规定杂质峰数目 规定杂质峰面积
（二）硒的检查
有毒
来源 合成中用二氧化硒(SeO2)脱氢
方法 药物
氧瓶燃烧
二氨基萘比色法测定
（三）有机溶剂残留量的检查
以地塞米松磷酸钠为例 GC法
甲醇
（灵敏度法） 不得出峰 检测限= 3.1ng
丙酮
≤5.0% 内标法 + 校正因子
（母核） 甾体激素 H2SO4 类药物 H3PO4
HClO4 HCl
呈色
与硫酸显色反应
醋酸可的松 炔雌醇 显 色 黄或微 带橙 橙红 荧光 加水稀释 褪色并澄 清 絮状↓玫红
黄绿
炔雌醚 泼尼松 泼尼松龙
橙红 橙 深红
黄绿
↓红色 黄→蓝绿 絮状↓灰
(二) 官能团的反应
1、C17 – α – 醇酮基 呈色反应 肾上腺 皮质激 素药物
此外
CH3 H H O H H OH C CH
炔诺酮
H3C H H O H H
OH C CH
炔诺孕酮
返 回
一、结构与性质 1. 肾上腺皮质激素
主要活性基团 性 质
△4 –
3–酮
UV、与羰基 试剂反应
还原性
C17 – α – 醇酮基
2. 雄性激素及蛋白同化激素
主要活性基团
△4 – 3–酮
性
质
UV、与羰基 试剂反应 可成酯
O O H H H O H
苯丙酸诺龙
孕激素
O CH 3 CH 3 H H O H CH 3 H
黄体酮
孕激素
O CH 3 CH 3 H H O CH 3 H CH 3 O O CH 3
醋酸甲地孕酮
雌性激素
CH3 H H HO H
OH C CH
炔雌醇
雌性激素
CH 3 H H HO H H OH
雌二醇
C17 – β – 羟基
3. 孕激素
主要活性基团
△4 – 3–酮
性
质
UV、与羰基试 剂反应
C17 –甲酮基
与亚硝基铁氰 化纳反应
4. 雌性激素
主要活性基团 性 质
UV、与重氮苯 A环为3–OH 苯环 磺酸盐反应 C17 –乙炔基 C17 –羟基 与AgNO3反应 可成酯
返 回
二、鉴别试验 （一）与强酸的呈色反应
νCH
3300cm-1 1615cm-1 3610cm-1
CC
1590cm-1 1505cm-1
苯环的骨 架振动
νOH
酚羟基
3505cm-1
νOH
醇羟基
黄体酮
H H O H
CH3 C O
结构特征：△４-3-酮、C17-酮基
20位酮基
C=O
1
870cm-1 C-H
1615cm1
1700cm-
双键
1665cm-1 3位酮基
（七）TLC法
主要用于甾体激素类药物 制剂的鉴别 方法：对照品法
要求供试品溶液所显主斑点的 颜色和位置与对照品溶液的主斑 点相同。
（八） HPLC法
主要用于甾体激素类药物 制剂的鉴别（如：醋酸曲安奈 德软膏、醋酸氟轻松软膏） 方法：对照品法
要求在含量测定项下记录的 色谱图中，供试品峰的tR与对 返 回 照品峰的tR一致。
供试液：本品+氯仿-甲醇（9：1） 浓度：3.0mg/ml 对照液：供试液（3.0mg/ml）+氯仿-甲醇（9：1） 60μ g/ml 层析：供试液 点样、展开、斑点检出。 对照液
判断：供试液如显杂质斑点，不得多于3个，其颜
色与对照液的主斑点比较，不得更深。
（2）HPLC法（主成分自身对照法） 判定方法：
药物分析教学
基本要求
1．掌握甾体结构类药物的结构特点与分析方 法之间的关系。 2．掌握甾体类药物的鉴别原理与方法。 3．掌握甾体类药物的含量原理与方法。 4．熟悉甾体类药物杂质检查的方法。
返 回
概述
本类药物是一类具有甾体 结构的激素类药物，
C 21
11
具有环戊烷并
多氢菲的 母核
1
2
19
18 C 2 0 12 17 13 16
蓝紫色
淡橙色
不显色
4.有机卤素
呈色
茜素氟蓝 硝酸亚铈
有机氟 有机氯
有机破坏
Fˉ Clˉ
硝酸—硝酸银
AgCl↓
5. 酚羟基
雌激素 重氮苯磺酸 类药物
红色偶 氮染料
6. 乙炔基的沉淀反应
含炔基 的甾体 激素
硝酸银
银盐沉淀
A g N O 3 RCC A g ↓ R C C H
(三)制备衍生物测定m.p.
三、 特殊杂质检查
（一）其他甾体的检查
检查意义：其他甾体与甾体激素药物结 构相似，也有一定的药理作 用而又互不相同.
检查方法（具有一定分离能力）
TLC法（高低浓度对比法）
HPLC法（类似高低浓度对比法）
（1）TLC法（高低浓度对比法）
判定方法：
规定杂质斑点数目 规定杂质斑点颜色
例：氢化可的松中其他甾体的检查
还原性
此外还有斐林试 液、多伦试液
四氮唑盐
OHˉ
呈色
2.C3–酮基和C20–酮基 甾酮类 激素药 物
羰基试剂
呈色
＃常用的羰基试剂：
2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼
3.甲酮基
具有甲酮 基或活泼 亚硝基铁氰化纳 亚甲基的 间二硝基酚 甾体激素 芳香醛 类药物
呈色
黄体酮 其他甾体
亚硝基铁 氰化纳
C
D
3
A
4
10 9 5
B
6
8 7

14
15
基本结构：环戊烷骈多氢菲
分类：
肾上腺皮质激素 甾体激素 雄性激素及蛋 白同化激素 性激素 孕激素 雌激素
肾上腺皮质激素
O HO H OH CH2OH
H O
H
氢化可的松
肾上腺皮质激素
O O HO H O OH CH3 F O H H CH3
醋酸地塞米松
肾上腺皮质激素
20μ g/ml
20μ g/ml
0.57 ～ 0.60 ， 在 239nm 与 263nm 处的吸收度比值 为2.25～2.45
结果判断 在238nm处有 在 239nm 处有最 大 吸 收 ， A 为 最大吸收
（五）IR法 炔雌醇
OH C CH
HO
结构特征：酚羟基、C17 –OH C17 –乙炔基
1. 缩氨基脲的生成
苯丙酸诺龙
盐酸氨基脲 △
缩氨基脲衍生物 m.p.约180℃（分解）
2. 酯的水解
丙酸睾酮
碱性条件
睾酮 m.p.为150℃~ 156℃
（四）UV法
1. 结构依据
△４-3-酮、苯环、其他共轭结构
240nm左 右 280nm左右
2. 示例
曲安西龙 溶剂 甲醇 丙酸倍氯米松 乙醇
浓度
O OH CH 3
OH
H
H OH H
CH 3 H F O
曲安息龙
肾上腺皮质激素
H O CH3 ONa O OH H OH H P O
HO
CH3 H F O
ONa
地塞米松磷酸钠
雄性激素
CH 3 CH 3 H H O H OH CH 3
甲睾酮
雄性激素
O
O CH3 H H H H
O
丙酸睾酮
蛋白同化激素