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病理标本制备之包埋与切片 (1)


为宜
包埋机的清洁、维护与保养

包埋机24小时开机。
每天使用完毕要清理台面、沟槽及接 蜡盒,清除蜡屑及冰霜,保持机器干 净整洁
每月定期清理熔蜡槽,清洗过滤网




定义:把蜡块制成
一定厚度的蜡片的过
程叫做切片。
切片厚度:3-5um,


淋巴组织可小于 3um,
脑组织6-8um
工具:镊子、毛笔、毛 刷、铅笔等 耗材:载玻片、刀片等
⑵定期用二甲苯清洗蜡块夹头及刀座,上机
油,以确保机器的正常状态
常规石蜡切片质量的基本标准
优 质 标 准 ⒈组织切面完整,小标本切数面 ⒉切片薄(3~5μ m),厚薄均匀 ⒊切片无刀痕、裂隙、颤痕 ⒋切片平坦,无皱褶、折叠 ⒌切片无污染 ⒍无气泡,盖片周围无胶液外溢 ⒎透明度好 ⒏细胞核与细胞浆染色对比清晰 ⒐切片无松散,裱贴位置适当 ⒑切片整洁,标签端正粘牢,编号清晰 合 计 满 分 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 100
增加蜡块冷冻时间 /降低冻台温度、换新刀;适当增加切 片厚度 3)较脆组织:肝、脾、淋巴结等 (容易出现渔网纹或裂隙) 粗修时注意组织表面要光滑,稍退刀后再切片,速度要慢
4)有钙化的组织 (容易碎片)
5%的盐酸浸泡蜡块片刻后切片
切片机的维护与保养
⑴每日切完片后将机器表面及周围的石蜡残
渣和切片废物清理倒掉
其他ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ助工具:
镊子、酒精灯等
包埋机使用方法
包埋机结构组成及性能参数:

包埋机熔蜡槽、出蜡孔、储块槽、镊子插槽及加热 板(50-80℃)


冷冻台(-10-0℃)
控制面板:可设定时钟、开关机时间各部位加热温 度 蜡液流量调节旋钮、照明开关、接蜡盒

石蜡包埋程序:1
打开经过脱水的包埋
盒,根据组织块大小
常规石蜡切片的制备
(1)组织的固定 (2)组织的脱水、透明和浸蜡
(3)组织的包埋
(4)组织的切片 (5)染色和封片

什么是包埋?

包埋就是将处理好的组织用包埋剂包成块状,使其 有一定的硬度支撑以利于切片。

包埋剂的种类:石蜡、 树脂、塑料、火棉胶等 包埋的方式: 全自动包埋机 手工及

全自动组织包埋机的包埋方法
包埋蜡液要适中,不可过多或过少,以包埋盒的
1/3为宜。
认真核对组织块的数量,注意脱水盒盖上不要遗
漏组织
包埋的质量控制
①包埋时组织要尽量平整,尤其是穿刺组织,要轻
轻压平;遇较碎的组织,要尽量包在包埋模具的
中央,并且要平整。
②皮肤、血管、粘膜等组织要按由内到外的方向垂
直立埋,多条组织方向要一致,管状标本要以横 断面平贴于模具垂直立埋 ③严禁组织污染或丢失 ④包埋模具中的石蜡不要灌注过满,以塑料盒的1/3
石蜡切片技术是病理科最基础最重
要的病理技术,一张高质量的石蜡切片
是获得准确病理诊断的重要保证。在病 理诊断工作中技术员和医生有着同样重 要的地位,好比一棵大树,病理技术是 根,只有根深才能叶茂。
谢谢!
轮转式切片机的操作程序
7. 玻片先立放片刻,待水分控干后再平铺于烤片 机上3-5分钟,或放入烤箱65-70度10-15分钟即 可染色。
影响切片质量的因素
⑴ 组织块:过大、过小、过软、过硬、脆,
有钙化、线头、钢丝,脱水欠佳等
⑵ 刀片不锋利
⑶ 操作者
切片的质量控制

切片刀或一次性切片刀片必须锋利 载玻片必须洁净、光亮 组织切面要暴露完整,切出最大面 切片厚度为3~5μm、均匀,无刀痕、颤痕、皱折、 开裂、缺损、松解等 捞片位置适中,应为下2/3中部,小组织应捞两排 六面
选择合适的包埋模具
石蜡包埋程序:2
左手拿模具放在出蜡口 下 方 , 向 后 轻 推 PARAFFIN板,使石蜡 注入模具 1/3 处后,将 模具放在小冷冻台上
石蜡包埋程序:3

右手拿镊子将 组织块放入模 具中央轻压组 织块盖上包埋 盒
石蜡包埋程序:4
左手拿起模具从右上
角注入石蜡至包埋盒
1/3 处 , 平 稳 移 至 冷
组织四周留白 2-4 ㎜。修好的蜡块按标本号有
序的摆放在冷冻台上。
轮转式切片机的操作程序
2. 从冷冻台取一蜡块夹于切片机的样品头上,对刀 (使蜡块平面与切片刀刃平行),推进刀座,使 刀片接近蜡块。
3. 解开右侧摇轮的固
定锁,左手握粗进 轮,右手握样品杆 摇轮,粗削蜡块至 暴露最大面
轮转式切片机的操作程序

包埋剂石蜡:块状及颗粒状,熔点分54-56℃、 56-58℃、58-60℃、60-62℃ ,常用的为56-58℃、 58-60℃两种 蜂蜡:呈黄色或淡黄色, 较粘稠,用于调节石蜡的 熔点及韧度。 石蜡与蜂蜡的比例通常为 5/1, 加蜂蜡的包埋块不易 干裂皱缩,适合长久保存。


包埋模具:
材质有不锈钢和铸铁, 型号分大中小四个。
病理标本制备之包埋与切片
解放军301医院 巴恩平
与病理诊断质量控制有关的程序:

检验前程序 检验程序: 检验后程序
包括临床科室取材、标本输送、病理检查申请 单填写、标本的接收、编号。

包括从大体标本检查、取材、制片直至病理报 告发出的全过程。

病理诊断报告内容的表述和书写应准确和完整, 宜使用国际规范的术语;病理诊断报告书需有专 人发送,并与接收人员履行签收手续并登记备查。
冻台
石蜡包埋程序:5

约 5 分钟左右蜡块 完全冷却,从模 具中取出修块, 进入下一程序 - 切 片。
包埋中的注意事项
包埋机电源应24小时接通,不能随意断电
石蜡及包埋模具应提前放入包埋机的各自位置,
并及时补充石蜡以使其提前溶化
为防止标本污染,包埋所用镊子每包一例标本都
要在酒精灯上进行烧灼,必要时用纸巾擦干净。
轮 转 式 切 片 机 的 操 作 程 序
轮转式切片机的操作程序
1. 准 备 工 作 : 打 开 冷 冻 台 ( -5℃ ) 、 烤 片 机
(70℃ )、展片机并蓄满干净水(45℃ ),毛笔
和镊子分别放于切片机的左右两侧,装好刀片,
调整刀角4-6度(一般6度),切片厚度4 um。 修块:用刀片将蜡块四周的多余蜡修掉,并将
4. 开始切片,左手拿毛 刷,右手摇轮,以上 臂带动前臂,匀速摇 轮,切出理想的切片。
轮转式切片机的操作程序
5. 左手拿毛刷翘起切 片,右手拿镊子夹 起切片放入 30% 的 酒精液体中,用干 净的玻璃板将切片 移至展片水槽内, 用镊子打开细小皱 褶。
轮转式切片机的操作程序
6. 捞片,左手拿载玻片,右手拿镊子,将玻片深 入水槽倾斜45-60度,右手用镊子抵住切片, 将切片贴于玻片上(下2/3中部)。


每切完一个蜡块后,必须认真清理水面, 不得遗留其它病例的组织碎片,以免污染


认真核对玻片与蜡块编号,严防差错发生
捞片位置适中, 应为下 2/3 中部, 小组织应捞两 排6面
几种常用的切片技巧
1)较硬组织:子宫、前列腺、成骨组织等 (容易出现颤痕) 蜡块温度不宜过低,可以减少蜡块冷冻时间
2)较软组织:脂肪等 ( 难以切片或切片容易卷起)
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