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细菌与噬菌体遗传规律分析

细菌与噬菌体遗传规律分析
E.coli的连锁群
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几个Hfr菌株的线性连锁群的产生
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(四)细菌重组的特点
形成部分二倍体 偶数次交换,形成有活性的重组体
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1、形成部分二倍体
部分二倍体:这种含有一个亲体F-全部 基因组和另一亲体部分基因组的合子叫 部分合子/部分二倍体。
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F
因 子 的 整 合 和 环 出
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附加体 象F因子既可独立存在于染色体之外作为
一个独立的复制子,也可整合到大肠杆 菌染色体中作为大肠杆菌复制子的一部 分的遗传因子,称为附加体。
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(三)中断杂交实验 1954年Wollmun与Jacob以大肠杆菌为材
料,他们想了解Hfr品系什么时候把它的 基因授给F-细胞。
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实验材料 HfrF+:Strs azir tonr lac+ gal+ F-: Str r azi s tons lac- gal-
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HfrF+×F-
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实验方法-中断杂交实验
F+× F-
F因子转移的 频率很高,但 细菌DNA间 的重组率很低, 故称F+为低频
重组品系 (low
frequence recombination,
Lfr)
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电镜图
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Hfr(high frequence recombinvation)
抗phage突变型: 抗T1-phage突变型Tonr,(野生型Tons )—
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(二) F因子/性因子/致育因子 F因子:环状DNA,含6×104个bp,约为
大肠杆菌染色体的2%。 由原点、致育基因、配对区三个部分组
成。
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环状F因子的模式图
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两品系在液体培养基里,通气混合培养,定时 取样,猛烈搅拌以中断杂交,释稀菌液,在含 Str的基本培养基上培养。
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实验结
混合时间(min) 结果
8
出现的菌落与 F-相同,说明Hfr的
基因未进入F-
9
出现少量的azir 菌落,说明
azir 己从Hfr 转移到F+
11
出现azir tonr 型的F-菌落
第五章(A) 细菌与噬菌体的遗传分析
细菌的接合与重组 转化 转导
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一、细菌的接合与重组 细菌的突变型 F因子/性因子/致育因子 中断杂交实验
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(一)细菌的突变型
合成代谢功能的突变型——营养缺陷型 分解代谢功能的突变型 抗性突变型
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F-的DNA
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Hfr的部 分DNA
2、偶数次交换,形成有活性的重组体
单交换 部分二倍性线状体 双交换 重组体+线性片断 偶次交换结果:只产生一种重组体,而无相应
的重组体。
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交换1次
无活性的线状体
a
a
A
交换2次
+A
重组体
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18
出现azir tonr lac+型的F-菌落
24
出现azir tonrlac+gal+型的F-
菌落 细菌与噬菌体遗传规律分析
实验说明: Hfr F+的DNA从一端开始,以线性方式逐
段进入F-,这一端叫原点或O点。 O点 azir tonr lac+ gal+
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时间单位法 以转移时间单位(每分钟)作为基因间
(五)F′因子与性导
F′因子:Hfr的染色体上的F因子脱离下来,带 有细菌染色体的部分基因,这种新的F因子称 为F′因子。
特点:能独立复制 F′菌株:具有F′因子的菌株 性导:通过F′因子将供体细胞的基因导入受体
形成部分二倍体的过程叫性导。
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F`因子的形成:
Hfr
F`因子
组成F因子各部分的功能
❖ 原点:是转移的起点。 ❖ 致育基因:其上一些基因编码生成F纤毛的蛋
白质,即F+细胞表面的管状结构,F纤毛与F-细 胞表面的受体相结合,在两个细胞间形成细胞 质桥。 ❖ 配对区:此处与大肠杆菌DNA多处核苷酸序列 相对应(即同源序列),故可通过交换而使F 因子整合到大肠杆菌DNA上。
1、合成代谢功能的突变型——营养缺陷型
合成代谢功能:原养型/野生型在基本培养基 上,具有合成所有代谢和生长所必须的复杂有 机分子的功能。
营养缺陷型:合成代谢过程需大量基本基因的 表达,当其中某一基因发生突变,将使相应的 代谢过程不能进行。
基因型:Met-,Met+
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2、分解代谢功能的突变型
分解代谢的功能突变型:一系列分解代谢功能 的实现,也必须有许多有关基因的表达。其中 任何一个基因突变,将使相应的生化反应过程 不能进行。
Lac-:不能分解乳糖 Lac+:能分解乳糖
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3、抗性突变型
抗药突变型: 抗链霉素突变型:Strr,(野生型Strs) 抗青霉素突变型:Penr ,(野生型Pens )
距单位,可作出Hfr F+的“染色体”上的基 因分布图(基因连锁图)
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在选出的thr+leu+str重组子非选择标记频率同杂 交时间作图
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假如让Hfr F+ × F- 杂交持续2小时 后中断杂交,发现一些F- F+,这说 明Hfr的全部基因转移到F-内,排列到最 后的F因子才进入F-,使F- F+ 。
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F+
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F+与F-
F+:细胞质中具有F因子的大肠杆菌(供体) F-:细胞质中没有F因子的大肠杆菌
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大肠杆菌 DNA
F+
F因子
F-
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