2）在医药学中的应用 ） 荧光光谱仪在医学中的应用是多方面的， 荧光光谱仪在医学中的应用是多方面的，包 括膜结构和功能的研究，抗体形态的确定， 括膜结构和功能的研究 ， 抗体形态的确定 ， 生物 分子的异质研究，药物相互作用的评价， 分子的异质研究 ， 药物相互作用的评价， 酶活性 和反应的测定，荧光免疫分析， 和反应的测定 ， 荧光免疫分析， 体内化学过程的 监测等等。荧光光谱仪用于药物检测是极有效的 监测等等。 工具，应用相当广泛。多种抗疟药、抗生素、 工具 ， 应用相当广泛。 多种抗疟药 、 抗生素 、 抗 结核药、止痛药、强心药、 结核药 、 止痛药 、 强心药 、 抗高血压等药物可直 接或间接用荧光谱仪检测。 接或间接用荧光谱仪检测。 3）在环境保护中的应用 ）
b．刚性共平面结构 ．
c．取代基效应 ． （3）适宜的环境条件：主要指溶剂性质、溶液 值、温度等。 ）适宜的环境条件：主要指溶剂性质、溶液pH值 温度等。
3. 荧光分析仪器
（四）影响荧光测定的因素 1．激发光源 ． 2．温度 ． 3．溶液 ．
2．激发光谱与荧光光谱 ．
（三）荧光与有机化合物结构的关系 （1）荧光效率（fluorescence efficiency） ）荧光效率（ ） ～ 之间 φ = 发射的光子数 / 吸收的光子数 φ 0～1之间 φ 反映荧光物质对吸收光子数转换成荧光发射光子数的能力 性能） （性能） 与物质的化学结构和化学环境有关。 φ 与物质的化学结构和化学环境有关。 （2）分子结构与荧光 ） a．共轭 π 键结构 ．
荧光光谱检测技术
（一）荧光光谱法（fluorescence sqectroscopy） 荧光光谱法（ ） 某物质的分子吸收了外界能量后,能发射出荧光 能发射出荧光,根 某物质的分子吸收了外界能量后 能发射出荧光 根 据发射出的荧光光谱的特征和强度对物质进行定性 和定量的分析方法称为荧光光谱分析法
（ 二 ） 荧光的产生及荧光 光谱 1．荧光的产生 ． ① 吸收光能被激发 ② 无辐射跃迁放出部分能 量 ③ 从第一电子激发态最低 振动能级跃迁回基态的 各振动能级，以光的形 式放出能量——荧光。 荧光。 式放出能量 荧光 ④ 无辐射跃迁放出能量回 到基态最低振动能级。 到基态最低振动能级。 荧光发射波长比吸收的入 射光波长要长些，被物 质吸收的光称为激发光 ， 发出的光辐射称为荧光 。
（五）荧光分析方法和应用 1．定性分析 ． 2．定量分析 依据 ． 3．应用 ． 1）在生物化学中的应用 ） 生物化学是荧光光谱仪应用较为广泛的领域， 生物化学是荧光光谱仪应用较为广泛的领域 ， 大量具有生 物意义的物质，如氨基酸、蛋白质、酶和辅酶、嘌呤、嘧啶、 物意义的物质 ， 如氨基酸 、蛋白质 、 酶和辅酶、 嘌呤 、 嘧啶 、 卟啉、核酸、维生素A、 、 、 、 、 等等 等等， 卟啉、核酸、维生素 、B、C、D、E、K等等，均可用荧光光 谱仪有效进行分析测定。如用荧光法测定血液和动物组织中的 谱仪有效进行分析测定。 生育酚，激发光波长为295nm，发射波长为 生育酚，激发光波长为 ，发射波长为325nm。卟啉类化合 。 物是一类广泛存在于自然界的化合物， 物是一类广泛存在于自然界的化合物 ， 与生命现象关系最为密 切的有叶绿素、血红素、细胞色素、维生素B 切的有叶绿素、血红素、细胞色素、维生素 12等。用荧光光谱 仪对这些化合物进行鉴定和定量分析相当有效。 仪对这些化合物进行鉴定和定量分析相当有效 。 用直接或间接 的方法对核酸（ 和双链多聚核苷酸等） 的方法对核酸（DNA、RNA和双链多聚核苷酸等）进行荧光测 、 和双链多聚核苷酸等 其检测限可低于10 水平， 定，其检测限可低于 -9g/ml水平，选择性也相当高，并可区分 水平 选择性也相当高， 不同结构的核酸。 不同结构的核酸。