鉴别。 实验室诊断方法包括病毒分离、病毒抗原和基因组DNA的检测及抗体 的检测。具体的实验室诊断方法有补体结合(CF)试验、琼脂扩散试 验(AGID)、红细胞吸附(HAD)试验、对流免疫电泳(CIEP)、反 向辐射免疫扩散试验、直接荧光抗体试验(FAT)、间接荧光抗体 (IFA)试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹试验、聚合酶 链反应(PCR/Real-time PCR)。 PCR可有效地用于检测血液或组织中的的病毒基因组,这项技术尤其 适用于样品因腐败不适于做病毒分离和抗原检查时。在ASF呈地方性 流行的地方,确诊最好用ELISA,结合另一种血清学试验方法如IFA或 抗原检测方法如FAT。 目前发展起来实时荧光定量PCR检测技术,在2002年Scott M. Reidb, Geoffrey H.等以VP72为靶基因,建立了实时荧光定量PCR检测技术。
检测技术概述


对于活猪,进行全血病毒和血清中抗体的检测是CSFV诊断的必选方法。 因此,检测病死猪器官样品中的病毒或抗原是最适宜的诊断方法。由 于经常在种猪中监测到抗反刍兽瘟病毒病原抗体,因此筛选试验后必 须进行确诊,选用适当的方法鉴别BVD、边界病病毒和CSFV抗体的试 验极为重要。过氧化物酶标中和试验(NPLA),荧光抗体病毒中和试 验(FAVN)和酶联免疫吸附试验(ELISA)适合。三种试验敏感性和 特异性较高,NPLA和ELISA结果可用肉眼观察,也能通过仪器自动测 定。 根据不同的检测方法,采集不同的样品: 荧光抗体试验:采集扁桃体、脾、肾和回肠远端,并在无防腐剂的冷 藏条件下运送,样品不能冻结。 病毒分离和分子生物学检测:扁桃体为首选器官,也可采集全血(抗 凝)、血清、淋巴结和脾。 抗体检测:采集感染猪血清,样品应保持低温运输。
五、伪狂犬

伪狂犬病也称为奥耶兹基氏病是由a疱疹病毒引起的传染病,该病主 要与猪有关,猪是其自然宿主,病猪康复后仍呈隐性感染。 病原鉴定:分离病毒可以将采集的脑、扁桃体或采自鼻喉的样品匀浆 后接种易感细胞系,如猪肾细胞(PK-15)或SK6细胞、原代或传代 细胞系加以增殖,通过免疫荧光、免疫过氧化物酶或特异性抗血清中 和试验检测特征性细胞病变加以鉴定,另外,还可以用PCR方法鉴定。
CeditestCSFV抗体检测试剂 盒 CeditestCSFV2.0抗体检测试 剂盒 CeditestCSFV2.0抗原检测试 剂盒 CeditestCSFV2.0抗体Erns检 测试剂盒 CIVTEST SUIS HC/PPC
美国IDEXX公司 荷兰Prionics Lelystad公司 荷兰Prionics Lelystad公司 荷兰Prionics Lelystad公司 荷兰Prionics Lelystad公司 西班牙海博莱生物 大药房


血清学试验:可用病毒中和试验、胶乳凝集试验或酶联免疫吸附检测 伪狂犬病抗体。OIE推荐的一种国际标准血清规定了敏感性的下限, 用于本病血清学实验室常规检测。
检测技术概述


1.国际标准 OIE《陆生动物诊断试验和疫苗手册》(2008)第2.2.2章《伪狂犬病 (奥耶兹基氏病)》规定了国际贸易中推荐使用的检测技术,包括病 毒分离与鉴定、PCR、中和试验、ELISA等。 2.国内标准 国家标准, 《伪狂犬病诊断技术》(GB/T 18641-2002 ),67行业 标准,《伪狂犬病检疫技术规范》(SN/T 1698-2010 ),《猪伪狂犬 病免疫酶试验方法》(NY/T678-2003)分别对病毒分离和鉴定、聚合 酶链式反应、家兔接种试验适用于伪狂犬病毒的检测;中和试验、 ELISA适用于非免疫动物伪狂犬病抗体的检测以及免疫后抗体水平的 检测;胶乳凝集试验适用于实验室和现场对伪狂犬病抗体的早期检测。
检测技术概述

样品的采集和处理 病毒分离与分子生物检测:采集抗凝血液、组织液及脾脏、扁桃体、 肾脏、淋巴结等病变脏器。 血清学检测:采集猪血清。
三、口蹄疫

口蹄疫(foot-and-month disease,FMD)是由口蹄疫病毒感染引起的偶 蹄动物共患的急性、热性、接触性传染病 。该病有7个血清型,分别是O、 A、C、SAT1、SAT2、SAT3和亚1型。动物感染一种血清型病毒后不对其他 型病毒具有免疫力。在临床上,FMD不能与其他水泡性疾病,包括猪水泡 病、水泡性疹和水泡性口炎项区别,因此需进行实验室诊断。牛、羊、 猪等偶蹄动物都易感染口蹄疫 。国内主要感染为A型、O型、亚1型。
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